孙广永
- 作品数：10 被引量：8H指数：2
- 供职机构：首都医科大学附属北京友谊医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金王宝恩肝纤维化研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Parasutterella菌属在制备治疗肥胖及其相关代谢疾病的产品中的应用
- 本发明公开Parasutterella菌属在制备治疗肥胖及其相关代谢疾病的产品中的应用。本发明首先公开了Parasutterella菌属在制备改善肥胖诱发的胰岛素抵抗或预防和/或治疗肥胖及其相关代谢疾病的产品中的应用。进...
- 李晓辉张栋孙广永郑士蒙
- 双阴性T细胞通过抑制外周和局部炎症反应治疗小鼠缺血性脑卒中的机制研究
- 缺血性脑卒中后,继发的炎症反应加重了病灶区的组织损伤、阻碍了神经细胞功能的恢复。因此,有效控制继发炎症反应对改善缺血性脑卒中的损伤和预后至关重要。双阴性T(DNT)细胞是一类新型免疫抑制性细胞,我们前期研究发现DNT细胞...
- 田丹潘雨花蕾赵羽商王欢田月孙广永王崧施文李铭扬黄诗扬朱彦兵张栋
- 关键词：缺血性脑卒中双阴性T细胞巨噬细胞调节性T细胞
- OX40在D-半乳糖胺/脂多糖诱导的急性肝衰竭中的作用及机制研究被引量：1
- 2018年
- 目的研究共刺激分子OX40在D-半乳糖胺/脂多糖诱导的急性肝衰竭中的作用及其相关机制。方法32只C57BL/6小鼠(B6)以及OX40基因敲除(OX40^(^(-/-)))小鼠,采用D-半乳糖胺/脂多糖腹腔注射方式诱导急性肝衰竭,对照组给予等量PBS,随机分成对照组PBS组,实验组D-gal/LPS组和OX40^(-/-)+D-gal/LPS组,监测小鼠存活率、血浆转氨酶以及肝脏病理评估肝损伤程度;流式细胞术检测外周血及肝内淋巴细胞亚群变化,观察免疫细胞的活化以及细胞因子分泌情况。结果急性肝衰竭中,肝组织内CD4 T细胞表达OX40分子明显增高,而CD8和NK细胞表达没有明显变化;OX40敲除后,可显著降低外周血中CD4 T细胞比率并减少其活化,同时也可降低肝组织内CD4 T细胞的活化,减少肝内CD4 T细胞分泌IFN-γ,从而显著减轻小鼠肝脏损伤、提高急性肝衰竭小鼠存活率(OX40^(-/-)+Dgal/LPS组50%vs.D-gal/LPS组20%)。结论在急性肝衰竭中,CD4 T上调OX40表达,促进CD4 T活化及向Th1细胞分化,从而加重急性肝衰竭发生、发展。OX40可以作为急性肝衰竭中适应性免疫活化的重要标志,也可以作为急性肝衰竭的潜在治疗靶点。
- 张春盼金华孙广永孙广永
- 关键词：急性肝衰竭CD4OX40
- OX40调控双阴性T细胞的转化及抑制功能研究
- 2017年
- 目的探讨免疫共刺激分子OX40对双阴性T细胞(DN T细胞)转化、抑制功能的影响及可能的作用机制。方法通过中和抗体及基因敲除的方式将OX40作用阻断,检测在这一过程中DN T细胞的转化效率、抑制功能的变化及OX40对DN T细胞存活的影响。结果通过DN T细胞的转化实验发现,将OX40阻断,DN T细胞的转化效率分别从20.2%、29.1%降为10.5%、15.9%。同时与CD4 T细胞相比,OX40在DN T细胞中高表达,其阳性率为27.0%。通过DN T细胞的体外抑制实验发现,OX40敲除后的DN T对CD4 T细胞的抑制作用明显减弱。通过Annexin V染色发现,OX40敲除后DN T细胞的凋亡率分别从14.6%、22.3%增加为21.1%、35.1%,同时OX40敲除使DN T细胞抗凋亡基因表达降低。结论 OX40敲除能降低DN T细胞的转化效率,减弱其对CD4 T细胞抑制功能,这有可能与OX40敲除所致DN T细胞凋亡增加有关。
