徐红艳 作品数:19 被引量:18 H指数:3 供职机构: 中国水产科学研究院珠江水产研究所 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
低温胁迫对乌鳢、斑鳢及其杂种血清生化指标的影响 被引量:3 2016年 本实验探讨了骤降、缓降两种不同降温模式下低温胁迫对乌鳢(Channa argus)、斑鳢(Channa maculata)及其杂种斑乌鳢(C.maculata♀×C.argus♂)、乌斑鳢(C.argus♀×C.maculata♂)血清生化指标的影响。具体的实验方法为,将4种鳢分别以6℃/24 h、1℃/24 h的速率从18℃降至2℃,在18℃、12℃、6℃、2℃4个温度点维持12 h,取样,抽血,制备血清,测定生化指标。结果表明,两种降温模式下,多数酶活性胁迫后显著高于胁迫前(p<0.05),但急降组谷草转氨酶(GOT)和缓降组谷胺酰转肽酶(GGT)活性显著低于胁迫前(p<0.05);甘油三酯(TG)含量显著低于胁迫前(p<0.05),血糖(Glu)含量与之相反;血钠(Na+)、氯(Cl-)浓度变化趋势相似,均显著降低(p<0.05);总蛋白(TP)含量低于胁迫前,其中斑鳢波动幅度最大,波动范围为(26.4±2.91)^(43.1±1.81)mmol/L。两种降温模式比较,胁迫后急降组GPT、GGT活性及Na+、Cl-含量高于缓降组,而GOT、ALP、LDH活力及Glu、K+、Ca2+含量与之相反。本实验研究认为,低温胁迫后所有鳢的肝脏、心肌等组织器官均出现了不同程度的损伤,缓降跟骤降模式下各指标变化规律也不完全一致,斑鳢耐低温能力最弱,长期处于6℃以下将致死;4种鳢各种生理指标变化趋势差异较大,纯种间或杂交种间具有相似趋势,表明杂交种与父母本生理过程变化不同,并为鳢低温胁迫研究提供一些基础性数据。 李敏芬 罗青 赵建 徐红艳 史燕 洪孝友 朱新平 陈昆慈关键词:低温胁迫 血清酶 中华鳖dazl基因克隆及在生殖细胞中的表达 被引量:3 2019年 为探索龟鳖类生殖细胞的发育分化机制,实验通过特异性引物克隆了中华鳖dazl基因的cDNA片段,长1 007 bp,其中包括5′端非编码区197 bp,3′端非编码区33 bp,开放阅读框777 bp,编码258个氨基酸。氨基酸序列比对显示其与西部锦龟Dazl同源性最高,达96%;与小鼠Dazl同源性达75%。荧光定量PCR分析结果显示,中华鳖dazl mRNA主要在精巢和卵巢中表达,在体细胞组织中仅检测到微量表达。冰冻切片原位杂交结果显示,中华鳖dazl mRNA在生殖细胞中特异表达,且在不同时期的生殖细胞中呈动态表达模式。在精巢中,中华鳖dazl mRNA在初级和次级精母细胞中表达最强,在精原干细胞中表达水平次之,在精子细胞中未检测到信号;在卵巢中,中华鳖dazl mRNA信号在初级卵母细胞胞质中均匀分布且在最早期的初级卵母细胞中信号最强,随着卵母细胞的增大,信号逐渐聚集并逐渐减弱。研究表明,dazl基因可能对中华鳖两性生殖细胞的发生具有重要的调控作用。 