傅奕
- 作品数：39 被引量：108H指数：7
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 人白细胞介素18的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：8
- 2002年
- 目的 在原核系统中表达并纯化人白细胞介素 18(hIL 18) ,制备兔抗人白细胞介素 18多克隆抗体。方法 用RT PCR扩增出hIL 18的cDNA ,克隆到原核表达载体pJW2中 ,转化大肠杆菌JM10 1中诱导表达并纯化。用纯化的人白细胞介素 18免疫新西兰兔制备多克隆抗体。结果 克隆得到序列正确的hIL 18cDNA ,与载体连接后转化入大肠杆菌JM10 1中诱导表达并成功纯化 ,并用纯化的人白细胞介素 18成功制备了兔抗人白细胞介素 18多克隆抗体。
- 裴冬生孙亚锋傅奕胡书群陆梁赵惠仁
- 关键词：白细胞介素18原核表达多克隆抗体
- 人肝癌细胞株SMMC-7721中整合蛋白β1亚基过表达上调p27～（Kipl）蛋白表达的分子机制研究
- 整合蛋白(integrin)是一类重要的细胞表面粘附分子，可以调节许多基本的细胞功能，例如细胞增殖、分化和凋亡等。一般情况下，整合蛋白通过控制细胞与细胞外基质粘附，促进细胞增殖或抑制细胞凋亡。但是在一些实体肿瘤，例如肝癌...
- 傅奕
- 关键词：整合蛋白SKP2钙蛋白酶
- 文献传递
- 基础医学实验教学示范中心的建设成效与思考被引量：8
- 2011年
- 基础医学实验教学示范中心的建设是教育部实施"高等学校本科教学质量与教学改革工程"的重要内容之一。对基础医学实验教学示范中心的建设内容和建设成效进行归纳和总结,并就建设过程中出现的问题进行分析,从而优化实验示范中心内涵建设,最终提高基础医学的实践教学质量,为培养高素质的医学人才奠定基础。
- 龚卫娟季明春吴宏海傅奕程宏
- 关键词：实验教学
- 转基因细胞株BaF3-RAE1ε诱导产生的MDSC的杀伤功能及对NK细胞功能的影响
- 2017年
- 目的:探讨表达NKG2D配体视黄酸早期转录因子1ε(retinoic acid early transcript 1ε,RAE1ε)的原B细胞株BaF3诱导产生的髓系抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)的杀伤功能及对NK细胞功能的影响。方法:以小鼠原B细胞株BaF3为基础,构建表达空质粒的BaF3-mock对照细胞和表达RAE1ε的BaF3-RAE1ε细胞。将BaF3-mock和BaF3-RAE1ε细胞分别注射小鼠后诱导产生CD11b^+Gr-1^+MDSC,磁珠分选MDSC后与NK细胞共培养后,流式细胞术检测其对NK细胞表面NKG2D和CD107a表达的影响,ELISA法检测其对NK细胞分泌IFN-γ的影响。将MDSC分别与BaF3-mock和BaF3-RAE1ε细胞共培养后,乳酸脱氢酶释放法检测其对靶细胞BaF3-mock和BaF3-RAE1ε细胞的杀伤作用。结果:与BaF3-mock细胞相比,BaF3-RAE1ε细胞诱导产生的MDSC对NK细胞表面NKG2D和CD107a的表达没有明显影响(P>0.05),对NK细胞分泌IFN-γ的水平也没有显著影响(P>0.05)。与BaF3-mock细胞相比,BaF3-RAE1ε细胞诱导产生的MDSC对靶细胞BaF3-mock和BaF3-RAE1ε的杀伤作用明显增强[(1.99±0.39)%vs(8.63±1.45)%、(5.09±0.67)%vs(17.33±0.41)%,P<0.01]。[(1.20±0.09)%vs(10.31±0.69)%、(5.52±1.64)%vs(18.91±3.04)%,P<0.01]。结论:RAE-1ε增强MDSC对靶细胞的杀伤功能。
