黄呈辉
- 作品数：6 被引量：13H指数：1
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- 基质金属蛋白酶-9在结核性脑膜炎小鼠中的表达特点及意义
- <正>目的分析基质金属蛋白酶-9(MMP9)在小鼠结核性脑膜炎病理生理过程中的表达特点及意义。方法从32只C57BL/6小鼠中随机抽取16只,向侧脑室注射10ul含1.271±0.111E+6 cfu的H37RV菌悬液作...
- 丁桂兰黄呈辉李传友张伦理
- 文献传递
- 结核分枝杆菌感染诱导星形胶质细胞过度表达基质金属蛋白酶-9的分子机制被引量：1
- 2013年
- 目的探讨结核分枝杆菌感染对人星形胶质细胞基质金属蛋白酶（MMP）-9表达的影响及其机制。方法分别用结核分枝杆菌（MTB）直接感染人星型胶质细胞系U251细胞，MTB感染外周血单个核细胞（PBMC）后的条件培养基（CoMTB）、含RPMI-1640的MTB条件培养基（CoTB）及未感染MTB的PBMC条件培养基（CoMCON）刺激U251细胞，ELISA检测细胞上清液中MMP-9含量，明胶酶谱法检测MMP9活性，Western印迹法检测MMP-9、核因子（NF）-κB及核因子-κB抑制蛋白（IκB）α和IκBβ的表达。组间及配对数据比较采用t检验，多组间比较先行方差齐性检验，方差齐采用方差分析，不齐采用秩和检验。结果MTB直接感染U251细胞后MMP-9几乎检测不到，CoMTB刺激U251细胞后，MMP-9含量从12h的（400．1±12．6）pg／mL逐步升至72h的（2900．3±108．4）pg／mL，呈时间依赖性；而CoMCON和CoTB组刺激72h后MMP-9含量分别为（300．8±40．4）pg／mL和（400．2±42．8）pg／mL，差异有统计学意义（t=9．514，P=0．000；￡-9．476，P=0．000）。明胶酶谱法和Western印迹法检测CoMTB组上清液中MMP-9的表达，随刺激时间延长，其活性和表达量逐渐增强，与ELISA法一致。CoMTB刺激U251细胞后NF-κBP65表达增加，1h时是CoMCON组的2倍（t=6．78，P=0．041），2h时是CoMCON组的5倍（t=9．23，P=0．008），CoMTB组ICBa和IκBα蛋白0．5h开始降解并持续至6h，而CoMCON组未见降解。结论PBMC-神经胶质细胞网络在结核感染的基质降解中起重要作用，CoMTB可能通过激活NF-κB信号通路上调MMP9的表达。
- 李小鹏张伦理丁桂兰黄呈辉陈佳丽刘毅任卫聪孙照刚李传友
- 关键词：分枝杆菌结核星形细胞基质金属蛋白酶类结核脑膜
- 基质金属蛋白酶-9在结核性脑膜炎小鼠中的表达及其意义被引量：1
- 2014年
- 目的分析基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在小鼠结核性脑膜炎病理生理过程中的表达特点及其意义。方法侧脑室注射结核分枝杆菌H37RV悬液的16只小鼠作为模型组，注射等量0．9％氯化钠溶液的16只小鼠作为对照组，30d后处死。分别进行脑组织结核分枝杆菌培养、病理学观察，明胶酶谱法检测MMP-9活性，检测血脑屏障通透性和脑组织含水量，免疫荧光染色脑组织MMP-9、胶原纤维酸性蛋白（GFAP）和整合素aM（OX-42）。采用t检验比较两组间的差异。结果模型组小鼠注射菌量为（1．271±0．111）×10。菌落形成单位（cfu）／只，感染30d后脑组织匀浆培养出结核分枝杆菌，菌量为（4．900±1．407）×10。cfu／mL，光学显微镜下见蛛网膜下腔和脑室扩张，大量炎性细胞浸润。模型组小鼠脑组织MMP-9条带累积吸光度（A）值为478214-19932，对照组为10082±3544，差异有统计学意义（f=3．728，P=0．010）。模型组小鼠脑组织伊文斯兰（EB）含量为（11．8±3．6）bLg／g，对照组为（4．7±3．4）／tg／g，差异有统计学意义（t=2．887，P=0．028）。模型组小鼠脑组织含水量为0．849土0．035，对照组为0．775±0。037，差异有统计学意义（t=2．925，P=0．026）。免疫荧光染色显示感染后小鼠脑组织高表达MMP-9、GFAP和OX-42，且MMP-9与GFAP和0X-42均明显重合。结论MMP-9在结核性脑膜炎小鼠脑组织中活性增强，并参与破坏血脑屏障，导致组织水肿、炎性细胞渗出，小胶质细胞-星形胶质细胞网络参与MMP-9的分泌。
