路钢 作品数:12 被引量:37 H指数:4 供职机构: 香港中文大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省教育厅科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
长期口服天麻素对SAMP8鼠记忆力及额叶Sst表达的影响 被引量:7 2010年 目的:研究长期口服天麻素对SAMP8鼠记忆力的影响及与额叶Sst表达水平的关系。方法:将4月龄雄性SAMP8鼠20只随机分成2组:天麻素治疗组和对照组。治疗组每只鼠平均每日饮10ml含60μg/ml天麻素的蒸馏水,对照组每日仅饮用蒸馏水,直至12月龄。然后,观察两组鼠皮毛、眼睑、运动等基本情况;并通过passive-avoidance-test实验检测两组鼠对疼痛刺激的短期记忆力;同时用QRT-PCR(quantitative real time polymerase c hain reaction)和Western Blot分别检测两组鼠额叶生长抑素(somatostatin,Sst)的转录水平和表达水平。结果:天麻素治疗组小鼠的毛发光泽好、眼睑无炎症、较活跃,而对照组小鼠脱毛明显、部分小鼠眼睑有炎症、运动少;Passive-avoidance-test实验中天麻素治疗组小鼠明室停留时间及进入暗室小鼠的比例与对照组相比具有显著性差别;QRT-PCR结果显示,天麻素治疗组小鼠额叶中Sst转录水平较对照组升高,二者比较差别具有显著性;Western Blot结果显示,天麻素治疗组小鼠额叶中Sst表达水平较对照组明显升高。结论:天麻素治疗可能通过增进额叶Sst的转录和表达水平以改善SAMP8鼠的学习记忆能力。 陈绍春 路钢 冯曜宇 李圆圆 杨智勇 李力燕 冯忠堂关键词:天麻素 SST BLOT TCD对脑积水行侧脑室分流术治疗前后的观察 脑积水(Hydroccphalus)是由于脑脊液分泌过多、吸收障碍或循环通路受阻而引起脑脊液在脑室系统及蛛网膜下腔积聚,从而导致脑室扩大和/或颅内压逐渐增高。任何年龄均可发病,病因可为先天性发育异常所致,也可继发于脑部肿... 李园园 牛联芳 路钢文献传递 脑提取液诱导骨髓基质细胞向神经元分化的研究 被引量:3 2004年 丁鹏 冯忠堂 王廷华 董坚 杨智勇 赵楠 路钢关键词:骨髓基质细胞 神经元 细胞分化 大鼠β神经生长因子前体基因的克隆及其真核表达载体pEGFP-NGF的构建 2004年 目的 克隆大鼠脑组织中神经生长因子 (NGF) β亚基前体的全长序列 ,构建其真核表达载体 p EGFP-NGF。方法 采用 RT- PCR方法扩增 NGFβ亚基前体的全长序列 ,克隆入载体 p MD18- T,转化大肠杆菌 JM10 9,挑选白色菌落行酶切鉴定、PCR鉴定及序列分析 ;利用高保真 Taq酶自重组质粒 p MD18- T/ NGF中扩增目的基因NGF,将目的基因与真核表达载体 p EGFP- N1行双酶切 ,T4连接酶连接 ,转化大肠杆菌 DH- 5 α,挑选白色菌落行酶切鉴定。结果 p MD18- T/ NGF测序结果与 Gen Bank的序列完全一致 ,p EGFP- NGF行限制性内切酶 H ind 、Bam H 酶切 ,可见酶切片断与插入基因长度相符。结论 成功从大鼠脑组织中克隆神经生长因子 (NGF) β亚基前体的全长序列 ,并构建其真核表达载体 p EGFP- NGF,为从分子水平开展 NGF转基因相关研究奠定了基础。 丁鹏 冯忠堂 王廷华 董坚 杨志敏 路华 路钢关键词:NGF 真核表达载体 神经生长因子 EGFP 酶切 目的基因 脑卒中发生机理与临床救治新技术 2015年 我国第三次国民死因调查显示,脑卒中已成为第一位致死病因,严重威胁国民生命和生活质量。