王文丽
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：南京农业大学园艺学院茶叶科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 茶树谷丙转氨酶基因的克隆及其表达分析被引量：4
- 2016年
- 该研究基于茶树的转录组数据,采用RT-PCR方法从茶树‘黄金芽’cDNA中克隆获得茶树谷丙转氨酶基因(CsAlaAT),利用荧光定量PCR方法,对CsAlaAT在茶树材料‘迎霜’和‘黄金芽’不同组织、温度胁迫与激素处理的表达进行分析。结果显示:CsAlaAT基因开放阅读框长度为1 662bp,编码553个氨基酸,含有天冬氨酸转氨酶家族(Aspartate aminotransferase family)典型的AAT-like保守结构域。多序列比对显示,该序列与多个相关物种的序列一致性达78.83%,与磷酸吡哆醛(PLP)结合的10个氨基酸残基以及第358位赖氨酸催化位点在物种间高度保守。茶树CsAlaAT蛋白属亲水性蛋白,相对分子质量为60 877.5D,等电点为6.11,碱性、酸性、脂肪族和芳香族氨基酸比例分别为12%、11%、22%和8%,无序化特征不明显,与大麦HvAlaAT具有相似的三维结构。实时定量PCR分析表明,CsAlaAT在茶树‘迎霜’和‘黄金芽’中的表达均具有组织特异性,且均在根部的表达量最高;CsAlaAT响应高温(38℃)和低温(4℃)胁迫的表达上调;外源施用脱落酸(ABA)和赤霉素(GA)能够抑制茶树中CsAlaAT基因的表达。
- 崔新刘志薇吴致君李辉王文丽庄静
- 关键词：茶树谷丙转氨酶多序列比对温度胁迫激素
- 茶树类黄酮3′-羟化酶基因的克隆与表达特性分析被引量：8
- 2017年
- 类黄酮3′-羟化酶(Flavonoid 3′-hydroxylase,F3′H)是细胞色素P450酶家族(Cytochrome P450,CYP450)的单加氧酶,在植物次生代谢和逆境调控方面起着重要的作用。本实验以茶树品种龙井43作为试验材料,利用RT-PCR方法,从c DNA中克隆得到茶树中编码类黄酮3′-羟化酶基因,命名为Cs F3′H1。序列分析显示,Cs F3′H1基因开放阅读框为1 530 bp,编码509个氨基酸,含有相对保守的P450酶系结合域。进化树分析表明,Cs F3′H1与Cs F3′H3的进化树关系相近,与Cs F3′H2的进化树关系较远。序列多重比对显示,Cs F3′H1蛋白具有F3′H蛋白的特征基序,并与高粱、猕猴桃、杨树、拟南芥和葡萄同源蛋白一致性为66.48%。氨基酸组分、理化性质、亲水性/疏水性和无序化分析显示,Cs F3′H1是亲水性蛋白,无序化特征不明显。利用实时荧光定量PCR对Cs F3′H1基因在茶树不同组织和不同激素处理下的表达谱进行检测,结果显示:不同组织中,Cs F3′H1基因的表达水平在第一叶中最高,之后随着叶片的成熟逐渐下降,Cs F3′H1基因在老叶和根中几乎不表达,表达水平从高到低依次为第一叶>第二叶>第三叶>第四叶>嫩茎>根>老叶;在不同激素处理中,Cs F3′H1在SA激素处理下的表达量最高,为对照的2.24倍,在Me JA处理下表达量最低,为对照的0.43倍。
- 王文丽吴致君刘志薇王永鑫李辉崔新庄静
- 关键词：茶树激素处理
- 茶树发育相关基因CsARGOS的克隆与表达特性分析被引量：1
- 2017年
- 植物发育相关基因ARGOS基因受生长素诱导,在植物的生长发育和激素调控方面起着重要的作用。本实验选取茶树品种‘龙井43’作为试验材料,利用RT-PCR方法,从茶树c DNA中克隆得到茶树ARGOS基因,命名为Cs ARGOS。序列分析表明,Cs ARGOS基因开放阅读框为366 bp,编码121个氨基酸。进化树分析显示,Cs ARGOS蛋白与双子叶植物的进化树关系相对较近,与单子叶植物的进化树关系相对较远。序列多重比对显示,Cs ARGOS蛋白具有ARGOS蛋白的特征基序,C端均含有丰富的亮氨酸,N端亲水性氨基酸居多,这些区域在物种中是相对保守的。氨基酸组分、理化性质、亲水性/疏水性、二级结构预测和无序化分析显示,茶树Cs ARGOS是疏水性蛋白,以随机卷曲为主,无序化特征不明显。利用实时荧光定量PCR对Cs ARGOS基因在茶树中的表达进行检测,分析结果表明在不同组织中,Cs ARGOS基因的表达水平从高到低依次为根>第三叶>第四叶>老叶>嫩茎>第二叶>第一叶;不同激素处理下,Cs ARGOS的表达水平从高到低依次为GA_3>SA>ABA>Me JA>IAA。
- 王文丽吴致君刘志薇崔新庄静
- 关键词：茶树ARGOS激素处理
