李艳伟
- 作品数：37 被引量：63H指数：4
- 供职机构：浙江大学医学院更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅科研计划浙江省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：文化科学医药卫生生物学理学更多>>
- 一种高得率高活性的单细胞分选方法
- 本发明公开了一种高得率高活性的单细胞分选方法，分选得到的单细胞活力较高，96孔板单克隆形成率高达95.8％；分选后的单细胞能够高效率地形成单克隆，而且通过分选能够直接获得更多有效的单细胞基因数据；分选后的细胞群体活性完全...
- 宋兴辉王琳琳李艳伟王佳佳黄莹莹郭春邢月婷
- 文献传递
- 多能干细胞向造血细胞定向诱导分化的研究进展
- 2023年
- 造血干细胞(HSC)移植是血液系统疾病最有效的治疗手段。现阶段,同种异体HSC移植和同种自体HSC移植已在临床被广泛采用,但仍存在不少难题,如:异基因移植物抗宿主发病(GVHD)难题,以及自体HSC移植数量限制等。多能干细胞(PSC)具备在体外自主更新的潜力,多向分化和形成人体所必需的HSC,PSC包含诱导多能干细胞(iPSC)和胚胎干细胞(ESC)。由于不清楚PSC向HSC分化的内在调节机制和外在调节机制,导致PSC向HSC诱导分化的效率低下,且难以获得机体自身造血功能的HSC等。为此,综述PSC造血分化过程的研究进展。以小鼠体内胚胎造血发生为切入点,利用体外PSC造血分化研究平台,阐述PSC向HSC的内源性分子调控事件,包括转录因子和信号通路介导的造血调控;外源性分子调控事件,包括基质细胞、细胞因子以及新型生物材料等参与的造血调控。同时指出PSC向HSC/HSPC功能移植应用存在问题,为PSC向HSC体外分化研究,为实现PSC来源的HSC以及下游血液细胞的临床转化应用提供依据。
- 李艳伟单威刘丽黄琼方三华
- 关键词：造血干细胞多能干细胞造血分化
- 分选方式对细胞能量代谢的影响研究
- 2024年
- Seahorse XF(extracellular flux)是从能量的角度检测代谢及调控的方法,因其实时检测的优点,具有非常好的应用前景,但该技术要求目的细胞纯度高、活性好,因此需要对原代细胞的分选条件进行优化。该文通过免疫磁珠分选技术和流式细胞分选技术对小鼠脾脏CD4+T细胞进行研究,结果发现两种分选方式纯化的CD4+T细胞在活性氧水平上无明显差异,相较于磁珠分选,流式分选纯化的CD4+T细胞线粒体膜电位、ATP合成相关的氧耗值和线粒体储备呼吸能力均呈现下降趋势,说明磁珠分选相较于流式分选对CD4+T细胞能量代谢的损伤更小。为了进一步了解流式分选的影响,该文对分选条件进行了研究。通过Moflo AstriosEQ分选仪中不加电分选模式(SD),加电分选模式不同偏振电压(700 V、2400 V、5000 V)以及同一偏振电压下不同液滴加电(35%、70%)对HEK 293T和Jurkat进行分选,结果发现SD组相较于加电分选模式对细胞代谢干扰较小,加电分选模式中5000 V实验组对细胞代谢有显著影响。同一偏振电压条件下,不同液滴加电实验组均未对细胞产生显著干扰。综上,磁珠法更适用于小鼠原代CD4+T细胞能量代谢实验前分选预处理。流式法用于能量代谢实验预处理时建议优先选择不加电分选模式,选择加电分选模式时建议使用小于2400 V的偏振电压。该实验结果为能量代谢检测实验提供了分选方式和分选条件的数据参考。
- 邢月婷李艳伟黄莹莹王佳佳郭春沈鑫周南沈红英宋兴辉
- 关键词：磁珠分选活性氧线粒体膜电位能量代谢
- 一种流式细胞分析用荧光染色装置及染色方法
- 本发明涉及细胞染色领域，特别涉及一种流式细胞分析用荧光染色装置及染色方法，包括工作台、进料筒、混合筒、充氮机、定量进料部件和细胞混合部件；本发明能够解决现有技术对细胞进行染色标记的过程中存在的以下问题：对粘稠状细胞染色时...