- 钱莉刘阳刘露叶枫王少卿贾筱琴傅奕龚卫娟田芳丁婧娟徐雨薇
- 关键词：髓系抑制性细胞NK细胞
- 裙带菜内生菌Bacillus sp. QD-4发酵液化学成分研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究裙带菜内生菌Bacillus sp.QD-4发酵液的化学成分。方法采用硅胶柱层析、羟丙基葡聚糖凝胶柱层析、薄层层析、反相高效液相色谱等方法对QD-4发酵液乙酸乙酯提取物进行分离纯化,并采用质谱、核磁共振谱等技术及文献比对的方法对化合物进行结构鉴定;采用改良Ellman法测定化合物对乙酰胆碱酯酶(ACh E)的抑制活性。结果从QD-4发酵液乙酸乙酯提取物中分离得到5种化合物:环-(L-亮氨酸-L-4-羟脯氨酸)(1)、环-(L-脯氨酸-L-酪氨酸)(2)、环-(甘氨酸-L-脯氨酸)(3)、环-(L-脯氨酸-D-酪氨酸)(4)和尿嘧啶(5)。在400μg/m L浓度下,化合物2和4对ACh E的抑制率分别为(11.62±2.29)%和(5.62±1.63)%。结论化合物2和4对Ach E具有一定的抑制活性,是Bacillus sp.QD-4发酵液抑制ACh E活性的物质基础。
- 申丽秦云李明王晶傅奕王凤舞
- 关键词：裙带菜内生菌化学成分乙酰胆碱酯酶抑制活性
- 肝癌血清自身抗体的研究进展
- 2017年
- 肿瘤相关抗原会被机体的免疫系统识别而产生相应的自身抗体,其是非常有前景的肿瘤标志物之一,有多种途径可以检测和鉴别。而肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,其预后差、致死率高。在向肝癌转变的过程中,抗肿瘤相关抗原抗体的出现甚至早于肿瘤相关抗原。目前,研究较多的抗肿瘤相关抗原抗体包括p53抗体、胰岛素样生长因子Ⅱ信使RNA结合蛋白家族抗体、抗Ku86蛋白抗体等。其中,新近发现的血清抗Ku86抗体的敏感性和特异性甚至高于甲胎蛋白,而糖调节蛋白78抗体与甲胎蛋白联合检测可以大大提高肝癌诊断的敏感性。因此,未来抗肿瘤相关抗原抗体可能成为更好地诊断肿瘤尤其是早期肿瘤的血清标志物。
- 程文婷傅奕
- 关键词：肝癌自身抗体自身免疫
- 整合蛋白β1亚基过表达上调p27抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖(英文)被引量：1
- 2008年
- 目的:研究整合蛋白β1亚基过表达对肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响及机制。方法:采用MTT及细胞流式测定观察整合蛋白β1亚基过表达对肝癌细胞SMMC-7721增殖及细胞周期的影响。蛋白质印迹及RT-PCR检测细胞中p27的蛋白及mRNA的表达,并构建p27的RNA干扰质粒,转染整合蛋白β1亚基过表达细胞,再观察p27的表达变化对细胞增殖的影响。结果:整合蛋白β1亚基过表达可以抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖,并将细胞阻滞在细胞周期的G1期。整合蛋白β1亚基过表达可以在蛋白水平上调p27的表达,但并不影响p27的mRNA水平。p27的RNA干扰质粒可明显抑制p27的表达,而且p27表达的下调可以阻止整合蛋白β1亚基过表达所引起的细胞增殖抑制。结论:整合蛋白β1亚基过表达通过上调p27抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖。
- 傅奕梁玉龙
- 关键词：整合蛋白过表达P27
