- S100钙结合蛋白A16通过内质网应激促进HepG2细胞脂肪合成被引量：4
- 2019年
- 本研究旨在探讨S100钙结合蛋白A16 (S100 calcium binding protein A16, S100A16)在肝细胞脂质代谢中的作用及可能的生物学机制。用脂肪酸培养HepG2细胞(人肝癌细胞系)以建立脂肪酸培养模型,对照模型不加脂肪酸培养,每一模型分成3组细胞,分别用S100a16过表达质粒、shRNA质粒、Vector质粒转染。用试剂盒检测细胞甘油三酯浓度,用油红O染色观察脂滴聚集情况,用免疫沉淀和质谱分析寻找和S100A16相互作用的兴趣蛋白,并用免疫共沉淀验证,用Western blot和qRTPCR进行相关机制研究。结果显示,和对照模型相比,脂肪酸培养模型细胞内脂肪和甘油三酯浓度显著增加。S100a16过表达组细胞内脂肪积累显著高于Vector质粒转染组。热休克蛋白A5 (heat shock protein A5, HSPA5)与S100A16之间存在相互作用。S100a16过表达可上调内质网应激的HSPA5/肌醇依赖酶1α-X结合蛋白1 (inositol-requiring enzyme 1α-X binding protein 1,IRE1α-XBP1)通路相关蛋白(HSPA5、IRE1α和pIREα1)表达水平,并上调脂肪合成相关基因Srebp1c、Acc和Fas mRNA表达水平,而转染S100A16 shRNA质粒可使上述蛋白和mRNA水平低于Vector质粒转染组。以上结果提示,S100A16可能通过内质网应激HSPA5/IRE1α-XBP1通路促进HepG2细胞脂质合成。
- 阚敬保沈歌前杨洁童佩张日华梁秀斌苏东明李东刘云
- 关键词：脂代谢内质网应激
- Lin28/let-7调控区SNP对妊娠期糖尿病易感性的影响与机制研究被引量：5
- 2017年
- 目的探究Lin28/let-7调控区SNP对妊娠期糖尿病(GDM)易感性的影响,从基因角度为妊娠期糖尿病的检测提供依据。方法选取2013年1月至2015年12月收治的212例患有妊娠期糖尿病的孕妇为观察组,同期入院进行检的262例正常孕妇为对照组,收集所有孕妇外周血样本。比较两组患妊娠期糖尿病指标,采用Real-time PCR对两组患者let-7的表达水平进行检测,采用生物信息学方法对两组患者let-7上3个前提启动子调控区域标签进行检测和筛选。使用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法对所有患者前期检测筛选出的3个SNP进行基因分型。采用RT-qPCR、Western blotting和免疫组织化学方法对胎盘组织中的Lin28B基因以及Lin28基因表达生成的蛋白进行检测,并比较基因和蛋白差异及细胞定位。结果 Real-time PCR监测结果发现,观察组多数患者let-7基因表达水平较对照组低,差异具有统计学意义(P<0.05);rs3811463、rs3811464以及rs11247955三个结合位点的预测杂合度最高。结论 Lin28/let-7的基因多态性与GDM的易感性相关,其机制可能为Lin28基因的非同义突变改变了Lin28或let-7的表达水平,Lin28与let-7进一步平衡放大,进而影响细胞的糖代谢和胰岛素敏感性,从而造成个体对GDM遗传易感性的变化。
- 童佩刘云孙丽洲卢红梅
- 关键词：妊娠期糖尿病SNP易感性