- 李艳伟宋兴辉王佳佳郭春刘丽黄莹莹邢月婷黄琼刘双双周南
- 基于实时无标记技术研究流式分选后细胞活性的检测方法
- 2022年
- 利用流式细胞法、细胞计数试剂盒(CCK-8)法、实时细胞功能分析(RTCA)法分别检测分选前后细胞的活性,综合比较了3种方法的检测原理、操作特点等。结果显示,流式细胞法测得的分选后细胞凋亡率为(3.85±0.008)%,分选前细胞凋亡率为(14.09±0.021)%,分选后细胞凋亡率低于分选前,具有统计学差异(P<0.05);分选前后的活细胞比例显示,分选后活细胞比例高于分选前,具有显著性统计学差异(P<0.001)。CCK-8法测得的分选后细胞活性高于分选前,具有显著性统计学差异(P<0.001);RTCA法测得的分选后细胞连续增殖活性明显高于分选前,具有极显著性统计学差异(P<0.0001)。结果显示,相较于CCK-8法和流式细胞法,RTCA法的细胞用量少、可回收,操作简便,无需标记,检测灵敏度高,可获得实时动态的细胞生长曲线,适合研究分选后细胞长效动态的活性变化,可为基础和临床分选后活细胞的功能研究提供检测手段。
- 李艳伟王佳佳邢月婷郭春黄莹莹宋兴辉黄琼
- 关键词：流式细胞分析CCK-8细胞活性
- 高校仪器共享平台档案信息化管理模式探索被引量：1
- 2023年
- 随着科技的不断发展进步,加强大型仪器档案管理将有助于共享平台仪器的稳定运行和实验的顺利开展.本着追本溯源的目的,就高校共享平台大型仪器档案管理中存在的问题进行研究.依托浙江大学医学院公共技术平台网站,探索并创新仪器信息化管理模式.建立仪器申请、调研、论证、招标、采购、验收、运行维护、报废等全周期的办公自动化(office automation,OA)平台.建立的OA平台可实现便捷化、科学化、智能化的仪器档案管理模式,以期为高校共享平台仪器档案有效管理提供参考和实现资源共享.
- 李艳伟盛弘强方三华刘丽
- 关键词：共享平台仪器设备档案信息化管理
- 不同激发方式的流式细胞分选仪一体化管理模式研究被引量：1
- 2022年
- 目的:研究建立不同激发方式的流式细胞分选仪一体化管理模式,探讨其应用效果。方法:针对流式分选仪的组成、工作原理、环境要求、人员要求、培训交流、操作管理及注意事项,探讨激光在空气中激发和在石英杯中激发两种流式细胞分选仪的使用及管理方法。结果:总结出一套日常维护、运行及培训的开放一体化管理模式,仪器每日稳定运行较一体化管理之前的8 h提高到10~12 h,运行机时数>1500 h/年,分选后细胞活性>90%,分选细胞纯度>99%,污染率<1%,样品堵塞<2%。结论:不同激发方式的流式细胞分选仪一体化管理模式能够加强仪器运行及维护管理,可使仪器使用者快速熟悉操作分选仪,延长分选仪使用寿命,提高分选仪使用率,为获得高纯度、高活性和高得率细胞提供保证,为科学研究、实验教学及技术开发提供更优质服务。
- 李艳伟王佳佳黄莹莹宋兴辉
- 大型仪器共享平台运行机制综合创新探析被引量：4
- 2023年
- 大型仪器不仅是高校科学研究和社会服务的物质基础,也是高校研究生实验技能培养的重要载体。推进大型仪器共享平台运行机制创新是服务于高校创新驱动发展战略的重要举措。文章以浙江大学医学院大型仪器共享平台为例,阐述平台在组织构架、大型仪器调研和论证、研究生操作技能培养、实验技术队伍建设、安全管理等五个方面的创新举措。该校通过综合创新,建立高效、安全的大型仪器共享平台运行体系,提升平台服务能力和水平,促进平台内涵式发展,为高校科学研究、研究生培养和社会服务提供了良好的技术支撑。
- 方三华李艳伟黄莹莹刘双双
- 一种利用流式细胞分选仪获取指定粒径外泌体的分离纯化方法
- 本发明公开了一种利用流式细胞分选仪获取指定粒径外泌体的分离纯化方法，包括使用流式细胞分选仪进行外泌体分选，使用50μm空气喷射喷嘴，鞘液的压力为75‑80.5psi，样品流的压力与鞘液的压力差值为0.3‑0.6psi；阈...
- 宋兴辉杨尧顺王琳琳李艳伟邢月婷王佳佳黄莹莹郭春
- 文献传递
- 大型仪器共享平台网络预约系统的优化和提升被引量：7
- 2021年
- 医学院公共技术平台从成立之初就非常重视大型仪器预约系统建设,在借鉴兄弟院校建设经验基础上,Ⅰ期建设实现了仪器信息展示、预约、使用、维护、统计、计费等一体化管理;在Ⅱ期建设中,对仪器预约、计费、统计报表等模块进行优化,并新增培训和考核、配件管理、仪器电子档案等模块,拓展和优化了网络预约系统功能,显著提高了平台的运行效率。但在测试费缴纳、绩效考核信息化、用户评价体系和技术交流等方面仍然存在问题和不足,有待进一步优化和提升。
- 方三华刘丽洪晓黎杨文娟李艳伟
