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非洲猪瘟血清学诊断和疫苗研究进展被引量：9: 2021年; 非洲猪瘟是一种高度接触性猪传染病,自2018年8月传入我国后呈暴发性流行,目前防控形势依然严峻。因此,开发准确、快速的检测方法和安全、高效的疫苗具有重要意义。由于非洲猪瘟病毒复杂的生物学特性阻碍了疫苗的研发,目前尚无批准上市的商品化疫苗。理论上健康猪只体内不存在非洲猪瘟病毒抗体,血清学检测具有高度的敏感性和特异性,如果检测到抗体反应阳性,即提示猪场出现了感染。论文综述了非洲猪瘟的各种血清学检测方法,以及灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗和病毒活载体疫苗的研究进展,以期为非洲猪瘟的诊断和疫苗的研发提供借鉴。; 栾宇轩张毫王承宝; 关键词：非洲猪瘟非洲猪瘟病毒血清学诊断疫苗

猪传染性胃肠炎华毒弱毒疫苗株及其应用: 本发明公开了一种猪传染性胃肠炎华毒(H)弱毒疫苗株(Transmissible gastroenteritis virus)及其应用。本发明弱毒疫苗株的微生物保藏号是：CCTCC－V200609。本发明TGEV弱毒株安全...; 冯力王承宝时洪艳陈建飞佟有恩王明马思奇; 文献传递

猪轮状病毒Rotavirus A pig/China/NMTL/2009/G9P[23]株的分离与鉴定被引量：8: 2011年; A群轮状病毒(GAR)是引起人类和多种动物腹泻的主要病原体,病原的分离与鉴定是轮状病毒(RV)流行病学、病原学等研究的基础。本研究采用接种MA104细胞的方法,从内蒙古某猪场患病猪腹泻粪便中分离一株病毒,经3次蚀斑克隆纯化后,采用电镜观察、PCR鉴定和序列测定进行分析,结果表明该分离株为猪轮状病毒(PoRV)。致病性试验表明该分离株能够引起仔猪急性腹泻,RT-PCR扩增其VP4、VP6和VP7的基因节段并进行序列测定,按照A群RV的最新分类方法,确定该分离株的VP6、VP7和VP4基因型分别为I5型、G9型和P[23]型。因此,将该分离株命名为Rotavirus A pig/China/NMTL/2009/Q9P[23]。; 时洪艳陈建飞王承宝张志榜石达冯力; 关键词：猪轮状病毒

PRRSV细胞受体CD163 SRCR5-SRCR6多克隆抗体的制备被引量：2: 2014年; 【目的】制备鼠抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）细胞受体CD163 SRCR5-SRCR6多克隆抗体。【方法】提取PAM细胞总RNA，通过RT-PCR方法获得CD163 SRCR5-SRCR6（第1 417～2 136 bp，共720个bp）基因，将其克隆到pET-28a（＋）载体上，构建重组表达载体pET-28a（＋）-CD163，经酶切、PCR鉴定和测序验证后转化大肠杆菌，在BL21（DE3）中诱导重组目的蛋白表达，然后用Ni-NTA方法纯化目的蛋白，免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体，通过间接ELISA和IFA方法检测多克隆抗体效价，并初步鉴定多克隆抗体血清结合细胞及阻断PRRSV感染细胞的活性。【结果】克隆了720 bp的CD163 SRCR5-SRCR6基因，成功构建了pET-28a（＋）-CD163重组表达载体；SDS-PAGE结果表明，CD163 SRCR5-SRCR6重组蛋白被成功诱导并以包涵体形式表达；Western blot结果表明，重组蛋白具有良好的免疫原性，间接ELISA方法测得免疫Balb/c小鼠制备的抗CD163 SRCR5-SRCR6重组蛋白的多克隆抗体效价可达105；IFA试验结果显示，制备的抗CD163 SRCR5-SRCR6重组蛋白的多克隆抗体可与Marc-145细胞结合，且在1∶20、1∶40倍稀释时，能部分阻断高致病性PRRSV SD16毒株感染Marc145细胞。【结论】用大肠杆菌原核表达系统成功诱导表达了CD163 SRCR5-SRCR 6重组蛋白，用重组蛋白免疫小鼠获得了高效价多克隆抗体，其可以结合细胞并阻断PRRSV感染细胞。; 马玉萍孔宁王向鹏高继明赵钦王承宝周恩民; 关键词：PRRSV 多克隆抗体

