刘晓红
- 作品数：22 被引量：50H指数：4
- 供职机构：福建医科大学附属协和医院更多>>
- 发文基金：福建省教育厅资助项目福建省自然科学基金福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组脂联素对氧化损伤下内皮细胞内质网应激相关信号分子的影响
- 目的 探讨重组脂联素对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡是否存在影响,同时观察重组脂联素对内质网应激相关信号通路IRE1α-JNK的影响。方法 应用不同浓度t-BHP(25、50、1...
- 刘鲁豫王燕萍王林曦刘小莺唐莉刘晓红刘礼斌
- Exendin-4改善氧化应激减轻t-BHP诱导的HUVECs凋亡
- 2017年
- 目的探讨Exendin-4对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响。方法在原代培养的HUVECs中,采用t-BHP(100μmol/L)干预4h,加用或不加用Exendin-4(100nmol/L)预处理细胞24h,分为:对照组(A组)、t-BHP处理组(B组)、Exendin-4处理组(C组)及Exendin-4+t-BHP组(D组)。应用MTT比色法检测细胞存活率,DAPI染色荧光显微镜观察细胞凋亡率,活性氧(ROS)检测试剂盒检测ROS的产生。结果与A组比较,100μmol/L t-BHP作用4 h,B组的HUVECs存活率下降40%(P<0.001);DAPI染色荧光显微镜观察证实,t-BHP可以诱导HUVECs凋亡;加用Exendin-4预处理细胞24h,D组的HUVECs存活率较B组增高(P<0.01)。DAPI染色荧光显微镜观察细胞凋亡率提示,与B组比较,Exendin-4预处理可使D组的细胞凋亡率减少44%(P<0.05),并减少ROS的产生(P<0.05)。结论 t-BHP能够诱导HUVECs凋亡,Exendin-4可减少t-BHP诱导的HUVECs凋亡。
- 吴莉王林曦刘小莺刘晓红陈洲刘礼斌
- 关键词：肽类氧化性应激
- 肥胖和糖尿病脂肪组织visfatin基因的表达与胰岛素敏感性的关系被引量：2
- 2009年
- 目的测定肥胖症及糖尿病患者血浆脂肪因子visfatin水平、内脏及皮下脂肪组织visfatin mRNA的表达,探讨visfatin与胰岛素敏感性的相关性。方法设定正常体质量对照组(11例)、肥胖组(10例)及2型糖尿病组(8例),应用荧光实时定量PCR法检测皮下及内脏脂肪组织visfatin mRNA的表达,酶免疫分析法测定血浆visfatin浓度,HOMA-IR评估胰岛素敏感性,分析visfatin与人体测量指标和代谢指标的相关性。结果(1)3组的血浆visfatin浓度比较差别无统计学意义;(2)3组皮下脂肪组织visfatin mRNA表达量相似;(3)对照组与肥胖症组内脏脂肪组织visfatin mRNA相对表达量相似,明显高于皮下脂肪组织;糖尿病组内脏脂肪组织visfatin mRNA相对表达量明显减低;(4)皮下脂肪组织visfatin mRNA表达量与空腹血糖、糖基化血红蛋白呈显著负相关,内脏脂肪组织visfatin mRNA表达量与高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A1呈正相关,与空腹血糖、糖基化血红蛋白、血浆visfatin水平呈负相关,空腹血糖是皮下、内脏脂肪组织visfatin mRNA的独立相关因素;血浆visfatin水平与空腹血糖呈正相关,与血清胆固醇呈负相关,血清胆固醇是血浆visfatin水平的独立相关因素;(5)皮下、内脏脂肪组织visfatin mRNA表达量及血浆visfatin水平与胰岛素抵抗指数无相关性。结论(1)血浆visfatin浓度的测定不能做为肥胖症或糖尿病临床诊断的一个指标;(2)visfatin mRNA主要在内脏脂肪组织中表达,糖尿病患者的高血糖状态可使其表达降低;(3)visfatin与糖脂代谢有密切联系,可能与胰岛素抵抗无关。
- 江榕刘小莺刘晓红张静郑培烝刘礼斌陈晓春
- 关键词：肥胖症糖尿病细胞因子类脂肪组织
- 氧化损伤对内皮细胞内质网应激相关蛋白表达的影响被引量：7
- 2010年