唐舟凯 张飘逸 储张杰 朱新平 朱新平 李伟 徐红艳关键词:中华鳖 DAZL 生殖细胞 精子发生 卵子发生 中华鳖组蛋白H2A变体克隆及其在卵母细胞中的表达分析 被引量:2 2021年 为研究组蛋白H2A对龟鳖动物生殖细胞发育分化作用和机制,克隆了中华鳖(Pelodiscus sinensis)组蛋白H2A变体的同源物(命名为PsH2A),分析其转录本的表达模式及在卵巢发育成熟过程中的细胞定位。PsH2A cDNA序列全长575 bp,5′端非编码区68 bp,3′端非编码区108 bp,开放阅读框399 bp,编码133个氨基酸。氨基酸序列比对结果显示其与龟类的H2A变体同源性更高,与哺乳类同源性较低。RT-qPCR和RT-PCR结果显示,PsH2A转录本在1冬龄、2冬龄和3冬龄的中华鳖卵巢中高表达(P<0.01),而在精巢和其他成体组织中几乎检测不到。化学原位杂交结果显示,PsH2A mRNA在卵母细胞中特异性表达,其中初级卵母细胞中表达信号最强,且均匀的分布在细胞质中。随着卵母细胞发育成熟进入到生长期和成熟期后,目的信号逐渐减弱,并且主要在核周区域表达。此外,PsH2A mRNA的相对表达量也表现出中华鳖卵巢发育的季节性变化。综上,研究结果表明PsH2A在中华鳖卵母细胞发育过程中可能发挥着重要作用。 祝骏贤 陈辰 刘晓莉 王亚坤 雷骆 洪孝友 于凌云 徐红艳 李伟 朱新平关键词:中华鳖 卵母细胞 细胞定位 一种基于EST-SSR标记的罗氏沼虾分类方法 本发明公开了一种基于EST‑SSR标记的罗氏沼虾分类方法,旨在筛选到12个罗氏沼虾EST—SSR分子标记位点,并建立一种准确、有效地利用分子标记检测不同来源罗氏沼虾遗传结构和遗传背景的方法,以鉴定出不同来源罗氏沼虾的遗传... 于凌云 朱新平 陈昆慈 赵建 陈辰 李伟 洪孝友 徐红艳 刘晓莉一种中华鳖卵巢细胞分离及体外培养方法 本发明公开了一种中华鳖卵巢细胞分离及体外培养方法,包括以下步骤:(1)选取性未成熟的雌鳖,经灭菌后取出离体卵巢组织,将离体卵巢组织用磷酸盐缓冲液冲洗破碎后,置于容器中;(2)采用胶原酶和胰酶对冲洗后的离体卵巢组织先后进行... 徐红艳 朱新平 李伟文献传递 中华鳖figlα基因的克隆及其在性腺中的表达分析 被引量:1 2019年 为解析中华鳖figlα基因功能及其对配子生成的作用机制,本研究开展了中华鳖figlα基因的cDNA序列克隆及其mRNA表达模式分析。克隆获得的figlα基因cDNA序列为714 bp,包含长72个碱基的3'UTR和长642个碱基的开放阅读框(open reading frame,ORF),共编码213个氨基酸。中华鳖Figlα蛋白序列与西部锦龟Figlα蛋白的同源性高达93%,且包含一个Figlα蛋白高度保守的bHLH(basic helix-loop-helix)结构域,因此被命名为PSFiglα。同时,NJ系统进化树分析显示中华鳖Figlα蛋白与哺乳类、鸟类的聚为一支。荧光定量PCR分析发现中华鳖figlα基因主要在性腺中表达:在卵巢中表达最强,精巢中表达较弱,而在其它体组织中均未检测到明显的表达。冰冻切片原位杂交分析表明:中华鳖figlαmRNA在其卵子发生过程的各期卵泡中均有表达,在初级卵母细胞(Ⅱ~Ⅴ期)中表达最强且主要分布在卵母细胞的胞质中;在生长卵母细胞(Ⅵ~Ⅸ期)及成熟卵母细胞(Ⅹ期)中,figlαmRNA主要分布在卵母细胞胞质及其周边的滤泡细胞中。