动物医学类免疫学教学改革的初探: 2016年; 动物医学类免疫学是目前生命科学中一门重要的基础学科,该学科具有内容丰富、抽象复杂,涉及面广,发展迅速等特点,总结近年来对免疫学教学改革的实践,通过对动物医学类免疫学教材的及时更新、免疫学实验课教学的改进和考核方式的改革等举措,使学生更好、更快地吸收免疫学的知识,更加积极主动地调动学生学习兴趣,促进了学生与最新的免疫学信息和知识的接轨。相信教学改革将激发学生学习的主动性和创新性,增强学生的实践能力和创新精神。; 王承宝张永第穆杨杜涛峰张毫; 关键词：动物医学免疫学教学改革

PRRSV GP5蛋白抗独特型抗体的单链可变区片段(SFv)转导MARC-145后抑制PRRSV感染的研究: 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种全球性猪传染病,已成为威胁世界养猪业的主要疫病之一.PRRSV感染宿主细胞是一个多步骤且需要多种细胞受体参与的过程.本实验室前期研究以免疫网...; 李琼毅王向鹏刘红亮黄柏成王承宝李治军周恩民; 关键词：结构蛋白抗独特型抗体; 文献传递

猪轮状病毒重组VP7蛋白抗原间接ELISA诊断方法的建立: 本研究以纯化的原核表达的猪轮状病毒VP7抗原表位区域为抗原,建立了检测猪轮状病毒抗体的间接ELISA诊断方法。特异性试验表明,该抗原与其他7种常见猪病病毒(TGEV、PEDV、CSFV、PCV2、PRRSV、PPV、Pr...; 时洪艳冯力陈建飞孙东波崔晓臣王承宝; 关键词：猪轮状病毒间接ELISA; 文献传递

Ⅰ群禽腺病毒4型陕西分离株33K、Fiber-1、Fiber-2、pⅢa基因的克隆及序列分析被引量：2: 2018年; 为明确Ⅰ群禽腺病毒陕西分离株相关基因的特征,通过聚合酶链反应(PCR)技术分别扩增了禽腺病毒陕西分离株SX17株的4个基因片段,即33K、Fiber-1、Fiber-2、pⅢa,将其分别克隆到pCold-SUMO载体后进行序列测定,并将克隆得到的4个基因片段与发表的相应序列进行序列比对及遗传进化分析。结果表明,克隆得到的4个片段与Ⅰ群禽腺病毒4型同源性最高,33K基因核苷酸及推导的氨基酸同源性在99.3%~100%与91.5%~100%之间,Fiber-1基因核苷酸及推导的氨基酸同源性在98.5%~100%与65.9%~100%之间,Fiber-2基因核苷酸及推导的氨基酸同源性在98.1%~100%与99.3%~100%之间,pⅢa基因核苷酸及推导的氨基酸同源性在98.6%~100%与98.5%~100%之间。由遗传进化树可知,这些基因在遗传关系上与血清4型位于同一分支,亲缘关系最近,分析显示陕西分离株为Ⅰ群禽腺病毒血清4型。; 冯茹高宇瑾张梦荷高辉张豪吕涛陈成杨彦涛王承宝; 关键词：禽腺病毒基因克隆

PRRSV GP5蛋白新型细胞受体:Ⅱ型非肌肉肌球蛋白A亚型重链: 目的前期我们利用鼠抗PRRSV GP5蛋白抗体免疫小鼠制备的单克隆抗独特型抗体(Mab2-5G2)能够与Marc-145及猪肺泡巨噬细胞(PAM)结合,并且通过免疫沉淀得到一个分子量约为230kDa的可溶性蛋白.经过氨...; 高继明肖一红王向鹏孔宁穆阳王承宝肖书奇赵钦马玉萍刘宁宁吕军华Julian A.HISCOX周恩民

猪流行性腹泻病毒的分子流行病学研究: 006年初起，猪流行性腹泻病毒(PEDV)开在免疫猪群中再度出现。开放阅读框3(ORF3)是PEDV基因组中的唯一辅助基因。12株PEDV野毒株和一株疫苗株的全长ORF3基因被测序。PEDV野毒株(除CH/GSJIII/...; 陈建飞王承宝时洪艳陈小金张志榜冯力

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王承宝

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