- 目的:通过第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立体外氧化应激的细胞凋亡模型,观察氧化损伤对内皮细胞内质网应激(ER stress)相关蛋白表达的影响。方法:不同浓度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)诱导HUVECs 1-24 h,MTT法观察t-BHP作用后细胞的存活率;Hoechst/PI染色荧光显微镜观测细胞凋亡形态;Western blotting检测ER应激标志物肌醇需求激酶1α(IRE1α)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达情况。结果:不同浓度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)诱导HUVECs 1-24 h后,发现随着t-BHP作用浓度的增加和时间的延长,细胞活力逐渐下降;不同浓度t-BHP处理8 h后,t-BHP大于25μmol/L时,细胞凋亡率明显增加(6.3%±0.6%、16.1%±0.9%、24.7%±1.5%、23.8%±1.3%,P<0.05);ER应激相关信号蛋白IRE1α、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)及凋亡蛋白caspase-3表达增加。结论:氧化应激可导致内皮细胞发生凋亡,可能与引起内质网应激相关信号蛋白的表达有关。
- 刘鲁豫王燕萍王林曦刘小莺唐莉刘晓红刘礼斌
- 关键词：氧化性应激内质网应激细胞凋亡人脐静脉内皮细胞
- 地塞米松诱导小鼠MIN6胰岛β细胞凋亡及其对AKT磷酸化的影响被引量：2
- 2009年
- 为观察地塞米松对小鼠MIN6胰岛β细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达和AKT磷酸化的影响,选用小鼠MIN6胰岛β细胞为研究对象,用不同浓度地塞米松(50、100、200、400及800nmol·L?1)诱导刺激不同时间,观察细胞凋亡的变化。通过Hochest/PI、AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒观测细胞凋亡率;caspase-3检测试剂盒测定caspase-3含量;Westernblotting测定细胞色素c(Cyt-c)、Bcl-2、Bax、T-AKT及p-AKT的蛋白含量。结果显示:地塞米松(50～800nmol·L?1)作用48h后,可诱导β细胞凋亡;100nmol·L?1地塞米松处理72h后,caspase-3含量明显增多;不同浓度地塞米松处理48h,随着浓度的增加Cyt-c表达增多,Bax蛋白含量无明显变化,而Bcl-2蛋白含量有所降低。T-AKT表达无明显变化,p-AKT随地塞米松浓度增加表达减少。因此,地塞米松能够引起小鼠MIN6胰岛β细胞凋亡,其机制可能与抑制AKT磷酸化、下调Bcl-2表达有关。
- 王林曦王燕萍刘小莺刘亮王丽静陈闻佳刘晓红刘礼斌
- 关键词：胰岛Β细胞细胞凋亡AKT
- 氧化损伤对MIN6细胞内质网应激凋亡通路相关分子表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的：通过第三丁基过氧化氢（t-BHP）诱导小鼠胰岛β细胞凋亡,研究氧化损伤对内质网应激JNK凋亡通路相关分子表达的影响。方法：将不同浓度t-BHP（0-400μmol/L）分别加入胰岛β细胞株M IN6细胞中,于不同时间（0-8 h）收集细胞悬液进行相关检测。CCK-8法检测细胞增殖活力;An-nexin-V-PI流式细胞技术（FCM）检测细胞凋亡率及坏死率;Caspase-3检测试剂盒测定caspase-3活性;W estern b lot检测内质网应激相关分子IRE1,αJNK,P-JNK,Caspase-3蛋白的表达。结果：随t-BHP浓度的增高,①M IN6细胞的存活率降低;②t-BHP以浓度≥25μmol/L作用≥1 h时,Caspase-3活性有明显变化（P〈0.05）;③随t-BHP浓度增大、作用时间延长,内质网应激跨膜蛋白IRE1α表达逐渐减少,P-JNK、活性caspase-3表达明显增多。结论：①t-BHP引发细胞凋亡坏死呈一定的时效和量效关系;②持续t-BHP氧化损伤可诱导M IN6细胞发生内质网应激并发生凋亡;③内质网应激凋亡通路相关分子表达在细胞凋亡过程中有浓度和时间依赖性。
- 陈闻佳刘小莺王林曦王燕萍刘晓红刘礼斌
- 关键词：胰岛Β细胞内质网应激
- 氧化应激诱导内皮细胞凋亡与PI3k/Akt-Bcl-2通路的关系被引量：8
- 2011年