在精巢中,中华鳖figlαmRNA在初级精母细胞中表达最强,在次级精母细胞和精子细胞中表达较强,在精原细胞中表达较弱,而在体细胞中几乎检测不到信号。研究结果表明figlα基因可能主要调控中华鳖卵泡的形成及其卵巢的发育,同时可能在中华鳖精子发生过程中也有一定的调控作用。本研究为进一步开展中华鳖及其它爬行动物配子生成以及性腺发育分化的研究奠定了基础。 赵岩岩 李伟 吴栩灵 朱新平 徐红艳关键词:中华鳖 基因 MRNA 卵子发生 精子发生 美洲鲥鱼雄性生殖细胞的冷冻保存方法 本发明公开了一种美洲鲥鱼雄性生殖细胞冷冻保存方法,包括以下步骤:(1)对雄性美洲鲥进行酒精杀菌处理,然后取出精巢组织,用磷酸盐缓冲液冲洗并浸泡精巢组织,装入试管,冷藏;(2)弃去所述试管的磷酸盐缓冲液,在干净的磷酸盐缓冲... 徐红艳 朱新平 吴栩灵文献传递 一种快速鉴定中华鳖遗传性别的PCR扩增引物、方法及试剂盒 林本发明公开了一种快速鉴定中华鳖遗传性别的PCR扩增引物,包括一对性别特异性分子标记引物和一对内参基因引物,还公开了一种快速鉴定中华鳖遗传性别的PCR方法,以及快速鉴定中华鳖遗传性别的试剂盒。该扩增引物可在中华鳖早期鉴定... 李伟 朱新平 徐红艳 赵建 陈辰一种黄喉拟水龟卵巢细胞的分离培养方法 本发明公开了一种黄喉拟水龟卵巢细胞的分离培养方法,涉及水产动物细胞培养技术领域。该方法包括以下步骤:黄喉拟水龟卵巢组织依次经胶原蛋白酶Ⅰ型和胰蛋白酶消化后,终止消化反应,之后分离得到消化后细胞;所述消化后细胞在完全培养基... 刘晓莉 朱新平 徐红艳 王亚坤 李伟 洪孝友 于凌云 陈辰 徐昊旸中华鳖vasa基因克隆及在卵母细胞中的表达分析 被引量:5 2017年 研究利用中华鳖为研究模型进行爬行类生殖细胞发育分化成熟等生物学研究,克隆了中华鳖vasa基因的c DNA序列,全长3865 bp,包括5′端非编码区90 bp,3′端非编码区1699 bp,开放阅读框长2076 bp,共编码691个氨基酸。中华鳖Vasa氨基酸序列包含DEAD-box家族蛋白8个保守保守功能域,在N末端有4个RGG重复序列和2个GG富集区,与小鼠Vasa蛋白的同源性较高(72%)。荧光定量PCR的结果表明,中华鳖vasa m RNA主要精巢和卵巢中表达,其他体组织中均难检测到表达。卵巢冰冻切片原位杂交结果显示:中华鳖vasa m RNA在生殖细胞中特异表达;在卵子发生过程中的不同发育期卵母细胞中呈现动态的变化。即vasa m RNA在初级卵母细胞及生长期卵母细胞中表达最强,且均匀分布在细胞质中,随着卵母细胞的逐渐增大,信号逐渐减弱,直至在成熟的卵母细胞中几乎检测不到表达信号,说明vasa可能在中华鳖早期卵母细胞发育中起重要作用。同时,vasa基因可作为中华鳖生殖细胞分子标记物,根据其m RNA的表达水平来鉴别不同发育时期的卵母细胞。研究结果为进一步开展中华鳖胚胎生殖细胞发育及配子生成,特别是研究中华鳖,乃至爬行类原始生殖细胞(Primordial Germ Cells,PGCs)的起源、迁移、分化等研究奠定了基础。 张飘逸 李伟 朱新平 洪孝友 陈昆慈 徐红艳关键词:VASA 中华鳖 生殖细胞 卵子发生