金洋
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：海南大学环境与植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 转hpa1Xm基因烟草后代的分子检测及苗期生理生化指标测定被引量：1
- 2017年
- 本研究以野生型三生烟(Nicotiana tabacum cv.Xanthi nc.)及T_2、T_3代转hpa Xm(即hpa1Xm)基因烟草和转hpa Xm N-端缺失突变体(标记为hpa Xm△LP)烟草为试材,对目标基因的整合表达、叶绿素含量及防御酶活性进行检测。结果表明,卡那霉素抗性筛选、PCR及RT-PCR检测证明,外源目的基因hpa Xm和hpa Xm△LP整合到烟草基因组中,在转录水平上正常表达,且两个世代中稳定遗传。叶绿素含量测定中,转基因烟草含量显著高于野生型植株,同种转基因植株T_2代含量显著高于T_3代,而转hpa Xm基因烟草的总叶绿素含量比转hpa Xm△LP基因烟草的高,无显著性差异。防御酶活性的测定,表明转基因烟草的PAL、POD和PPO活性皆显著高于野生型植株;而转hpa Xm基因烟草的PAL和POD活性显著高于转hpa Xm△LP基因烟草;同品种转基因烟草中,T_2代PAL活性显著高于T_3代。说明hpa1Xm基因在烟草中表达能显著提高其叶绿素含量及抗病防御酶活性水平,且不同世代的转基因烟草之间表现有所差异。初步探索了hpa Xm的功能、遗传稳定性及信号肽类似序列对hpa Xm的表达及功能的影响。
- 刘晓金洋冯霞康迅刘文波林春花缪卫国郑服丛
- 关键词：叶绿素含量防御酶活性
- 核黄素对橡胶树(Hevea brasiliensis)7-33-97悬浮细胞防卫反应的激活作用
- 2017年
- 本研究以橡胶树7-33-97悬浮细胞为材料,用核黄素进行诱导处理,并初步探索了其诱导机制。结果表明,核黄素处理橡胶树7-33-97悬浮细胞后,产生了活性氧迸发,该变化可以被钙离子通道抑制剂LaCl_3抑制;核黄素诱导橡胶树7-33-97悬浮细胞胞外基质碱性化,该变化能被蛋白激酶抑制剂K252a部分抑制,表明蛋白质磷酸化参与了该抗病过程的传导;苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)的活性被诱导而明显升高;核黄素诱导了防卫相关基因HbPR-1和HbNPR1的表达。说明核黄素能够诱导橡胶树7-33-97悬浮细胞产生抗病防卫反应,该抗病信号传导途径可能是通过水杨酸信号通路进行的。
- 金洋冯霞康迅刘晓叶劲秋刘文波林春花郑服丛缪卫国
- 关键词：核黄素活性氧防卫反应
- 橡胶树白粉病菌OhPbs2的克隆及功能分析被引量：4
- 2017年
- 【目的】Pbs2是MAPK信号途径HOG-MAPK通路的重要成员之一,在植物病原菌渗透压调节方面发挥着重要作用。橡胶树白粉病菌(Oidium heveae)是专性寄生菌,论文借助橡胶树炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),研究橡胶树白粉病菌OhPbs2的功能。【方法】采用同源克隆方法,分别以橡胶树白粉病菌基因组DNA和c DNA为模板,PCR扩增OhPbs2;利用生物信息学分析该基因的结构域,对该基因和其他真菌的7个同源蛋白序列进行系统进化分析,并利用MEGA6中最大简约法构建系统进化树来进一步分析鉴定该基因;利用同源重组和原生质体转化技术,将OhPbs2转化到缺失Pbs2的橡胶树炭疽菌突变体ΔCgPbs2中;在PDA+1.5 mol·L-1山梨醇的平板上筛选转化子,同时提取转化子的基因组作为模板,用橡胶树白粉病菌OhPbs2的引物对进行PCR鉴定,选择正确的转化子ΔCgPbs2+OhPbs2进行后续表型测定;在不同培养条件下,比较ΔCgPbs2、ΔCgPbs2+OhPbs2和野生型菌株生长状态,并在橡胶树叶片接菌检测3个菌株致病力。【结果】OhPbs2基因序列全长1 927 bp,c DNA序列全长1 860 bp,含有一个内含子,编码一个619个氨基酸的蛋白;生物信息学分析表明该蛋白具有与Cg Pbs2相同的S_TKc功能域,构建系统进化树发现橡胶树白粉病菌Pbs2蛋白与烟曲霉(Aspergillus fumigatus)Pbs2蛋白亲缘关系最近,相似度为55%,与橡胶树炭疽病菌的相似度为49%,与粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)、稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、禾谷镰孢(Fusarium graminearum)的Pbs2蛋白具有较近的亲缘关系,相似度分别为54%、53%、53%、50%;ΔCgPbs2+OhPbs2菌株能在PDA+1.5 mol·L-1山梨醇培养基上长出白色菌落,ΔCgPbs2菌株不能生长,并且测序结果显示OhPbs2已成功转入ΔCgPbs2;ΔCgPbs2+OhPbs2在MM培养基上菌落呈白色,气生菌丝较短,不同于wild type菌株。在含有不同浓度Na Cl、山梨醇、SDS、H2O2及咯菌腈的
- 冯霞林春花康迅金洋刘晓何其光刘文波缪卫国郑服丛
- 关键词：基因克隆渗透压
- 橡胶树7-33-97悬浮细胞的建立及核黄素对其防卫反应的研究
- 植物在激发子的诱导处理下,可以产生如下的防卫反应:活性氧爆发、次生代谢产物累积和抗性基因的表达等,这些抗病因素共同抵御病原物的侵入和扩散。由于橡胶树高大生育期长,其相关基础性或机理性研究相对滞后。悬浮细胞培养作为植物生物...
- 金洋
- 关键词：橡胶树悬浮细胞核黄素活性氧防卫反应
- 文献传递