- NKG2D配体RAE1ε对乳腺癌细胞4T1衍生MDSC功能的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨表达小鼠NKG2D配体之一视黄酸早期转录因子1ε(retinoic acid early transcript 1ε,RAE1ε)的原B淋巴细胞Ba F3对乳腺癌细胞株4T1成瘤小鼠来源的髓系抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)功能的影响。方法:以小鼠原B淋巴细胞株Ba F3为基础,构建表达RAE1ε的Ba F3-RAE1ε细胞以及表达空质粒的Ba F3-mock对照细胞。通过4T1原位肿瘤模型诱导产生CD11b+Gr-1+MDSC,将Ba F3-mock细胞和Ba F3-RAE1ε细胞作为刺激细胞,分别与脾MDSC共培养,流式细胞术检测MDSC表面CD40、CD80、F4/80、CD11c的表达和MDSC内活性氧(ROS)的水平;ELISA法检测共培养上清液IL-10、IL-4和IFN-γ的含量;Griess法检测共培养上清液一氮化氮(NO)的浓度。磁珠分选共培养体系中的MDSC,检测裂解后精氨酸酶的活性;另外,将分选后的MDSC与抗CD3/抗CD28抗体活化的脾细胞共培养,CFSE法检测活化的CD3+CD8+T细胞增殖情况。结果:成功获得4T1原位肿瘤模型来源的小鼠脾MDSC。与Ba F3-mock细胞相比,Ba F3-RAE1ε细胞刺激对MDSC分泌IL-4、IFN-γ、IL-10和NO的水平没有明显影响(P>0.05);对MDSC表达CD40、CD80、F4/80、CD11c和ROS也没有显著影响(P>0.05)。与Ba F3-mock细胞相比,Ba F3-RAE1ε细胞刺激显著提高MDSC的精氨酸酶活性(156.166±1.209 vs 110.135±7.356,P<0.01),并明显增强MDSC对CD8+T细胞增殖的抑制作用。结论:RAE-1ε在体外增强4T1成瘤小鼠来源的MDSC的抑制功能。
- 钱莉刘阳叶枫刘露王少卿贾筱琴傅奕龚卫娟田芳
- 关键词：髓系抑制性细胞精氨酸酶
- 医学留学生生物化学的教学体会被引量：2
- 2008年
- 留学生教育不仅是我国加强教育文化对外合作交流的需要，也是高等教育国际化的重要组成部分。对印度留学生的生物化学理论及实验教学进行总结，从教学前准备、课堂教学及考核等方面提出一些体会。
- 傅奕
- 关键词：生物化学教学方法实验教学
- PI3K信号通路通过Skp2、p27调节肝癌细胞的增殖被引量：12
- 2008年
- 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路调节肝癌细胞增殖的机制.用LY294002特异性阻断PI3K信号通路后,人肝癌细胞(SMMC-7721)的增殖明显被抑制.RT-PCR及蛋白质印迹结果显示,LY294002增加了p27蛋白的表达,但不影响p27的mRNA表达.在LY294002处理的细胞中转入p27的RNAi质粒以干扰p27蛋白的表达后,肝癌细胞的增殖能力可部分恢复.放线菌酮(Chx)处理实验表明,阻断PI3K信号通路使p27蛋白的半衰期延长,稳定性增加.进一步研究发现,LY294002可抑制介导p27蛋白降解的关键分子Skp2的mRNA表达,还可缩短Skp2蛋白的半衰期,降低Skp2蛋白的稳定性.但在SMMC-7721中分别转染PI3K下游重要靶分子Akt的持续激活和失活突变体,却并不影响p27蛋白的表达.这些结果表明,PI3K信号通路在转录及翻译后水平调节Skp2的表达而影响p27蛋白的降解,从而调节肝癌细胞的增殖,但Akt并没有参与这种调节.
- 傅奕方征宇王丽影李增霞杨勇查锡良
- 关键词：P13K信号通路P27SKP2AKT蛋白质降解
