冯铁山
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- α毒素诱导家蚕的基因表达模式及调控网络研究
- 家蚕在中国有着悠久的养殖历史，是畜牧业的重要组成部分。虽然现代养殖已经大幅度降低了养殖成本，但各种病害仍给桑蚕业造成巨大的经济损失。黑胸败血芽胞杆菌是家蚕一种常见的病原微生物，能够感染家蚕并导致细菌性败血症。在感染家蚕的...
- 冯铁山
- 关键词：家蚕Α毒素免疫应答基因表达
- 家蚕氨肽酶和类钙粘蛋白与苏云金芽孢杆菌Cry1Ac毒素相互作用（英文）被引量：3
- 2018年
- 苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis生产的晶体毒素被广泛用作农林害虫的杀虫剂。鳞翅目昆虫受体蛋白是阐明其与晶体毒素相互作用的重要模式。文中纯化了苏云金芽孢杆菌的晶体毒素蛋白,质谱鉴定为Cry1Ac毒素,然后重组表达家蚕氨肽酶N (BmAPN6)和类钙粘蛋白(CaLP)结合结构域。利用免疫共沉淀、Far-Western印迹和酶联免疫吸附试验,证明Cry1Ac毒素蛋白和BmAPN6之间的相互作用。在Sf9细胞中,对Cry1Ac毒素的细胞毒活性分析,表明BmAPN6参与Cry1Ac毒素诱导的细胞形态异常和裂解死亡。文中也利用相同的方法,对钙粘蛋白的3个结合位点CR7、CR11和CR12进行相互作用分析,结果表明3个重复结构域是CaLP的Cry1Ac结合位点。上述结果表明,BmAPN6和CaLP可作为Cry1Ac毒素致病的功能性受体,为进一步揭示晶体毒素的致病机制和基因编辑增强家蚕抗病性提供了研究靶标。
- 林平程廷才冯铁山龚娇刘春夏庆友
- 关键词：氨肽酶钙粘蛋白家蚕
- 家蚕氨肽酶(BmAPN5)与黑胸败血芽孢杆菌伴孢晶体(PC)毒素相互作用被引量：1
- 2017年
- 氨肽酶N(APN)属于锌金属肽酶M1(Peptidase_M1)家族的成员,不仅参与蛋白水解过程,而且也作为毒素受体参与病原微生物的致病过程。家蚕氨肽酶家族含有16个成员,其中BmAPN4结合黑胸败血芽孢杆菌产生的伴孢晶体(PC)毒素,为研究该基因家族其他成员是否与PC毒素结合,参与其致病过程。本文克隆家蚕中肠特异表达的氨肽酶家族成员BmAPN5基因,全长3 313 bp,编码953个氨基酸,含有1个锌金属肽酶M1和ERAP1_C结构域。构建原核表达载体,表达和纯化获得可溶性GST-BmAPN5重组蛋白。Far-Western blotting、免疫共沉淀和ELISA等实验结果表明BmAPN5和活化的PC毒素相互结合。通过构建BmAPN5细胞转染载体,转染Sf9细胞系,与PC毒素共孵育,导致细胞形态改变和裂解死亡;同时,乳酸脱氢酶含量测定结果 (LDH)表明BmAPN5参与PC毒素致病过程,导致细胞裂解死亡,使细胞培养基中的乳酸脱氢酶升高。上述结果表明BmAPN5作为一种功能性受体,PC毒素与其相互作用,参与了病原物的致病过程,为进一步揭示病原微生物黑胸败血芽孢杆菌与宿主相互作用的致病机制研究奠定了基础。
- 付剑锋林平冯铁山程冬张权夏庆友程廷才
- 关键词：家蚕氨肽酶相互作用
