程锦
- 作品数：12 被引量：11H指数：2
- 供职机构：北京大学第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 受体相互作用蛋白质激酶3通过上调整合素β3促进骨关节炎相关病变被引量：1
- 2021年
- 骨关节炎(osteoarthritis,OA)是最常见的慢性致残性关节疾患,目前尚无针对病因的有效治疗手段。程序性坏死在多种疾病中扮演关键角色,受体相互作用蛋白质激酶3(receptor-interacting protein kinase 3,RIP3)是程序性坏死进程的关键调控因子。有研究显示,RIP3在人与鼠骨关节炎退变软骨组织中表达水平显著上调,提示程序性坏死的发生,但RIP3在软骨中的具体病生理角色仍不明确。本研究拟对过表达RIP3前后的软骨细胞转录物组进行测序分析,探索RIP3在骨关节炎进程中发挥作用的具体机制。RNA测序结果显示,RIP3的过表达诱发软骨细胞中244个基因表达上调,277个表达下调。通过进一步构建基因间共表达作用网络,筛选出16个候选靶基因在mRNA水平进行验证,证实RIP3对磷脂酰肌醇3激酶调节亚单位5(phosphoinositide-3-kinase,regulatory subunit 5,Pik3r5)、整合素β3(integrin subunit beta 3,Itgb3)及成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYB proto-oncogene like 2,Mybl2)的表达上调作用最为显著。CCK-8以及乳酸脱氢酶活性检测结果表明,利用siRNA沉默Itgb3的表达可显著抑制RIP3诱发的软骨细胞活力下降及程序性坏死,同时也抑制了RIP3对软骨细胞中分解代谢相关基因Mmp1、Mmp13与Il6的表达上调作用,以及其对合成代谢相关基因Acan、Col2a1与Sox9的下调作用。本研究证实,RIP3通过上调软骨细胞中Itgb3的表达诱发软骨细胞坏死与软骨基质代谢紊乱,并最终导致软骨退变,为骨关节炎的临床治疗提供了新靶点,同时进一步明确了程序性坏死的病理生理学意义。
- 程锦蒋艳芳段小宁傅欣张继英胡晓青敖英芳
- 关键词：骨关节炎软骨细胞程序性坏死整合素Β3
- 聚磷腈微球搭载生长因子时间缓释对骨髓间充质干细胞粘附和增殖的影响被引量：4
- 2018年
- 目的:考察聚磷腈微球搭载生长因子时间缓释对骨髓间充质干细胞粘附和增殖的影响。方法:根据聚磷腈聚合物侧链氨基取代比例不同,应用双乳液法制备两种聚磷腈缓释微球,分别装载转化生长因子TGF-β1和胰岛素样生长因子IGF-1,使用ELISA探索其体外缓释性能并设计生长因子时空缓释策略,并利用SD大鼠骨髓间充质干细胞测试聚磷腈微球材料的生物活性、细胞粘附性,以及吖啶橙染色方法比较生长因子缓释对细胞增殖的影响。结果:两种聚磷腈微球具有不同的形貌特征,分为表面光滑和粗糙两种微球,粒径分布集中,两种微球的平均粒径分别为54.22±19.19μm和34.11±18.82μm。体外释放试验提示两种微球具有不同的缓释特性,设计时间缓释策略为早期突发释放TGF-β1和IGF-1发挥生长因子协同作用,后期持续释放TGF-β1诱导干细胞分化。吖啶橙染色结果显示聚磷腈微球支持细胞粘附和生长,无明显细胞毒性,并且生长因子时空缓释策略能够明显提高BMSCs的增殖效果。结论:聚磷腈缓释微球具有良好的缓释效能,两种微球构建的时间缓释体系能够在组织工程领域具有良好的应用前景。
- 任博胡晓青胡晓青史尉利程锦杨朋余慧镭石媛媛杨朋
- 关键词：聚磷腈微球
- ATDC5来源外泌体包载小分子药物5Z-7-Oxozeaenol治疗骨关节炎被引量：1
- 2023年
- 骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种常见的退行性关节疾病。研究表明,TAK1的抑制剂小分子药物5Z-7-Oxozeaenol(5Z-7),用于治疗OA时直接将药物进行频繁关节腔注射,药物的治疗效果有限。本研究选取小鼠胚胎瘤成软骨细胞系(ATDC5),是一种理想的成软骨细胞模型,其增殖速度和培养稳定性均优于间充质干细胞,用于提取外泌体作为药物的载体。本研究提取ATDC5来源的外泌体(ATDC5-Exos),包载药物5Z-7。在炎性细胞因子诱导大鼠软骨细胞模型中,载药外泌体可以促进合成代谢相关基因Col2a1、Sox9的表达,抑制分解代谢相关基因Adamts5、Mmp13的表达。本研究使用8周龄雄性小鼠,行前交叉韧带离断术(ACLT)诱导OA小鼠模型,关节腔注射外泌体或载药外泌体治疗,取膝关节石蜡切片进行组织学评估。结果显示,载药外泌体可缓解创伤后OA模型的病理表型。结合Micro-CT影像学结果显示,治疗能改善ACLT术后膝关节软骨下骨骨小梁的流失和骨赘减少,关节表面更为光滑。本研究证实,ATDC5-Exos包载药物5Z-7在体内和体外实验中均可缓解OA表型。外泌体包载递送5Z-7减少了药物的用量和给药频率,且药物和外泌体可以叠加治疗改善OA的效果。
- 樊逸菲程锦徐雁何通川敖英芳胡晓青
- 关键词：骨关节炎小分子药物外泌体
- 二羟基苯甲酸内酯5Z-7在制备治疗骨关节炎药物中的应用
- 本发明公开了一种二羟基苯甲酸内酯5Z‑7在制备治疗骨关节炎药物中的应用，属于生物医药领域。该二羟基苯甲酸内酯5Z‑7是一种针对TAK1的小分子抑制剂，在关节腔内可通过靶向抑制TAK1的酶活性来抑制滑膜及软骨组织中由炎性细...
