张志文
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 供职机构：北京大学基础医学院生理学与病理生理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 内皮素反义寡聚脱氧核苷酸抑制肾小球系膜细胞增殖
- 2001年
- 目的 :应用反义寡核苷酸技术 ,对培养的人肾小球系膜细胞 (glomerularmesangialcells,GMC)进行内皮素 1(endothelin ,ET 1)基因表达的抑制试验 ,探讨ET 1基因表达与GMC增殖效应的关系。方法 :以阳离子脂质体lipofectin介导的基因转移方法 ,将前内皮素原 ppET 1的反义寡聚脱氧核苷酸 (antisenseoligodeoxynucleotide ,As ODN)及其对照序列正义寡聚脱氧核苷酸 (senseoligodeoxynucleotide ,Se ODN)、错配寡聚脱氧核苷酸 (mismatcholigodeoxynucleotide ,Mis ODN)分别导入GMC。通过生物素标记的As ODN显色反应 ,观察寡聚脱氧核苷酸的转移效果 ;用半定量反转录聚合酶链反应 (reversetranscription polymerasechainreaction ,RT PCR)检测寡核苷酸链对GMC的 ppET 1mRNA表达的影响 ;用放射免疫分析 (radioimmunoassay ,RIA)观察寡核苷酸链对GMC的ET 1蛋白分泌的作用 ;用氮蓝四唑盐 (MTT)试验分析寡核苷酸链对GMC增殖的效应。结果 :寡核苷酸链被转移入GMC。10nmol·L-1As ODN抑制了GMC的 ppET 1mRNA表达、ET 1蛋白合成和细胞增殖 (各组P <0 .0 5 )。 结论 :特异抑制GMC的 ppET 1基因表达能够抑制其增殖 ,证实GMC产生的ET 1能刺激GMC自身的增殖 ,ET 1是GMC自分泌炎症介质之一。
- 李美花谌贻璞张志文
- 关键词：寡聚脱氧核苷酸反义内皮缩血管肽类肾小球系膜系膜细胞增殖
- 内皮素反义寡核苷酸在抑制大鼠肾小球系膜细胞和系膜基质增生中的作用被引量：10
- 1999年
- 目的研究内皮素１（ＥＴ１）在体内系膜细胞和系膜基质增生中的作用。方法应用反义寡核苷酸技术，将前内皮素原的反义寡核苷酸作为ＥＴ１基因表达的特异抑制剂，同时设立正义寡核苷酸和错配寡核苷酸作为对照序列（每组３只大鼠）。（１）在大鼠抗Ｔｈｙ１１系膜增生性肾小球肾炎模型中，以阳离子脂质体介导的基因转移方法，将各种寡核苷酸链分别导入大鼠肾脏。通过生物素修饰的反义寡核苷酸显色反应，了解寡核苷酸链的体内转移效果。（２）用放射免疫分析方法分析反义、正义，错配寡核苷酸对肾小球ＥＴ１蛋白量的影响；用定量病理分析方法观察反义、正义，错配寡核苷酸对系膜细胞和系膜基质增生的作用。结果（１）寡核苷酸链能够进入肾小球系膜细胞。（２）反义寡核苷酸降低了肾小球的ＥＴ１蛋白水平［（３２±１９）ｎｇ／ｇ，对照组（１２６±２０）ｎｇ／ｇ］，抑制了系膜细胞增生［（０８２±００４）个／１００μｍ２］和系膜基质增生（１２８±１６）％，而正义和错配寡核苷酸不影响肾小球的ＥＴ１蛋白水平或系膜细胞和系膜基质的病变。结论抑制ＥＴ１基因表达能够抑制肾炎大鼠系膜细胞和系膜基质增生。
- 李美花谌贻璞张志文张志文
- 关键词：寡核苷酸类肾小球肾炎内皮素肾小球系膜细胞
