于鹏
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：国家人类基因组北方研究中心更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 利用线粒体膜电位测定筛选参与细胞凋亡的人类新基因被引量：2
- 2007年
- 细胞凋亡(apoptosis)属于细胞程序化死亡(programmed cell death),是细胞内涉及到许多生化反应的复杂过程.建立了基于细胞水平的凋亡筛选模型,用于筛选人类基因组中功能未知的序列,以发现与细胞凋亡相关的新基因.通过构建人类未知基因的表达文库,并将未知基因表达载体瞬时转染HeLa细胞,用阳离子染料JC-1标记HeLa细胞线粒体内膜并检测线粒体跨膜电位,用流式细胞术进行阳性结果的验证.经过对未知基因表达文库内600个新基因的筛选,得到7个线粒体跨膜电位下降相关新基因(CHMP6、CGI-38、hCAP-H2、NUDT16L1、ARMC1、PHF17和FLJ21103),经实验验证,其中3个基因(CHMP6、CGI-38和hCAP-H2)与细胞凋亡相关.结果表明,所建立的基于细胞的凋亡筛选模型稳定高效,3个细胞凋亡相关基因将被进行深入研究.
- 骆叶王兰高霞邓唯唯于鹏张晨颖陆阳郝钰石太平
- 关键词：细胞凋亡线粒体膜电位新基因
- TNFRSF1A新的分泌型剪切体的克隆、表达和活性验证
- 背景:肿瘤坏死因子(TNFα)在体内发挥多种生物学效应,包括抗肿瘤和促炎症作用。在一些自身免疫病、休克等疾病时往往出现TNFα的表达升高,并加速疾病的进展。通过重组可溶性TNF受体可特异性封闭TNFα的病理效应达到治疗疾...
- 高鹏王平章于鹏彭智彭亮李娜石太平马大龙
- 文献传递
- 人辅脂酶样3基因hCLPSL3及其同源基因cDNA克隆及鉴定
- 2012年
- 为发现新的辅脂酶样家族成员,通过EST拼接获得1个新的人类辅脂酶样蛋白编码基因hCLPSL3(human colipase-like 3);同时,通过同源性分析,对小鼠(Mus musculus)、大鼠(Rattus norvegicus)同源基因Clpsl3的完整编码区进行分析和预测。利用RT-PCR技术以人细胞系cDNA为模板成功扩增到hCLPSL3的2个转录变异体,即hCLPSL3-v1和-v2,前者包含完整的开放阅读框架(ORF),后者ORF被提前终止密码子(premature stop codon,PTC)中断;hCLPSL3-v1包含159个氨基酸,含有1个典型的信号肽,2个高度同源的内部序列重复区以及2个不完整的辅脂酶样结构域。通过真核表达载体构建,在人293T细胞中以过表达方式证实了hCLPSL3-v1能够分泌。通过RT-PCR技术,在小鼠肾、结肠和脾脏组织中各获得1个Clpsl3转录变异体序列,分别称为mCLPSL3-v1、-v2和-v3,其中mCLPSL3-v1包含完整的编码区,编码产物含161个氨基酸,而mCLPSL3-v2和-v3的ORF均被PTC中断;从大鼠结肠和小肠组织中克隆到大鼠Clpsl3的cDNA序列,即rCLPSL3,其编码162个氨基酸。此外,CLPSL3在哺乳动物中广泛存在,基因结构相似,均含有高度保守的18个半胱氨酸,推测与二硫键形成有关。这些工作为CLPSL3的功能研究奠定了基础。
- 卢艳薛永常于鹏王平章
- 关键词：克隆