- 孙广永孙晓静刘锴田月施文张栋
- 关键词：双阴性T细胞OX40凋亡
- 超声引导下微波消融治疗甲状腺微小乳头状癌后患者基因表达变化被引量：4
- 2023年
- 目的 观察超声引导下微波消融(MWA)治疗甲状腺微小乳头状癌(PTMC)后患者基因表达变化。方法 前瞻性纳入8例PTMC患者,行超声引导下MWA;分别于MWA前即刻、MWA后1天及1个月抽取其外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMC),提取mRNA,测序并检测基因表达水平,观察MWA前后基因表达差异,分析相关变化在抗肿瘤免疫中的作用。结果 与MWA前相比,MWA后1天基因表达未见明显差异;MWA后1个月381个基因表达发生变化,2个基因表达上调、379个下调。对379个表达下调基因的生物过程GO功能注释分析结果显示,其中38个基因与免疫反应相关,且大部分编码蛋白具有促炎和促肿瘤作用。结论 超声引导下MWA治疗PTMC后1个月,部分具有促炎和促肿瘤作用的基因表达发生下调。
- 祖圆孙广永钱林学
- 关键词：甲状腺肿瘤消融技术基因
- 小鼠CD4T细胞转化的双阴性T细胞的效应分子研究
- 2017年
- 目的研究小鼠CD4T细胞转化的CD4-CD8双阴性T细胞的功能特点，进一步明确双阴性T细胞的免疫抑制作用机制。方法应用转录组测序和蛋白质质谱技术分析了小鼠转化的双阴性T细胞基因表达谱。应用流式细胞术等技术验证了细胞活化分子CD44、CD69和OX40的表达水平并应用CFSE染色法验证双阴性T细胞的杀伤功能。结果小鼠转化的双阴性T细胞表达了与其他成熟CD4T细胞不同的细胞表型。小鼠转化的双阴性T细胞明显高表达细胞表面活化分子CD44、CD69和OX40，以及颗粒酶、穿孔素等细胞杀伤相关基因。穿孔素基因敲除的双阴性T细胞抑制淋巴细胞增殖的能力明显降低。结论小鼠CIMT细胞转化的双阴性T细胞是与其他成熟CD4T细胞不同的T细胞终末分化亚群。小鼠转化的双阴性T细胞高表达细胞活化分子和免疫杀伤类细胞因子，并主要通过穿孔素途径发挥免疫抑制功能。
- 田丹孙广永刘锴田月施文王天琪金华张春盼张栋
- 关键词：T淋巴细胞双阴性T细胞细胞转化转录组测序
- 小鼠脂肪组织中免疫细胞分离方法的优化及亚群在肥胖小鼠中的作用被引量：3
- 2021年
- 目的尝试提供一种高效的、低损伤的分离脂肪组织免疫细胞的方式,以期为肥胖过程中免疫学机制的研究提供技术支持。方法首先分离正常小鼠附睾周围的脂肪组织,并采用机械研磨或酶消化(包括Ⅱ型/Ⅳ胶原酶、Liberase酶)的方式分离其中的免疫细胞,并结合流式细胞检测技术筛选最高效的免疫细胞分离方式。再通过高脂饮食(high fat diet,HFD)建立肥胖小鼠模型,并进一步分析肥胖过程中,小鼠脂肪组织中巨噬细胞及T淋巴细胞的比例及亚群变化。结果比较不同酶消化及机械研磨方式发现,通过高纯度的Liberase酶消化的方式获得CD45^(+)免疫细胞死亡率最低,活细胞数最多;而通过机械研磨方式获得免疫细胞死亡率最高,活细胞数最低。与正常饮食小鼠相比,肥胖小鼠脂肪组织中固有免疫细胞如中性粒细胞、巨噬细胞比例增加,尤其是M1型巨噬细胞比例增加,M2型降低,同时巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)增加,髓样细胞表达激发受体1(triggering receptor expressed on myeloid cells 1,TREM1)表达增加。而适应性免疫细胞中,T淋巴细胞比例增加,特别是Th1/Treg细胞的比例增加最为明显。结论建立了一种从小鼠脂肪组织中高效获取有活力的免疫细胞的方法,并证实肥胖小鼠脂肪组织中巨噬细胞、T淋巴细胞比例增加,促炎作用增强,它们在诱发脂肪组织炎症反应中发挥重要作用。