- 目的:探讨氧化应激诱导人脐静脉内皮细胞凋亡与细胞存活信号通路PI3k/Akt-Bcl-2的关系。方法:不同浓度(0、50、100、200、400、800μmol/L)第三丁基过氧化氢(t-BHP)处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC)1～4 h,MTT法检测内皮细胞生存率,Hoechst/PI双染色荧光显微镜观察细胞凋亡率。再选用最佳t-BHP浓度(100μmol/L)干预HUVEC不同时间(0、0.5、1、2、4、6 h),Western blot测Akt、p-Akt、Bcl-2以及caspase-3在各时间点的表达情况。结果:MTT显示随着t-BHP作用浓度的增加和时间的延长,HUVEC生存率逐渐下降,并呈现一定的量效和时效关系;Hoechst/PI染色荧光显微镜观察证实t-BHP能够诱导HUVEC发生凋亡。t-BHP浓度在50～200μmol/L时,随着其作用浓度的增加细胞凋亡率明显增加(8.2%±0.3%、37.2%±0.3%、55.6%±0.2%,P<0.05),大于200μmol/L凋亡率反而下降(44.9%±0.2%、36.8%±0.4%,P<0.05);Western blot结果显示caspase-3的活化片段在4 h表达量最高。p-Akt在30 min时表达达高峰,随后降低。Bcl-2表达呈现递减的趋势。结论:t-BHP诱导caspase依赖的HUVEC凋亡,这一病理过程与p-Akt的迅速减少和Bcl-2的减少有关。
- 唐莉刘小莺王林曦王燕萍吴莉刘晓红刘礼斌
- 关键词：人脐静脉内皮细胞凋亡AKTBCL-2
- 第三丁基过氧化氢诱导MIN6细胞损伤被引量：5
- 2007年
- 目的通过第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导小鼠胰腺β细胞,模拟体外氧化应激的细胞模型,观察氧化损伤对β细胞生长的影响。方法体外培养小鼠β细胞株MIN6,MTT法测定细胞存活率,AO-EB荧光显微镜观测,Annexin-Ⅴ-PI染色流式细胞技术定量定性分析细胞凋亡率及坏死率。结果MTT显示,t-BHP(12.5～200μmol/L)作用不同时间后可明显抑制MIN6细胞的生长,并呈现一定的时效和量效关系;AO-EB荧光显微镜及Annexin-Ⅴ-PI流式细胞检测证实,25μmol/L浓度的t-BHP诱导β细胞的损伤作用以凋亡为主,而更高浓度的t-BHP使细胞由凋亡转向坏死。结论t-BHP可用于体外模拟β细胞氧化应激损伤的模型。
- 林益川王燕萍刘晓红刘礼斌陈洲
- 关键词：胰岛细胞凋亡氧化性应激
- 吡格列酮对波动性高糖处理的人脐静脉内皮细胞脂联素受体表达的影响被引量：9
- 2008年
- 目的探讨吡格列酮对波动性高糖处理的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)脂联素受体(AdipoR1和AdipoR2)表达的影响。方法将HUVEC在波动性高糖培养液(5.5、20mmol.L-1每隔8h轮换1次)中培养5d后,随机分为阴性对照组、吡格列酮处理组(10、1与0.1μmol.L-1)和阳性对照组。应用实时定量PCR方法检测脂联素受体mRNA表达的改变。结果与波动性高糖组比较,吡格列酮处理后HU-VECAdipoR1表达增高。当吡格列酮浓度增至1μmol.L-1以上时,AdipoR1mRNA表达增加呈现差异。各组细胞Adi-poR2表达量间差别无显著性。
- 郑敏刘小莺刘晓红郑培烝刘礼斌
- 关键词：吡格列酮波动性高糖人脐静脉内皮细胞脂联素受体实时定量PCR
- 糖皮质激素对3T3-L1脂肪细胞PI-3K、p38 MAPK磷酸化的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:观察地塞米松对3T3-L1脂肪细胞糖转运活动的影响,及介导糖转运的胰岛素信号通路PI-3K/AKT、p38 MAPK途径在其中的作用,探讨糖皮质激素诱导脂肪细胞胰岛素抵抗的可能机制。方法:将3T3-L1脂肪细胞与1μmol/L地塞米松共孵育48 h,加或不加100 nmol/L胰岛素继续温育30min。以葡萄糖氧化酶法测定3T3-L1脂肪细胞中糖转运活动,以Western blotting测定3T3-L1脂肪细胞Glut4的表达及分布、Akt、phos-pho-Akt、p38 MAPK、phospho-p38 MAPK的蛋白表达水平。结果:地塞米松抑制3T3-L1脂肪细胞的糖转运活动。对细胞内总Glut4蛋白表达无影响,但抑制了胰岛素刺激的Glut4转位,同时抑制了胰岛素激活的Akt、p38MAPK磷酸化水平。结论:地塞米松抑制胰岛素激活的PI-3K/Akt、p38 MAPK信号途径,影响Glut4的转位及活性,下调胰岛素刺激的葡萄糖转运,并可能由此诱导胰岛素抵抗的发生。
- 王丽静刘礼斌刘晓红黄培基刘小莺林益川
- 关键词：地塞米松3T3-L1脂肪细胞信号转导