目前,脑卒中发病机理不清,缺乏有效的早期诊断与病情评估手段,治疗技术要求高,围绕上述问题,本项目进行了20余年系统性研究,取得创新性成果。 费舟 潘伟生 章翔 贵国柱 李兵 路钢 蒋晓帆 郭庆东 李侠 张磊 张磊 吴志萍 姬西团 高大宽 付洛安关键词:脑卒中 救治 生活质量 发病机理 黄芩苷对脑缺血-再灌注小鼠纹状体Bax和Bcl-2蛋白表达影响 被引量:4 2010年 目的探讨黄芩苷对脑缺血-再灌注损伤小鼠脑纹状体神经细胞的Bax/Bcl-2表达水平的影响.方法昆明小鼠30只,随机分为假手术组(n=10)、再灌注组(n=10)及黄芩苷组(n=10).夹闭小鼠颈总动脉方式建立脑缺血模型,免疫蛋白印记法检测Bax和Bcl-2表达及其比值变化.结果在脑缺血-再灌注损伤4d后,Bcl-2与Bax表达都上调,黄芩苷预处理可以下调小鼠脑组织纹状体区神经细胞Bax的表达水平,降低Bax/Bcl-2比值(P<0.05).结论黄芩苷能够下调Bax/Bcl-2的比值,可能对脑缺血-再灌注损伤具有抗神经元凋亡保护的作用. 李园园 路钢 曾晓峰 杨晖关键词:黄芩苷 脑缺血-再灌注 BAX BCL-2 GCSF治疗脑出血大鼠的行为学观测 被引量:2 2008年 目的(1)观测脑出血大鼠经粒细胞集落刺激因子(GCSF)治疗后的行为学变化,为GCSF治疗脑出血提供行为学支持;(2)验证神经行为学实验Cylinder Test和Narrow-alley Corner Test对神经功能损伤/恢复检测的适用性.方法30只SD大鼠分为三组.GCSF组:10只,先制成脑出血模型,然后给予GCSF治疗;SALINE组:10只,先制成脑出血模型,然后给予生理盐水作为安慰治疗;SHAM组:10只,仅按脑出血模型制作过程施予假手术,不给予其它干预.手术后第1、3、7、11、15天用神经行为学实验Rotarod Test、Cylinder Test和Narrow-alley Corner Test检测三组大鼠的行为学变化,比较结果的异同.结果(1)Rotarod test:手术后第1、3天三组大鼠的运动功能均明显下降,术后第7天开始,GCSF治疗组和SHAM组大鼠运动功能逐渐恢复,第7天时与安慰治疗组(SALINE组)相比差别具有统计学意义(P<0.05),第11天时已恢复至接近手术前的水平.而安慰治疗组运动功能一直处于较低水平;(2)Cylinder Test:SHAM组术后第1天不对称分值(对侧前肢使用率)稍有下降,之后恢复至正常水平;ICH大鼠术后1~7 d不对称分值明显下降(P<0.05),第11天后恢复至正常水平;GCSF组与SALINE组不对称分值无显著性差异;(3)Narrow-alley Corner Test:术后第1天GCSF组大鼠和SALINE组大鼠呈现了高度的不对称分值,之后不对称分值随时间逐渐降低,但恢复缓慢,至第15天时仍未达到正常水平(P<0.05);GCSF组大鼠不对称分值比SALINE组大鼠一直略低,但差别无统计学意义.结论(1)Rotarod Test结果显示GCSF治疗对ICH大鼠早期运动功能康复有促进作用;(2)Cylinder Test能敏感地检测出ICH鼠随时间的神经功能恢复;(3)Narrow-alley Corner Test对神经功能损伤的检测较敏感. 陈绍春 潘伟生 冯曜宇 路钢 冯忠堂关键词:脑出血 SD大鼠 粒细胞集落刺激因子 行为学 四氯化碳致急性肝损伤后部分肝切除大鼠模型初探 被引量:2 2009年 目的建立与临床接近可用于研究病变肝切除后肝再生的急性肝损伤大鼠模型.方法雄性SD大鼠35只.对7只正常大鼠肝脏进行精细解剖,观测其分叶及各叶的比重.其余大鼠平均随机分为4组(每组7只):四氯化碳损伤+35%肝切除组、四氯化碳损伤+65%肝切除组、四氯化碳损伤+80%肝切除组及正常对照组.造模后记录各组术后1d的存活率,存活鼠第3天、第7天经眼眶采血检测肝功(ALT、AST、ALB、TB),麻醉、灌注后取肝组织作组织学观察.