- 武永乐尚宏伟孙广永张栋丁惠国
- 关键词：脂肪组织酶消化T淋巴细胞
- Rag1和Rag2/IL2rγ基因敲除小鼠肝脏缺血再灌注损伤的实验研究
- 2018年
- 目的 探讨Rag1和Rag2/IL2rγ基因敲除小鼠肝脏缺血再灌注损伤中淋巴细胞对天然免疫细胞的作用.方法 C57BL/6小鼠、Rag1基因敲除小鼠、Rag2/IL2rγ基因双敲除小鼠各10只,每种小鼠按简单随机化分组,分为假手术组和肝脏缺血再灌注损伤组,每组5只小鼠,通过采用小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,利用流式细胞术检测肝内各种免疫细胞亚群的变化,并观察免疫系统缺陷小鼠,即Rag1基因敲除小鼠和Rag2/IL2rγ基因双敲除小鼠的肝脏缺血再灌注损伤情况及肝脏内细胞亚群的变化.计量资料以均数±标准差((x)±s)表示,数据分析采用独立样本t检验.结果 通过比较假手术组与缺血再灌注组的肝脏内浸润的免疫细胞亚群变化,发现肝脏缺血再灌注后CD4+T细胞、DNT细胞、NK细胞、NKT细胞、库普弗细胞、骨髓来源的巨噬细胞和中性粒细胞的比例均明显升高.Rag1基因敲除小鼠在肝脏缺血再灌注损伤后库普弗细胞、骨髓来源的巨噬细胞和中性粒细胞的比例均比假手术组明显升高;与正常小鼠的肝脏缺血再灌注组相比,血清谷丙转氨酶水平明显下降,从(1 776.25±219.37) U/L下降至(932.33±58.77) U/L(P =0.003,t =7.350),肝脏病理苏木精-伊红染色结果显示坏死区域明显减少.Rag2/L2rγ基因双敲除小鼠在肝脏缺血再灌注损伤后中性粒细胞比例较假手术组依然明显升高,但库普弗细胞和骨髓来源的巨噬细胞的变化并不明显;与Rag1基因敲除小鼠的肝脏缺血再灌注损伤组相比,血清谷丙转氨酶进一步降低,从(932.33±58.77) U/L降至(309.00±163.53) U/L(P=0.002,t=6.182).结论 Ragl和Rag2/IL2rγ基因敲除小鼠肝脏缺血再灌注损伤均较C57 BL/6小鼠轻,T细胞和NK细胞均促进肝脏损伤.其中,T细胞对库普弗细胞、骨髓来源的巨噬细胞和中性粒细胞的募集的影响不大,而对NK细胞的肝脏浸润起到了促进作用;NK细胞可影响库普弗细胞和骨髓来源的巨噬细�
- 金华许虎峰孙晨阳张春盼孙广永张栋
- 关键词：再灌注损伤T淋巴细胞
- 双阴性T细胞的转化扩增方法
- 本发明公开了一种双阴性T细胞的转化扩增方法，包括如下步骤：(1)提取起始样品中的单个核细胞，去除该单个核细胞中的CD8<Sup>+</Sup>T细胞和NK细胞；(2)将步骤(1)得到的样品在体外用包含T细胞刺激剂及细胞因...
- 张栋李新民赵新颜孙广永刘锴田丹田月施文孙晓静许虎峰
- Parvibacter菌属在制备治疗肥胖及其相关代谢疾病的产品中的应用
- 本发明公开Parvibacter菌属在制备治疗肥胖及其相关代谢疾病的产品中的应用。本发明首先公开了Parvibacter菌属在制备改善肥胖诱发的胰岛素抵抗或预防和/或治疗肥胖及其相关代谢疾病的产品中的应用。进一步公开了一...
- 孙广永张栋李晓辉郑士蒙
