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泛素连接酶MuRF2通过抑制线粒体自噬减轻心肌细胞缺氧损伤: 2024年; 目的探讨泛素连接酶肌肉环指状蛋白2(muscle ring finger protein 2,MuRF2)对缺氧心肌细胞活力和自噬的调控作用。方法构建大鼠源MuRF2基因过表达和敲减慢病毒载体,分别感染大鼠心肌细胞H9C2。将H9C2细胞分为阴性对照组(NC)、阳性对照组[MuRF2过表达空载体组(LV-Vector)、MuRF2敲减空载体组(LV-RNAi-Vector)]、Mu RF2过表达组(LV-MuRF2)和MuRF2敲减组(LV-RNAi-MuRF2),缺氧培养(5%CO_(2)、1%O_(2)、94%N_(2))后,采用CCK-8法和ELISA法检测心肌细胞损伤水平,利用透射电子显微镜检测心肌细胞超微结构和自噬水平变化,采用Western blot测定自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和P62的表达水平。结果与对照组相比,缺氧组心肌细胞间隙增大、细胞皱缩、多见漂浮的死亡细胞和细胞碎片,心肌细胞活力下降、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量增加(P均<0.05);电子显微镜下可观察到部分线粒体发生肿胀,并存在嵴断裂、嵴溶解现象,自噬小体散在胞质内;缺氧组LC3-Ⅱ蛋白表达水平升高,P62蛋白表达水平降低(P均<0.05)。缺氧培养后,与NC组和LV-Vector组相比,LV-MuRF2组细胞活力增加,偶见自噬小体,LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低、P62蛋白表达水平增高(P均<0.05);与NC组和LV-RNAi-Vector组相比,LV-RNAi-MuRF2组细胞活力降低,可见大量自噬小体,LC3-Ⅱ蛋白表达水平升高、P62蛋白表达水平降低(P均<0.05)。结论泛素连接酶MuRF2可减轻缺氧所致的心肌细胞损伤,其机制可能与抑制心肌细胞线粒体自噬有关。; 孙美琪张瑜徐方晶方克宝王一帆朱力何军; 关键词：泛素连接酶心肌细胞缺氧

NDUFS6蛋白生物信息学分析及过表达质粒的构建与鉴定: 2024年; 目的应用生物信息学方法分析线粒体呼吸链复合体Ⅰ结构亚基烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(泛素)铁硫蛋白6(NDUFS6)的理化性质,构建pCV702-NDUFS6过表达质粒并进行鉴定,为进一步研究NDUFS6蛋白功能奠定基础。方法利用Expasy、UniProtKB、NCBI、SOPMA等生物信息学工具分析NDUFS6蛋白的理化性质、二级结构等;根据NDUFS6 cDNA序列构建携带NDUFS6基因的过表达质粒pCV702-NDUFS6,转染大鼠心肌细胞H9C2,并设置阴性对照(NC)组和相应空载体CON520作为阳性对照(PC)组,经嘌呤霉素筛选后,采用RT-qPCR和Western blot检测NDUFS6 mRNA和蛋白表达水平。结果 NDUFS6蛋白由116个氨基酸组成,理论等电点pI为9.37。蛋白二级结构以无规则卷曲(占50%)为主。酶切鉴定和基因测序结果显示,pCV702-NDUFS6表达质粒构建成功。RT-qPCR和Western blot结果显示,相较于NC组和PC组,过表达组NDUFS6表达水平均上调(P均<0.05)。结论成功构建了能在心肌细胞H9C2中有效过表达NDUFS6基因的过表达质粒。; 张瑜孙美琪徐方晶王洁方克宝王一帆何军; 关键词：生物信息学分析质粒构建

^(131)I标记多肽K237的最佳条件及标记肽的体外生物活性被引量：1: 2013年; 目的探索131I标记多肽K237,获得放射化学纯度高于95%的131I-K237的最佳条件,研究标记产物的体外稳定性及生物学活性。方法应用Iodogen法对K237进行131I标记,采用正交实验筛选最佳标记条件。用高效液相色谱仪(HPLC)联合薄层层析法(TLC)测定标记率及放射化学纯度,SephadexG25层析柱分离纯化131I-K237。将分离纯化的131I-K237(放射化学纯度大于95%)分别放置于室温及37℃水浴箱,于不同时间测定其放射化学纯度以观察其稳定性。应用cck-8法进行人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖抑制实验,分别计算K237及131I-K237对HUVEC的抑制率,判定131I-K237的生物活性。结果最佳标记条件中,K237100μg与Iodogen 50μg,在37℃条件下反应时间40 min,标记率可达70%以上。稳定性实验结果表明,131I-K237在体外放置24 h后,其放射化学纯度>90%。131I-K237和K237对HUVEC细胞增殖的抑制率差异无统计学意义(P>0.05),说明K237被131I标记后,其生物学活性未改变。结论 Iodogen法131I标记多肽K237简单高效,标记产物的生物活性得到保留,未受明显破坏。; 张瑜李娟万强张伟; 关键词：131I标记高效液相