- 敖英芳程锦胡晓青代岭辉任博史尉利
- 文献传递
- N-[2-溴-4-(苯基磺酰基)-3-噻吩基]-2-氯苯甲酰胺的应用及药物
- 本发明公开了N‑[2‑溴‑4‑(苯基磺酰基)‑3‑噻吩基]‑2‑氯苯甲酰胺的应用及药物，属于医药领域。具体保护了该N‑[2‑溴‑4‑(苯基磺酰基)‑3‑噻吩基]‑2‑氯苯甲酰胺在制备骨关节炎药物中的应用，通过有效改善软骨...
- 敖英芳石媛媛胡晓青程锦张辛
- 文献传递
- 小分子药物BNTA通过上调Insig1缓解高胆固醇引起的骨关节炎
- 2022年
- 骨关节炎(osteoarthritis,OA)是运动系统常见的退行性疾病,具有高发病率和高致残率。骨关节炎的发病机制目前尚不明确,既往研究认为骨关节炎发病主要与创伤因素相关,而近期研究表明,以胆固醇代谢异常为主的代谢性因素同样与骨关节炎密切相关,骨关节炎的治疗以早期对症治疗和晚期手术治疗为主,尚无针对病因的特效药物。既往研究中发现,有一种具有软骨保护作用的小分子药物BNTA,其在创伤引起的骨关节炎中具有较好的疗效,但其对高胆固醇引起的骨关节炎的作用尚不明确。本研究为探究BNTA对高胆固醇引起的骨关节炎的治疗作用及其机制,采用高胆固醇饮食构建了大鼠骨关节炎模型,取膝关节石蜡切片进行组织学评估,使用油红O染色评估大鼠软骨细胞内的脂质积聚情况,使用RT-qPCR、免疫荧光和免疫组化评估软骨细胞合成代谢、分解代谢及胆固醇代谢相关基因和蛋白质的表达。结果显示,BNTA可缓解高胆固醇大鼠骨关节炎模型中的病理表现,改善OARSI评分。在大鼠软骨细胞中,BNTA可促进合成代谢相关基因col2、sox9、acan的表达,抑制分解代谢相关基因mmp13、adamts5的表达,可改善高胆固醇引起的大鼠软骨细胞脂质积聚。在大鼠软骨细胞和高胆固醇大鼠骨关节炎模型中BNTA均可上调Insig1表达。本研究证实,高胆固醇可在体内和体外实验中加重骨关节炎,可引起大鼠软骨细胞脂质积聚增加。在体内和体外实验中BNTA均能缓解高胆固醇引起的骨关节炎表型,改善软骨细胞内的异常脂质积聚,其作用可能为通过上调Insig1抑制细胞内的胆固醇生物合成,从而缓解脂质异常积聚。
- 王俊雁曹宸喜胡晓青程锦敖英芳
- 关键词：骨关节炎软骨胆固醇代谢小分子药物
- Cdkn2a示踪小鼠:研究创伤性骨关节炎软骨退变细胞衰老的新模型被引量：3
- 2022年
- 骨关节炎(osteoarthritis,OA)是临床上最为常见的老年性运动系统疾病之一。研究表明,衰老是OA发生发展的重要影响因素之一,但其具体作用及机制尚未完全清楚。本研究通过CRISPR/Cas9技术,建立了Cdkn2a-e(Luc-2A-tdTomato-2A-CreERT2-WPRE-pA)1定点敲入的杂合子小鼠模型,可在小鼠活体内追踪衰老经典标记物Cdkn2a(p16,p16INK4a)的表达情况,结合前交叉韧带横断术(ACLT)诱导OA小鼠模型,将OA病理进程中的衰老变化在体外直观呈现,明确衰老与OA之间的关系。本研究选取10~12周龄Cdkn2a小鼠,随机分为非手术对照组、假手术组和ACLT组,通过ACLT手术在小鼠中构建OA的模型,术后4周收取动物进行活体荧光成像检测显示,ACLT组术后4周的小鼠膝关节局部Cdkn2a荧光表达升高(P<0.05),小鼠膝关节组织切片的番红O固绿染色显示,4周时ACLT组膝关节软骨出现退变(P<0.05),对小鼠膝关节组织进行Cdkn2a免疫组织化学染色,相较其他2个组,ACLT组的小鼠膝关节组织软骨表面Cdkn2a染色更深。