李宝金
- 作品数：48 被引量：214H指数：10
- 供职机构：广州市第八人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 声诺维(Sono Vue)增强超声辐照对HepG2细胞膜通透性的影响被引量：17
- 2005年
- 目的 探讨超声辐照对人肝癌细胞株HepG2 细胞通透性的影响以及声学造影剂声诺维(SonoVue)的增强作用。方法 用连续多普勒超声辐照人肝癌细胞株HepG2,超声发射频率1.9 MHz,软组织热指数(TIS)为0.8,增益设定为80%,输出声强(ⅠSATA)为80.0 mW/cm2,辐照时间均持续60 s。照射时添加或不添加超声造影剂声诺维(SonoVue)。用流式细胞仪检测细胞荧光染色阳性的阳性率。结果 荧光染色阳性细胞的百分率:无超声辐照组或单纯添加SonoVue组分别为(3.06±1.57)%和(1.4±0.04)%,经超声辐照后为(23.72±14.4)%,添加SonoVue辐照后显著增加至(54.78±43.6)%(均P<0.05)。结论 超声辐照能改变HepG2细胞膜通透性,添加超声造影剂后能显著增强这种作用,有希望成为肿瘤分子生物学治疗的介导手段。
- 岳殿超徐辉雄吕明德汤庆李宝金向邦德
- 关键词：空化效应膜通透性
- 封闭式引流对艾滋病患者创面组织Bax和Bcl-2蛋白表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究封闭式负压引流术(VAC)治疗艾滋病病人感染创面的Bax和Bcl-2蛋白变化。方法 40例艾滋病人分为VAC治疗组和对照组,对照组感染创面采用常规换药治疗方法,VAC治疗组感染创面采用VAC治疗方法。观察两组病人创面治疗效果,免疫组化检测感染创面细胞的Bax和Bcl-2蛋白表达。结果 VAC治疗的病人创面愈合效果优于普通换药的病人,其中显效17例,有效2例,1例无效;对照组显效3例,有效14例,3例无效,两组有效病例差异具有统计学意义。两组患者治疗前Bcl-2蛋白阳性的细胞数接近(P>0.05),其干预治疗后第3、7、14天为6±1.5/HP、10±2.3/HP、14±2.7/HP、15±3.2/HP,高于对照组的5±1.2/HP,6±2.1/HP,6±1.8/HP,7±0.9/HP。同样,两组患者治疗前的Bax蛋白阳性细胞数比较无统计学差异,但第3、7、14天,VAC治疗组感染创面Bax蛋白阳性的细胞数分别14±3.2/HP,13±3.5/HP,10±3.1/HP,5±1.2/HP,均显著低于对照组病人的13±2.8/HP、12±3.2/HP、11±3.1/HP、10±2.5/HP(P<0.05)。结论VAC能够促进艾滋病感染创面的愈合,其机制可能与下调Bax和Bcl-2蛋白表达抑制细胞凋亡有关。
- 朱郇荣钟活麟李宝金胡波涌孙宇
- 关键词：艾滋病封闭式负压引流术BAX蛋白BCL-2蛋白
- 腺病毒介导的KDR启动子-胸苷激酶系统对血管内皮细胞旁观者效应的实验研究被引量：1
- 2006年
- 目的:研究腺病毒介导的血管内皮因子受体(KDR)启动子-胸苷激酶系统对血管内皮细胞的旁观者效应。方法:采用新型腺病毒载体AdEasy系统,构建由KDR启动子调控的、腺病毒介导的、单纯疱疹病毒胸苷酸激酶基因系统(AdK- DR-HSV-tk),在人胚胎肾细胞系293细胞中包装、扩增后,体外感染表达KDR的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),建立HUVEC/tk转化细胞株。观察丙氧鸟苷((GCV)对HUVEC、HUVEC／tk细胞的存活率及旁观者效应。结果:从病毒滴度及PCR检查,证实tk基因随病毒的感染已成功地导入293细胞及HUVEC细胞。HUVEC／tk细胞对丙氧鸟苷的敏感性显著高于亲代HUVEC细胞。HUVEC／tk及HUVEC+HUVEC／tk混合细胞还随丙氧鸟苷浓度的增加受到明显的抑制。HUVEC+HUVEC／tk混合细胞的存活率,随HUVEC／tk细胞比例的增加而降低,说明腺病毒介导的KDR启动子-单纯疱疹病毒胸苷激酶／丙氧鸟苷系统不但能杀伤tk+细胞,也能杀伤未导入tk的细胞,存在明显的旁观者效应。结论:腺病毒介导的KDR启动子单纯疱疹病毒胸苷激酶／丙氧鸟苷系统对血管内皮细胞具有明显的杀伤及旁观者效应。
- 朱欠元李宝金郭剑毛慕华
- 关键词：KDR启动子单纯疱疹病毒胸苷激酶旁观者效应血管内皮
- KDR启动子介导胸苷激酶体外靶向杀伤血管内皮细胞
- 2007年
- 目的构建含以KDR为启动子的HSV-tk重组腺病毒,体外评估其对血管内皮细胞的特异性杀伤效能。方法采用pAdeasy系统,构建受KDR启动子或巨细胞病毒(CMV)启动子调控并可表达HSV-tk基因的AdKDR-tk和AdCMV-tk,在293细胞中包装、扩增后,体外分别感染表达KDR的人脐静脉血管内皮细胞系(HUVEC)和不表达KDR的肝癌细胞系HepG2,用丙氧鸟苷(GCV)处理受染细胞,并以MTT法检测其细胞增殖情况。结果病毒滴度均为1×1010pfu/mL。在感染复数(MOI)为100的条件下,当细胞培养液中加入的GCV浓度由0增至50μg/mL时,感染含AdKDR-tk的HUVEC细胞和HepG2细胞其存活率由100%分别下降至(28.94±5.67)%和(75.45±2.91)%(P<0.01),而感染含AdCMV-tk的HUVEC细胞和HepG2细胞其存活率分别下降至(17.56±2.48)%和(23.15±5.72)%(P>0.05)。结论KDR启动子介导的HSV-tk具有特异性杀伤血管内皮细胞的作用。
