仝婷婷
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：浙江省杰出青年科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 毛竹PeIRX10基因在木聚糖合成中的功能被引量：2
- 2016年
- 【目的】克隆毛竹木聚糖合成关键酶基因Pe IRX10,并对其进行表达分析和功能初探,为毛竹中木聚糖合成分子机制的探究提供理论依据。【方法】以毛竹为研究对象,根据毛竹基因组数据库中序列信息设计引物,通过RT-PCR克隆得到1个在模式植物拟南芥木聚糖合成中起关键作用的同源基因,命名为Pe IRX10;运用生物信息学的方法对其核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行分析;通过qRT-PCR对毛竹的根、茎、叶、花和笋5个部位进行组织表达特异性分析。利用Gateway克隆技术构建Pe IRX10的植物表达载体,通过蘸花法转化拟南芥irx10l(-/-)irx10(+/-)双突植株,经BASTA筛选及PCR植株表型鉴定获得具有irx10l(-/-)irx10(-/-)双突背景的转基因植株;通过表型观察、茎部切片甲苯胺蓝染色观察、细胞壁单糖成分分析以及木聚糖免疫定位观察探讨该植株中Pe IRX10基因的功能。【结果】从毛竹中克隆得到Pe IRX10(PH01004923G0080,http:∥www.bamboogdb.org/)基因的ORF序列,长度为1 251 bp,编码416个氨基酸,蛋白质的理论分子质量为46 821 Da,等电点为6.26;其氨基酸序列与其他植物的IRX10基因具有很高的相似性(>80%),属于GT47家族;qRT-PCR结果表明,Pe IRX10基因在毛竹笋和茎中高度表达。过量表达Pe IRX10基因的转基因拟南芥植株可以互补于拟南芥IRX10双突植株irx10l(-/-)irx10(-/-),表现出正常的株高、茎粗以及叶片大小和数量;转基因拟南芥植株的茎部切片甲苯胺蓝染色观察发现,其维管束间纤维和木质部导管细胞的细胞壁厚度与野生型拟南芥相近;细胞壁单糖分析发现,互补植株木糖含量以及其他单糖(例如阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖等)的含量与野生型相近;木聚糖免疫定位分析表明,Pe IRX10基因的过表达可以使irx10l(-/-)irx10(-/-)双突植株中木质部和束间纤维中LM10信号几乎完全恢复。【结论】在irx10l(-/-)irx10(-/-)双突拟南芥植株�
- 王杰李军仝婷婷邵香君宋丽丽吴蔼民
- 关键词：毛竹木聚糖
- 莲纤维素合酶基因NnuCESA8的应用
- 本发明公开一种莲纤维素合酶基因NnuCESA8的应用，属于植物基因工程技术领域。本发明得到了莲基因NnuCESA8转拟南芥cesa8纯合突变体的阳性转基因植株。然后通过转基因技术将莲中的NnuCESA8基因转入到相应的拟...
- 吴蔼民仝婷婷赵先海王旭川陈晓阳邓小梅
- 文献传递
- 几个莲花纤维素合酶基因功能的初步分析
- 纤维素具有很高的商业价值，纤维素合酶(Cellulose Synthase，CESA)是纤维素合成过程中最关键的酶。莲花中的纤维素含量丰富，其纤维丝具有复杂的结构和成分，它不止含有大量的纤维素，还含有很多半纤维素。已有的...
- 仝婷婷
- 关键词：转录组测序纤维素合酶基因功能
- 莲纤维素合酶基因NnuCESA4的应用
- 本发明公开一种莲纤维素合酶基因NnuCESA4的应用，属于植物基因工程技术领域。本发明得到了莲基因NnuCESA4转拟南芥cesa4纯合突变体的阳性转基因植株。然后通过转基因技术将莲中的NnuCESA4基因转入到相应的拟...
- 吴蔼民仝婷婷赵先海王旭川陈晓阳邓小梅
- 文献传递
