姜宏泽
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 供职机构:四川农业大学动物医学院猪病研究中心更多>>
- 发文基金:四川省科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 胸膜肺炎放线杆菌抗体ApxⅣ-Dot-PPA-ELISA检测方法的建立被引量:2
- 2015年
- 本研究构建了胸膜肺炎放线杆菌溶血外毒素ⅣA(ApxⅣA)的原核表达质粒pET-28a(+)-ApxⅣ,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出分子质量约为48ku的ApxⅣ蛋白,经Western-blot分析表明该重组ApxⅣ蛋白具有反应原性。试验进一步用纯化的重组ApxⅣ蛋白作为抗原,建立了胸膜肺炎放线杆菌抗体的Dot-PPA-ELISA检测方法,该方法诊断膜片上点样ApxⅣ抗原质量为0.737μg,该方法检测灵敏度高,可检测到胸膜肺炎放线杆菌标准阳性血清IgG的最低含量为8.374×10-9 g;检测特异性好,不与副猪嗜血杆菌、大肠杆菌、猪链球菌2型、多杀性巴氏杆菌、日本脑炎病毒的阳性血清发生交叉反应。应用建立的诊断方法对446份临床血清样品进行检测,胸膜肺炎放线杆菌抗体的阳性检出率为25.37%。结果表明,该方法具有操作方便、灵敏、结果易于判读等优点,可应用于猪场猪传染性胸膜肺炎的血清学诊断。
- 姜宏泽李英文心田黄小波伍锐文翼平张俊杨瑞晨曹三杰
- 关键词:胸膜肺炎放线杆菌DOT-PPA-ELISA