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一株高产胞外多糖的乳酸芽孢杆菌的筛选及功能鉴定被引量：5: 2021年; 为丰富可用于功能食品的微生物资源,本研究从四川怀远发酵米糕作坊环境中分离出1株高产胞外多糖和乳酸的芽孢杆菌(XQ),经分子鉴定为短小芽孢杆菌Bacillus pumilus.HPLC检测XQ产乳酸含量为8 mg/mL;苯酚-硫酸法检测粗胞外多糖浓度达到7.16 mg/mL.并经滤纸片法测定出XQ产生的粗胞外多糖对常见的食源性病原菌沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均有抑菌作用.DEAE分离粗胞外多糖为中性多糖E1和酸性多糖E2.当浓度为10 mg/mL时,E1对羟自由基清除活性为3.24%,而E2羟自由基清除活性高达84.58%;E1和E2对DPPH自由基的清除活性分别为26.07%和47.03%.E2还具有明显的抗肿瘤活性:当浓度为4 mg/mL时,E2对A549细胞的生长抑制率可达到81.30%,在浓度为6 mg/mL时,E2对HepG2细胞的生长抑制率为53.40%.在模拟胃肠道耐受性实验中发现XQ对胰蛋白酶、胃蛋白酶和胆盐均具有良好的耐受性.在安全性方面,没有发现XQ有溶血现象,对革兰氏阳性菌抗生素没有抗药性,具有良好的药物安全性.表明XQ可作为一种潜在的益生菌.; 丁涛靳宝林杨晓宇白林含; 关键词：短小芽孢杆菌乳酸胞外多糖自由基清除活性益生菌

改造大肠杆菌卟啉代谢途径对重组过氧化物酶活性的影响被引量：3: 2018年; 【目的】原核表达某些需辅因子的外源蛋白时往往酶活偏低,为提高酶活和减少外加辅因子的成本,我们尝试在大肠杆菌中表达外源过氧化氢-过氧化物酶的同时提高大肠杆菌中与该酶辅因子相关的合成代谢。【方法】本研究克隆了中度嗜盐菌Halomonas elongata DSM2581的过氧化氢-过氧化物酶CAT-POD(catalase-peroxidase)编码基因kat G的ORF,构建原核表达载体p ET28a-kat G,实现了CAT-POD在大肠杆菌中的重组表达。由于CAT-POD活性依赖其活性中心血红素,而血卟啉是血红素的骨架,通过构建原核表达载体p UC19-tac-hem A,将编码5-氨基乙酰丙酸合成酶的hem A基因在大肠杆菌中过量表达,提高卟啉的含量,从而提高重组蛋白CAT-POD的酶活。【结果】最终的CAT酶活达到了377 U/m L,为对照组的7.5倍。【结论】本研究为工业生产高活性CAT-POD提供了有效的方案,也为体外重组表达含辅因子的蛋白提供可借鉴的思路。; 黄莘丁涛黄非白林含; 关键词：中度嗜盐菌卟啉代谢

巨尾桉不同树龄及染虫状态桉叶油的成分分析被引量：7: 2016年; 为了考察树龄、虫害与巨尾桉叶油成分的相互关系,更好的开发桉树资源,采用水蒸气蒸馏法提取不同树龄（4-6年生）巨尾桉叶油,用GC-MS法对巨尾桉叶油主要化学成分进行鉴定,分析不同树龄和染虫状态的桉叶油成分变化规律。结果表明,随着树龄增加,桉叶油总量逐年增加;生长年限不同,桉叶油中物质的组成及相对含量存在差异。主要成分相对含量变化情况为：桉油醇、乙酸松油酯含量随树龄逐年上升;d-柠檬烯、α-蒎烯相对含量在4到5年达到峰值,5年后开始下降;莰烯、β-蒎烯和α-松油醇逐年下降。被云斑天牛感染的林地,桉油醇、α-蒎烯、β-蒎烯、莰烯呈相对下降趋势,而d-柠檬烯、α-松油醇、乙酸松油酯的含量上升。; 周莉君丁涛杨志荣陈亮白林含; 关键词：巨尾桉挥发油树龄云斑天牛

基于高通量测序对四川怀远特色发酵食品微生物群落结构分析被引量：11: 2019年; 为了研究四川怀远特色传统发酵食品的微生物多样性,利用Illumina HiSeq 2500高通量测序平台,对当地豆腐帘子和冻糕的微生物群落结构进行了系统分析.结果表明,豆腐帘子的菌群主要隶属于变形菌门(Proteobacteria)和担子菌门(Basidiomycota),检测出40个细菌属和21个真菌属,主要优势微生物是Acinetobacter和Trichosporon.冻糕的菌群主要隶属于厚壁菌门(Firmicutes)和子囊菌门(Ascomycota),检测出36个细菌属和23个真菌属,主要优势微生物是Lactobacillus和Kazachstania.; 刘筱雪袁文娟丁涛熊粟栗张杰白林含; 关键词：高通量测序传统发酵食品微生物群落结构多样性

拟茎点霉属Phomopsis sp.S4菌株发酵产物对稻瘟病菌细胞膜的抑制作用被引量：4: 2018年; 内生真菌拟茎点霉属真菌Phomosis sp. S4菌株发酵次生代谢产物对多种植物病原菌具有良好的抑菌效果，在防治农作物病害上具有应用前景. 为探究S4菌株发酵产物对植物病原真菌的抑制机理，以稻瘟病菌为研究材料，通过普通抑菌实验、扫描电镜、荧光定量PCR以及生理实验，检测S4菌株发酵液提取物对稻瘟病菌细胞膜的作用情况. 扫描电镜实验显示经S4菌株提取物处理的稻瘟病菌菌丝严重变形，菌丝表面出现大量褶皱，表明提取物对稻瘟病菌细胞膜和细胞壁的完整性造成破坏. 荧光定量PCR检测到细胞膜中重要组成成分麦角甾醇合成途径中相关基因的变化情况，麦角甾醇合成途径中ERG1、ERG11、ERG6基因分别下调了2.0、1.40、2.7倍，ERG7基因上调了1.38倍. 随后的生理实验也表明经过S4提取物处理的稻瘟病菌确实存在细胞内容物泄露的情况. 本研究表明S4提取物通过抑制麦角甾醇合成而破坏细胞膜的完整性导致细胞内容物泄露，从而达到抑制真菌生长效果. （图7 表1 参16）; 李芙蓉丁涛白林含; 关键词：内生真菌稻瘟病细胞膜麦角甾醇

莱茵衣藻外源基因整合特征分析及蛋白表达被引量：2: 2018年; 将衣藻表达载体pSP108转化莱茵衣藻细胞壁缺陷型藻株CC-400,通过接头PCR获得并分析阳性转化子中ble基因的侧翼序列发现:外源基因的插入位点呈现随机性,并且有些转化子中衣藻基因组和质粒序列发生断裂和重排.通过间接ELISA分析外源蛋白表达量,并结合外源基因整合状态时发现:在ble基因启动子核心区域缺失的阳性转化子中,ble可以利用自身基因启动子进行蛋白表达,但表达量相比使用质粒载体PSP108上RBCS2启动子的表达量要低;在部分启动子完整的阳性转化子中蛋白表达量低下,可能与衣藻基因组大片段的缺失相关.; 刘芮均丁涛彭丝伦白林含; 关键词：莱茵衣藻外源基因表达

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丁涛