吴健健
- 作品数:1 被引量:5H指数:1
- 供职机构:广州医科大学金域检验学院更多>>
- 发文基金:广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 实时荧光环介导恒温扩增技术检测嗜麦芽窄食单胞菌方法的建立被引量:5
- 2016年
- 目的建立嗜麦芽窄食单胞菌16S ribosomal RNA基因的实时荧光环介导恒温扩增(Real Amp)快速检测方法,为嗜麦芽窄食单胞菌的快速检测提供一种新的方法。方法针对嗜麦芽窄食单胞菌16S ribosomal RNA基因设计的特异性引物,利用链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)恒温反应60 min,通过实时检测荧光信号来检测嗜麦芽窄食单胞菌16S ribosomal RNA基因的扩增。结果筛选实验发现:在使用引物4时,出峰时间最短,故选择引物4进行后续实验操作。在11株相关菌株的检测中,除嗜麦芽窄食单胞菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性。本研究检测嗜麦芽窄食单胞菌DNA的灵敏度可达到4.07×10-5ng/μL。重复性分析表明:同一样品重复检测3次,几乎同时出峰,扩增曲线几乎重叠,说明Real Amp的重复性良好。结论嗜麦芽窄食单胞菌的Real Amp检测方法稳定性高,反应快速,特异性强,具有较大的推广及应用前景,可用于嗜麦芽窄食单胞菌的快速检测。
- 郭旭光黄美淦刘庆锋何淑君吴健健夏勇
- 关键词:嗜麦芽窄食单胞菌