结果(1)大鼠肝/体重比为(4.50±0.76)%,可分为7叶,各叶及其占肝的比重分别为:左外叶(36.25±2.96)%;左中叶(9.63±1.30)%;中叶(20.00±1.31)%;右叶(16.13±2.80)%;尾状叶(6.38±1.19)%;前乳头状叶(5.00±0.71)%;后乳头状叶(6.80±2.17)%;(2)依切除范围由低到高各组术后1d的存活率分别为:100%,42.9%,0%;(3)术后3d、7d模型组肝功明显下降,组织学呈急性肝损伤表现.结论四氯化碳急性肝损伤并35%肝切除大鼠模型成功率高,可作为变肝切除后再生的动物模型. 冯曜宇 路钢 金辉 韩胜斌 赵凌峰 陈绍春关键词:四氯化碳 肝部分切除术 动物模型 MCP-1/CCR2通路参与骨髓基质细胞向脊髓全横断损伤区迁移的实验研究 被引量:6 2008年 【目的】探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体CCR2在骨髓基质细胞(MSC)体内、外迁移中的作用。【方法】体外培养、纯化大鼠MSC,取第五代MSC行免疫荧光鉴定;免疫组化、RT-PCR检测纯化MSC表达CCR2情况;Boyden小室法检测趋化因子MCP-1(5~500ng/mL)对MSC的趋化迁移作用及其特异性。42只成年大鼠用于体内研究(脊髓全横断组24只,假手术组9只,正常大鼠9只),分别于术后1,3,7,14d取材,行免疫组化检测MCP-1表达,或行MCP-1的Real-timePCR定量分析,或颈内静脉注射荧光标记的MSC,观察MSC向脊髓迁移情况。【结果】第5代MSC都表达间充质干细胞标记物Vimentin、Laminin及Fibronectin;细胞免疫荧光、RT-PCR证实MSC表达趋化因子受体CCR2;MCP-1(5~500ng/mL)体外可趋化MSC迁移(P﹤0.05),抗MCP-1抗体可对抗其趋化迁移作用(P﹤0.05)。脊髓全横断组、对照组脊髓均表达MCP-1,但细胞分布、染色存在差异,影响MCP-1定量。脊髓损伤后趋化因子MCP-1RNA在1d、3d及7d较对正常对照组差异有统计学意义(P<0.05),术后14d时MCP-1RNA与正常对照相比差异无统计学意义(P>0.05),伴随其变化,脊髓损伤区迁移MSC较对照差异有统计学意义(P﹤0.05)。【结论】MCP-1体内、外可趋化MSC迁移,MCP-1/CCR2通路参与MSC向脊髓全横断损伤区的迁移。 丁鹏 路钢 杨智勇 王进昆 余化霖 薛黎萍 李园园 冯忠堂 林荣安关键词:骨髓基质细胞 趋化因子 迁移 脊髓损伤 神经行为学实验Narrow-Alley Test及Corner Test改良:Narrow-Alley Corner Test 被引量:8 2007年 目的改良传统的Narrow-alley Test及Corner Test,增强实验的可操作性和结果的可靠性。方法用Narrow-alley Test、Corner Test及改良后的Narrow-alley Corner Test检测三组SD大鼠:脑出血+GCSF治疗组;脑出血+生理盐水安慰治疗组;正常对照组。结果(1)与Narrow-alley Test及Corner Test结果一致,正常大鼠在Narrow-alleyCorner Test实验装置中向左、向右"站立转身"的几率接近,而脑损伤大鼠则趋向沿损伤同侧作"站立转身"。(2)Narrow-alley Corner Test不须反复刺激大鼠,减少了人在实验现场对动物活动的影响,增强了实验的可操作性和结果的可信度。结论Narrow-alley Corner Test是一种可操作性强、结果可靠的神经行为学检测方法。 陈绍春 潘伟生 李明 路钢 冯忠堂 李圆圆关键词:神经行为学