刘坤
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学自动化与计算机技术电气工程化学工程更多>>
- 一种黄体酮全细胞生物传感器及其制备方法与应用
- 本发明提供一种黄体酮全细胞生物传感器及其制备方法与应用。本发明设计了一种基于靶分子与其受体结合后配体结合域LBD发生细微构象变化的非天然转录因子DLA的设计策略，模拟结果表明原核LexA、来自孕激素受体的截短LBD和原核...
- 王风清刘坤魏东芝
- 甾体化合物绿色生物制造:从生物转化到微生物从头合成被引量：4
- 2021年
- 甾体化合物(简称甾体)分布广泛、功能卓越,在机体生长、物种繁育以及代谢调控等方面,发挥着难以取代的生理功能。因此,天然甾体及其衍生物被广泛用于生殖健康、内分泌调控等领域,是器官移植、重症感染等许多危重疾病的“刚需药”和“救命药”。甾体结构复杂、构型精巧,很难通过化学全合成来生产,当前主要以天然甾体皂素或甾醇为原料,通过化学与生物转化相结合的半合成法获得。然而,甾体药物的生产路线长、工艺复杂、收率低,涉及大量有毒有害试剂和重金属催化剂的使用,污水废渣排放量大、处理难度高,总体成本居高不下。为改变此局面,推动产业的转型升级,大力开发绿色生物制造技术是行业健康发展的大势所趋。当前,甾体制药工业正处于以生物催化转化取代化学合成的产业升级阶段,随着高效酶和细胞转化的成功应用,传统的甾体生产模式正发生着深刻变化。在此基础上,若能进一步利用合成生物学技术,创建可高效从头合成甾体的微生物细胞工厂,则将彻底改变甾体制药的工业模式,切实实现甾体药物的绿色制造。近年来,已有利用微生物从头合成部分甾体化合物的报道,然而由于甾体的天然合成机制异常复杂,如何实现细胞工厂的高效生产,仍是目前面临的主要挑战。本文从甾体药物生产方式的演变出发,系统综述了甾体生物催化转化和从头合成的最新进展,重点阐述了甾体生物催化转化酶的挖掘及改造、微生物代谢转化甾醇机制的解析及转化细胞工厂的开发、微生物从头合成甾体人工路线的创建三部分内容,以期对甾体药物绿色生物制造的现状和趋势做出合理的总结与展望。
- 熊亮斌宋璐赵云秋刘坤刘勇军王风清魏东芝
- 关键词：甾体化合物
- 吡咯衍生物及其制备方法和用途
- 本发明涉及一种吡咯衍生物及其制备方法和用途。所述吡咯衍生物由酯基、吸电子基团及杂环化合物或胺类化合物分别对吡咯母体进行修饰得到。本发明提供的吡咯衍生物具有扩大的杀虫谱，对同翅目、鳞翅目等农林业害虫和螨虫，如蚜虫、飞虱、斜...
- 徐晓勇李忠刘坤王高磊陈希须志平邵旭升
- 文献传递
- 氯吡啶咪唑硝基烯醛化合物的结构衍生及生物活性研究
- 本文以氯吡啶咪唑硝基烯醛化合物为先导结构，通过与甘氨酸酯类衍生物进行反应，同时得到了以四氢咪唑并[1，2-a]吡啶酮为骨架的化合物和取代的乙二胺基吡咯类的化合物。通过对反应条件进行了探索和优化，最后分别以较高反应专一性成...
- 刘坤
- CRISPR/Cas系统的挖掘、改造与功能拓展被引量：3
- 2023年
- 规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas)是一种微生物获得性免疫系统,自从证实其可用于基因编辑之后,迅速增强了我们编辑、操纵、注释、检测甚至成像生物体DNA和RNA的能力,为基础生命科学、医学和生物工程等领域的创新发展注入了强劲动力,快速推动了合成生物学等学科的兴盛发展。然而,CRISPR/Cas系统也有一些固有的问题,例如脱靶效应、原间隔序列邻近基序(PAM)对靶目标的约束性以及基因编辑活性的可控性等,严重制约了该系统在基因精准可控编辑等方面的长足发展,阻碍了其新功能和新应用的拓展。为了突破这些限制,“蛋白质工程修饰Cas蛋白”与“基于生物信息学的新型CRISPR/Cas系统的挖掘”就成为完善发展CRISPR/Cas系统以及扩充CRISPR工具箱的两种重要策略。本文主要针对当前应用最为广泛的Ⅱ类CRISPR/Cas系统,重点介绍了CRISPR/Cas9、CRISPR/Cas12a和CRISPR/Cas13a这三种代表性系统的基本结构和作用机制,及其在结构改造和功能拓展等方面的新进展,同时也对一些新近发掘的具有重要特色和潜在应用价值的CRISPR/Cas系统进行了综述,例如CRISPR/CasФ和CRISPR/Cas12k。这些改造和发掘工作显著改善了CRISPR/Cas系统的固有问题,有力地拓展了其功能和适用性,势必会进一步快速推动CRISPR/Cas系统在诸多领域的创新发展。
- 柳柯林桂虹刘坤周伟王风清魏东芝
- 吡咯衍生物及其制备方法和用途
- 本发明涉及一种吡咯衍生物及其制备方法和用途。所述吡咯衍生物由酯基、吸电子基团及杂环化合物或胺类化合物分别对吡咯母体进行修饰得到。本发明提供的吡咯衍生物具有扩大的杀虫谱，对同翅目、鳞翅目等农林业害虫和螨虫，如蚜虫、飞虱、斜...
- 徐晓勇李忠刘坤王高磊陈希须志平邵旭升
- 文献传递
- 一种黄体酮全细胞生物传感器及其制备方法与应用
- 本发明提供一种黄体酮全细胞生物传感器及其制备方法与应用。本发明设计了一种基于靶分子与其受体结合后配体结合域LBD发生细微构象变化的非天然转录因子DLA的设计策略，模拟结果表明原核LexA、来自孕激素受体的截短LBD和原核...
- 王风清刘坤魏东芝
- 文献传递
- 苯乙烯装置SIS系统功能安全及不确定性分析与研究
- 刘坤
