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水煮不影响花生过敏原数量和一级结构被引量：1: 2018年; 花生是重要的食物过敏原之一,它应用广泛且会引起严重的过敏反应,近年来得到广泛关注。本研究对新鲜带壳和晒干后带壳花生进行水煮处理,探究热加工对花生过敏原蛋白的数量和一级结构的影响。采用凯氏定氮法测定水煮前后花生中的总蛋白含量发现,未加工鲜花生含蛋白11.16g/100g鲜花生,直接水煮和晒干水煮后,蛋白质含量分别为11.67g/100g鲜花生和11.14g/100g鲜花生,加工后花生总蛋白含量没有显著变化。利用iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation)技术分析,结果显示鲜花生水煮及晒干水煮后Ara h 1等8种过敏原蛋白的数量比值均在0.85～1.67之间,聚丙烯酰胺凝胶电泳和iTRAQ肽段分析表明,水煮加工对花生过敏原蛋白质的一级结构也没有显著影响。因此水煮加工对过敏原蛋白的数量和一级结构的影响不显著。; 唐宇张英李坤李坤吴志华; 关键词：水煮花生过敏原

还原协同加热处理对花生过敏原Ara h2结构及抗原性的影响被引量：6: 2017年; 花生过敏能引起荨麻疹、呕吐甚至休克等症状,通常是终生性过敏。本研究运用加热处理、半胱氨酸还原对Ara h2进行单独和复合处理,采用圆二色谱、紫外扫描光谱、间接竞争酶联免疫吸附法分别检测蛋白加工前后的结构与抗原性变化。结果显示,单一的加热和半胱氨酸还原处理过的蛋白结构与抗原性只发生部分变化。而复合处理中,在加热条件下,半胱氨酸还原蛋白的能力明显增强,还原后的蛋白二级结构与三级结构发生大幅变化,抗原性显著降低。研究结果表明,二硫键对于蛋白Ara h2结构稳定具有重要作用,二硫键被还原和加热过程破坏后,蛋白的抗原性和结构即发生重大变化。还原协同加热处理有望大幅改善2S球蛋白的结构和致敏性,可以作为蛋白脱敏加工的备选方法。; 李坤连君朱瑾曾辛陈红兵吴志华; 关键词：花生热加工 ARA 二硫键抗原性

晒干处理对花生过敏原蛋白潜在致敏性的影响被引量：12: 2018年; 花生是八大食物过敏原之一,花生过敏通常是终身的。晒干是花生加工的重要环节,本研究通过对新鲜花生进行去壳晒干和带壳晒干2种不同的晒干处理,探索不同晒干方式对花生过敏原蛋白潜在致敏性的影响。采用凯氏定氮法、二喹啉甲酸法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定花生及蛋白提取液中的蛋白浓度和过敏原蛋白的组成,用圆二色谱、紫外扫描光谱检测花生蛋白的结构变化,用血清免疫球蛋白E(immunoglobulin E,Ig E)结合能力表征花生蛋白潜在致敏性的变化。结果显示,晒干处理后,花生蛋白与血清Ig E的结合能力显著增强(P<0.05),去壳晒干的花生蛋白质二级结构比带壳晒干的花生更有序,三级结构更加紧凑,带壳晒干的花生蛋白可能因为其结构较为松散,故与Ig E结合能力更强。; 常雪娇李坤张英张英陈红兵; 关键词：花生蛋白

热加工花生的蛋白分离及其过敏原纯化方法研究进展: 2017年; 花生不仅本身是一种营养丰富的食品,而且作为原料或配料广泛应用于食品加工中。然而花生及其制品是FAO/WHO认定的八大类食物过敏原之一,可导致严重的过敏反应,通常伴随终身,甚至危及生命。不同地区的人们食用花生的加工方式不同,其花生过敏的患病率也有所不同,热加工是花生的主要加工方式,因此各类热加工导致的花生致敏性变化成为研究热点。过敏原蛋白的分离作为花生热加工研究中的重要步骤,也变得十分重要。本文主要对常见的3种热加工花生(水煮、油炸和烘烤)中的花生蛋白分离及其过敏原纯化的方法研究进行综述。现有的花生热加工研究中蛋白分离技术主要是通过溶剂浸提;而过敏原纯化技术主要是借助层析法,根据各组分在物理化学性质上的差异进行纯化;此外还可以根据最终研究目的的不同采用其他的辅助方法达到分离纯化效果。通过对现有分离纯化方法进行了解和比较,可为热加工花生过敏原蛋白的分离纯化甚至进一步的分析检测提供理论参考和指导。; 李坤张英梁建斌曾辛陈红兵吴志华; 关键词：花生热加工

利用自制免疫亲和层析柱纯化抗Ara h 2抗体: 目的 :近年来,抗体已经被广泛应用于体内/外的科学研究中,不仅应用于细胞内/外蛋白的识别与定位,在以抗原抗体特异性反应作为理论基础的免疫亲和分离或检测分析中,高效价的抗体更是一种不可或缺的重要工具。本研究利用自制免疫亲和...; 李坤詹少德吴志华陈红兵; 关键词：花生过敏原多克隆抗体; 文献传递

生物膜干涉法检测花生蛋白与花生过敏患者血清IgE的结合能力被引量：2: 2018年; 探索基于生物膜干涉技术对花生蛋白与花生过敏患者血清中免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)的结合能力进行检测的方法。利用链霉亲和素(streptavidin,SA)标记的传感器、生物素化的羊抗人IgE抗体、花生过敏患者血清池以及花生蛋白建立了一种测定花生蛋白与花生过敏患者血清IgE结合能力的新方法,优化检测条件为抗体1∶100稀释后线下固化20 min,血清1∶10稀释后过夜结合,完成传感器修饰。在线洗基线后用质量浓度为1 mg/mL的花生蛋白与传感器结合3 600 s,解离120 s。利用该法对不同热加工后花生蛋白与患者血清IgE的结合能力进行评估,并与常用的酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测进行比较。结果表明,本方法可以直接评估过敏原蛋白与血清IgE的结合能力,与ELISA结果相关系数达到0.91。热加工中,油炸处理提高了花生蛋白的IgE结合能力,水煮和烘烤降低了花生蛋白的IgE结合能力,且去壳热加工比带壳热加工花生的蛋白的IgE结合能力更强。; 张英李坤颜琪陈红兵陈红兵; 关键词：花生蛋白 IGE 热加工

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李坤