- 李宝金张超宁长青伊远学郝颖刘晓平区庆嘉
- 关键词：内皮血管KDR启动子胸苷激酶
- 右美托咪定复合地佐辛用于肝癌切除术后PCIA对机体细胞免疫功能的影响被引量：13
- 2017年
- 目的:探讨右美托咪定复合地佐辛用于肝癌切除术后病人自控静脉镇痛(PCIA)对机体细胞免疫功能的影响。方法:将120例拟行肝癌切除术患者采用随机数字表法分为两组,复合组给予地佐辛1.0 mg·kg^(-1)+右美托咪定1.0μg·kg^(-1),对照组给予地佐辛1.0mg·kg^(-1)。分别于麻醉诱导前(T0)、气管导管拔除即刻(T1)以及术后12 h(T2)、24 h(T3)、48 h(T4)、72 h(T5)对患者进行疼痛VAS评分,测定外周血中CD3^+、CD4^+、CD8^+淋巴细胞亚群及NK细胞水平。结果:术后12~72 h复合组各个时点VAS均明显低于对照组(均P<0.001)。与T0相比,复合组T1、T2时点CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+及NK细胞水平均明显下降(均P<0.05),T3时点CD3^+和NK细胞水平明显下降(均P<0.05)。组间比较:T2时点复合组CD3^+、CD4^+及NK细胞水平均明显高于对照组(P<0.05),T3时点复合组CD3^+和NK细胞水平明显高于对照组(P<0.05),T4时点复合组CD3^+水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:右美托咪定复合地佐辛用于肝癌切除术PCIA效果更好,可以改善患者细胞免疫功能。
- 徐敏李宝金徐莉况时龙
- 关键词：地佐辛
- T-bet和c-FLIP双基因共表达质粒的构建及生物学活性检测被引量：1
- 2008年
- 目的构建携带T-bet和c-FLIP双基因的真核表达载体及检测其生物学活性。方法采用RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞的总RNA中扩增出T-bet和c-FLIPcDNA,利用pIRES和pEGFP-C1,构建T-bet和c-FLIP双基因真核表达载体pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP。采用非脂质体的脂质型介导载体将pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP转染至外周血淋巴细胞,观察T-bet和c-FLIP在外周血淋巴细胞中的表达,并检测其诱导淋巴细胞的抗凋亡作用及Th1/Th2细胞偏移。结果成功构建pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP质粒,运用非脂质体的脂质型介导载体将该质粒转染淋巴细胞,其转染率为34.6%。流式细胞仪分析未经pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP预处理的淋巴细胞在CH-11作用24h后,细胞的凋亡率分别为(50.12±8.02)%;经pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP预处理1d的淋巴细胞,其细胞凋亡率分别下降到(5.73±0.37)%;双基因表达的淋巴细胞的Th1型细胞因子IFN-γ表达水平明显高于空载体表达的淋巴细胞及未经处理的淋巴细胞组(P<0.01),且Th2型细胞因子IL-4表达水平较空载体表达的淋巴细胞及未经处理的淋巴细胞低(P<0.01),差异有统计学意义。结论转染T-bet和c-FLIP共表达基因后的T淋巴细胞可产生抗凋亡作用及向Th1细胞分化。
- 伊远学李宝金刘晓平张超张维冯子毅冷希圣
- 关键词：T-BET基因PEGFP-C1生物学活性共表达
- 胃肠道间质瘤临床诊治及病理分析13例报道
- 2005年
- 目的探讨胃肠道间质瘤诊治中若干临床问题.方法回顾分析2000年3月至2005年3月确诊的13例胃肠道间质瘤的临床和病理资料.结果患者主要临床表现为消化道出血和腹部胀痛、不适.其中,病变部位胃部8例、小肠5例.病理示恶性3例(23.1%)、良性6例(46.2%)、潜在恶性4例(30.7%).免疫组化结果11例CD117(+)、10例CD34(+)、2例CD117(-)/CD34(+)、3例CD34(-)/CD117(+).13例均手术切除,其中胃大部切除6例、胃肿瘤摘除2例、小肠肠段切除5例.随访1个月～5年,平均生存期3.6年.结论胃肠道间质瘤临床表现无特异性,应注意鉴别其良恶性,病理检查是确诊的依据,手术切除后放化疗效果均不理想.