- 丁桂兰李小鹏黄呈辉罗金亮王俊井李传友张伦理
- 关键词：结核脑膜基质金属蛋白酶9小鼠小神经胶质细胞星形胶质细胞
- HSP70-HBsAg基因修饰DC瘤苗抗肝癌作用的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨HSP70-HBsAg嵌合基因修饰DC瘤苗对肝癌动物模型的免疫治疗效果。方法用重组腺病毒介导HSP70-HBsAg基因修饰树突状细胞构建HSP70-HBsAg-DC瘤苗后,采用皮下注射、静脉注射和瘤体注射三种途径向荷瘤小鼠回输HSP70-HBsAg-DC瘤苗,比较观察HSP70-HBsAg-DC瘤苗对实验性肝癌的治疗效果和免疫保护作用。结果皮下注射HSP70-HBsAg-DC瘤苗治疗效果明显优于瘤体内注射、尾静脉注射(P<0.05),HSP70-HBsAg-DC瘤苗组肿瘤的生长速度明显慢于对照组(P<0.05)。结论皮下注射HSP70-HBsAg-DC瘤苗可能是实验性肝癌最佳的免疫途径。HSP70-HBsAg-DC瘤苗对肝癌荷瘤小鼠产生有明显的免疫治疗作用,能够诱导机体产生较强的抗肝癌免疫保护作用。
- 幸思忠薛冀苏李鹤平赖伏虎黄呈辉曾志荣杨建勇龙健婷
- 关键词：HSP70HBSAG瘤苗
- 深圳市登革1型病毒株全基因组特征及系统进化分析
- 2019年
- 目的对深圳市2014年登革病毒1型(DENV-1)流行株进行全基因序列测定,分析其分子病毒学特征,探讨其可能来源。方法采集2例登革热患者急性期血清标本,用BHK-21细胞培养分离病毒,RT-PCR进行病毒血清型别鉴定,并用RT-PCR进一步扩增全基因组序列,测序后进行同源性比较、系统进化树分析和遗传变异分析。结果 2例深圳DENV-1分离株进行全基因组测序结果显示同源性为100.0%,其基因组全长均为10 735 bp,编码3 329个氨基酸,与新加坡DENV-1流行株核苷酸和氨基酸同源性最高,分别为99.3%和99.7%。全基因组序列系统进化分析显示,深圳DENV-1株为基因Ⅰ型,与Fujian2004、Zhuhai2007和Singpore2008的亲缘关系较近,均在同一进化分支上。与广州DENV-1株GZ/80相比,深圳2014年DENV-1分离株发生了碱基变异430个,氨基酸变异42个,5’UTR存在1处点突变,3’UTR序列共有8处位点发生变异。结论 2014年深圳市DENV-1株可能来源于东南亚一带。病毒在进化过程中出现一些位点变异,这些变异的生物学意义有待进一步研究。
- 田建华马珍元张新枝王雪刚黄呈辉
- 关键词：登革热全基因系统进化树
- 金属基质蛋白酶-9在中枢神经系统感染患者脑脊液中的表达水平及意义被引量：11
- 2012年
- 目的分析不同病原导致的中枢神经系统感染患者脑脊液（CSF）中金属基质蛋白酶-9（MMP-9）的水平及意义。方法应用ELISA法检测10例结核性脑膜炎患者急性期及缓解期、10例化脓性脑膜炎、10例真菌性脑膜炎、10例病毒性脑炎患者CSF中的MMP-9水平，并选择10例非肿瘤非感染性头痛患者的CSF作为对照，采用t检验比较各组间的差异，采用Spearman等级相关法分析MMP-9与CSF中细胞数、糖、氯化物、蛋白的相关性。结果结核性脑膜炎组、化脓性脑膜炎组、真菌性脑膜炎组和病毒性脑炎组CSF中MMP-9水平分别为（569．46±162．42）、（182．79±99．06）、（54．69±19．93）和（18．52±10．31）ng／mL，高于对照组的（3．51±1．53）ng／mL，结核性脑膜炎组与以上其他感染组及对照组比较，差异均有统计学意义（t=2．925、3．041、3．237、3．454，P=0．0340、0．0270、0．0080、0．0001）。结核性脑膜炎组急性期MMP-9水平为（569．46±162．42）ng／mL，明显高于缓解期的（294．30±89．06）ng／mL。结核性脑膜炎组的MMP-9水平与CSF中蛋白呈正相关（r=0．509，P-0．044），与糖（r=0．451，P=0．008）和氯化物（r=-0．637，P=0．007）均呈负相关，与细胞数无相关性（r=0．308，P==0．246），而其他组则不存在相关性。结论MMP-9水平在结核性脑膜炎、化脓性脑膜炎患者CSF中升高尤其明显，可作为中枢神经系统感染的标志物，动态监测其含量对病因的鉴别及判断治疗效果有一定意义。
- 李小鹏张伦理黄呈辉
- 关键词：中枢神经系统感染基质金属蛋白酶9脑脊髓液酶联免疫吸附测定