“醒脑调腑”针刺法治疗中风后失眠的临床疗效评价研究: 目的：观察“醒脑调腑”针刺法与普通针刺法、口服西药艾司唑仑治疗中风后失眠的临床疗效差异。　　方法：将符合本试验中西医诊断、纳入标准的120例中风后失眠患者，按随机分组原则分为A组（“醒脑调腑”组）、B组（普通针刺组）和C...; 张瑜; 关键词：中风后失眠针刺治疗临床疗效; 文献传递

131I-K237的制备及在体外对前列腺癌细胞影响的实验研究: 目的:探索131I标记多肽K237,获得放射化学纯度高于95％的131I-K237的最佳条件,研究标记产物的体外稳定性及生物学活性。研究鉴定131I-K237对前列腺癌LNCaP细胞的体外治疗作用。　　方法:应用Iodo...; 张瑜; 关键词：131I标记前列腺肿瘤; 文献传递

一种蜡样芽孢杆菌的培养方法及其专用培养基: 本发明公开了一种蜡样芽孢杆菌的培养方法及其专用培养基。培养基由葡萄糖、胰蛋白胨、KH2PO4和水组成。培养基中，葡萄糖、胰蛋白胨、KH2PO4<...; 张新慧张晓佳张文晋郎多勇张瑜周丽高晓娟余建强付雪艳; 文献传递

短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)的发酵方法: 本发明公开了短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)的发酵方法。本发明提供的短小芽孢杆菌的发酵方法包括将短小芽孢杆菌接种至pH为7‑9的培养基中，得到发酵前液；将发酵前液在发酵温度为26‑34℃和转速为170‑2...; 张新慧张晓佳张文晋郎多勇余霞霞张瑜吴秀丽余建强付雪艳; 文献传递

“醒脑安神调补肝肾”针刺法治疗绝经期综合征选穴应用: 2020年; "醒脑安神调补肝肾"针刺法主穴选择:小醒脑(内关、印堂、三阴交)、四神聪、神门、关元、肾俞、肝俞、太溪、足三里、太冲。辨证配穴:肝肾阴虚加阴谷、照海;脾肾阳虚加命门、腰阳关、脾俞;辨病配穴:失眠配申脉、照海;精神不振、烦躁不安配大陵;潮热盗汗配合谷、复溜;头晕耳鸣配百会、风池、听会;大便溏薄配天枢、阴陵泉;浮肿配水分等。失眠、潮热汗出、情绪改变是绝经期阶段最显著的症状。"醒脑安神调补肝肾"针刺法重在醒脑安神,调补肝肾,调节机体阴阳平衡。; 季德江张晓静冶尕西任文静张瑜张萍艳; 关键词：绝经期综合征印堂穴四神聪穴神门穴肝俞穴

刺络拔罐法治疗瘢痕疙瘩的临床应用被引量：3: 2019年; 瘢痕疙瘩是皮肤科常见病、多发病之一.目前临床针对瘢痕疙瘩的治疗方法有手术、放射疗法、冷冻等.容易对患者造成二次伤害,且特别不适合严重瘢痕体质的患者。刺络拔罐疗法广泛应用于中医外科疾病的治疗,尤其对瘢痕疙瘩的治疗具有独到优势,可在临床推广使用。; 季德江冶尕西关淑婷张瑜任文静张萍艳; 关键词：瘢痕疙瘩刺络拔罐

内生细菌Bacillus cereus促进甘草生长及药效成分积累的机制研究: 植物内生菌调控植物生长情况、生理生化过程和胁迫耐受性是近年来研究微生物和植物互作的研究热点。蜡样芽胞杆菌（Bacillus cereus）作为芽孢杆菌属的一类有益内生菌,参与调控植物生长情况、生理生化功能、药效成分积累、...; 张瑜; 关键词：甘草碳氮代谢药效成分

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张瑜

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