- 冯子毅刘晓平李宝金
- 抗凝祛聚法在选择性贲门周围血管离断术后预防门静脉血栓形成中的临床应用被引量：1
- 2011年
- 目的:评价分析抗凝祛聚法在选择性贲门周围血管离断术后预防门静脉血栓形成中的临床疗效及安全性。方法:将我院2006年5月—2010年5月因肝炎后肝硬化门静脉高压症拟施行选择性贲门周围血管离断术的88例患者随机分为2组:抗凝组47例(早期使用抗凝祛聚法)与非抗凝组41例(同期常规使用药物组)进行对比分析,并利用彩色多普勒超声监测门静脉血栓形成情况。结果:88例患者均随访6个月以上,抗凝组术后门静脉血栓发生率为4.2%(2/47),明显低于非抗凝组的14.6%(6/41),差异有统计学意义(χ2=3.38,P<0.05)。术后1周2组间血小板(PLT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶原时间(APPT)、纤维蛋白原(FIB)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:选择性贲门周围血管离断术后早期抗凝祛聚治疗能安全有效地降低门静脉血栓的发生率。
- 赵辉李宝金龙宏刚姜海平
- 关键词：选择性贲门周围血管离断术门静脉血栓形成
- 微囊化腺病毒介导的Bcl-2基因转染对缺血再灌注损伤肠黏膜的保护作用
- 2010年
- 目的研究微囊化重组腺病毒AdCMV/Bcl-2转染对缺血再灌注损伤肠黏膜的保护作用及其机制。方法利用气体雾化技术将携带Bcl-2基因的复制缺陷型重组腺病毒AdCMV/Bcl-2微囊化,检测其在人工胃、肠液中的融出率;将等量的重组腺病毒通过静脉注射、腹腔注射与口服微囊3种转染途径转染大鼠,应用RT-PCR和Western blot方法检测目的基因Bcl-2在小肠中的表达,并检测各组大鼠伤后血浆内毒素、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸含量和肠上皮细胞凋亡数量的变化。结果制备的微囊在人工胃液中仅有少量崩解,而在肠液中40min崩解融出率即达到(57.2±3.9)%,肠溶性良好;AdCMV/Bcl-2转染后48h大鼠肠黏膜Bcl-2基因的表达显著增强,其中,口服微囊组Bcl-2表达最强;AdCMV/Bcl-2转染使大鼠肠上皮细胞凋亡减少,伤后血浆D-乳酸、DAO及内毒素水平显著降低(P<0.01)。结论复制缺陷型重组腺病毒微囊化可保护其免受胃液损伤,并在肠道中被释放吸收。AdCMV/Bcl-2转染提高肠黏膜组织Bcl-2的表达在缺血再灌注损伤过程中可显著保护肠黏膜屏障功能。
- 伊远学刘晓平李宝金张超冷希圣刘筑罗效梅杨瑞兵
- 关键词：缺血再灌注损伤基因转染微囊腺病毒载体
- 转人B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测被引量：2
- 2007年
- 目的探讨转入B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测。方法采用脂质体介导法将已建好的真核表达质粒pEGFP-C1-B7-H3导入人鳞癌细胞Tca8113中(Tca8113/B7-H3),RT-PCR检测B7-H3在该细胞中的表达,Western blot检测其蛋白的表达。经G418筛选后,用有限稀释法建立稳定高表达的带有B7-H3基因的Tca8113鳞癌细胞株。结果RT-PCR方法检测到目的基因B7-H3的一个215bp大小的cDNA扩增产物;DAB显色,裂解的Tca8113/B7-H3基因转染细胞膜蛋白中相对分子质量约65～86ku大小的特异性条带。转染B7-H3的Tca8113细胞,经过细胞传代培养后仍然能够检测到高表达的B7-H3基因,经过有限稀释法建立了Tca8113/B7-H3细胞株。结论成功建立了Tca8113/B7-H3细胞株,为以后的体内外试验提供了很好的平台,为近一步研究其抗肿瘤作用奠定了基础。
- 邹多宏郝艳红周健杨宏宇何家才王元银阎旭李宝金唐爱发
- 关键词：细胞系