研究结果显示,通过手术诱导的OA模型在局部具有衰老的表现,这进一步验证了衰老和OA的关系。同时,该Cdkn2a示踪小鼠模型能够在活体小鼠内体现衰老的进展。结合影像学检查,可以实时观察衰老和OA发生、进展的关系,为衰老与OA疾病机制的研究提供了良好的模型,也为今后进行靶向衰老进行OA的治疗提供了很好的研究工具。
- 吴桐樊逸菲许博洋程锦敖英芳胡晓青
- 关键词：CDKN2A骨关节炎细胞衰老
- N-[2-溴-4-（苯基磺酰基）-3-噻吩基]-2-氯苯甲酰胺的应用及药物
- 本发明公开了N‑[2‑溴‑4‑(苯基磺酰基)‑3‑噻吩基]‑2‑氯苯甲酰胺的应用及药物，属于医药领域。具体保护了该N‑[2‑溴‑4‑(苯基磺酰基)‑3‑噻吩基]‑2‑氯苯甲酰胺在制备骨关节炎药物中的应用，通过有效改善软骨...
- 敖英芳石媛媛胡晓青程锦张辛
- 文献传递
- 异体滑膜及青少年软骨颗粒移植修复兔半月板“白区”缺损及移植细胞的转归研究
- 2022年
- 目的:探讨异体滑膜和青少年软骨颗粒移植在半月板“白区”缺损修复上的协同作用;研究移植细胞的转归(存活和分化);研究滑膜间充质干细胞和软骨细胞间的相互作用。方法:选取2只未成年雄性兔作为滑膜及青少年软骨颗粒供体。选取24只成年雌性兔(共48个膝关节)制备半月板缺损模型,分为以下几组:空白组,半月板缺损无任何处理;单纯纤维蛋白胶组,在半月板缺损处填充单纯纤维蛋白胶;纤维蛋白胶+滑膜移植组,纤维蛋白胶包裹异体滑膜碎片填充到半月板缺损处;纤维蛋白胶+滑膜+异体青少年软骨颗粒移植组,纤维蛋白胶包裹异体滑膜和异体青少年软骨颗粒填充到半月板缺损处,每组样本量为12个膝关节。分别在术后8周和16周取材,通过组织学和免疫组织化学染色评估半月板缺损修复程度,针对雄性个体特有的Y染色体性别决定区基因(SRY)进行核酸原位杂交,并结合免疫荧光共定位评估移植细胞的存活和分化。其次,建立体外兔滑膜间充质干细胞和软骨细胞共培养系统,检测半月板纤维软骨细胞相关基因转录水平,并探索细胞间相互作用的可能机制。结果:在术后8、16周,相较于空白组、单纯纤维蛋白胶组及纤维蛋白胶+滑膜移植组,纤维蛋白胶+滑膜+异体青少年软骨颗粒移植组的缺损表现出良好的结构完整性、表面光滑度和边缘整合度,修复组织中可见较多的半月板样纤维软骨细胞,并且,细胞周围的基质在甲苯胺蓝和II型胶原免疫组织化学染色中表现为强阳性。在术后16周,纤维蛋白胶+滑膜移植组及纤维蛋白胶+滑膜+异体青少年软骨颗粒移植组的SRY核酸原位杂交信号表现为强阳性,表明移植细胞在受体中至少可存活16周。其次,核酸原位杂交和SOX9免疫荧光共定位显示表面移植滑膜组织中的细胞表现为SOX9阳性,表明移植滑膜组织中的细胞可分化为半月板纤维软骨�
- 闫文强吴桐樊逸菲麦合木提·麦麦提敏赵逢源李豫皖曹宸喜胡晓青程锦敖英芳
- 关键词：半月板修复滑膜
- 二羟基苯甲酸内酯5Z-7在制备治疗骨关节炎药物中的应用
- 本发明公开了一种二羟基苯甲酸内酯5Z‑7在制备治疗骨关节炎药物中的应用，属于生物医药领域。该二羟基苯甲酸内酯5Z‑7是一种针对TAK1的小分子抑制剂，在关节腔内可通过靶向抑制TAK1的酶活性来抑制滑膜及软骨组织中由炎性细...
- 敖英芳程锦胡晓青代岭辉任博史尉利
- 文献传递
