闫少华
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目郑州市科技领军人才培育计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 促红细胞生成素对幼鼠单侧输尿管梗阻解除后肾脏水通道蛋白2-3表达的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨促红细胞生成素(EPO)对幼鼠单侧输尿管完全梗阻解除(CUUO-R)后肾脏水通道蛋白2-3(AQP2-3)表达的影响。方法选取2~3个月大的SD雄性大鼠24只,随机分为3组:CUUO-R组、CUUO-R+EPO组和假手术组,每组各8只。CUUO-R组和CUUO-R+EPO组行单侧输尿管结扎手术48 h后解除梗阻,CUUO-R+EPO组解除梗阻术后给予EPO腹腔注射(2000 IU/kg),首次于解除梗阻时给药,其余隔天给药1次,共给药4次,CUUO-R组给予同等剂量9 g/L盐水。假手术组仅行输尿管游离,不结扎。解除梗阻术后1周取出肾脏标本,采用免疫组织化学和Western blot的方法检测肾脏中AQP2-3蛋白表达的变化。结果假手术组大鼠尿液渗透压最高,CUUO-R+EPO组次之,CUUO-R组最低(P=0.007)。假手术组的血肌酐和尿素氮分别为(54.820±1.536)μmol/L和(6.929±0.604)mmol/L,CUUO-R+EPO组分别为(57.072±2.286)μmol/L和(1.479±0.043)mmol/L,CUUO-R组分别为(58.001±2.416)μmol/L和(9.025±1.158)mmol/L;组间比较,CUUO-R组与假手术组相比差异有统计学意义(P<0.05),CUUO-R+EPO组与假手术组之间差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学结果显示CUUO-R组内髓集合管AQP2及AQP3阳性染色均弱于CUUO-R+EPO组和假手术组,经Western blot检测结果进一步证实,CUUO-R组AQP2和AQP3蛋白的表达量均低于CUUO-R+EPO组和假手术组(AQP2结果分别为0.974±0.109、1.923±0.097和2.002±0.044,F=392.4,P=0.000;AQP3结果分别为0.941±0.048、1.497±0.043和1.863±0.043,F=735.8,P=0.000)。结论EPO对CUUO-R幼鼠AQP2-3蛋白表达和早期肾功能的恢复有益。
- 冯锦锦闫少华郭曦陈燕文一博李云龙何育霖何翔飞马源刘二鹏宋攀邢栋李琦文建国
- 关键词：促红细胞生成素输尿管梗阻
- 神经源性膀胱伴输尿管反流的尿动力学研究被引量：6
- 2016年
- 要目的：探讨有输尿管反流的神经源性膀胱（NB）患儿有或没有逼尿肌过度活动（DO）时的尿动力学差异，为临床治疗此类患者提供理论参考依据。方法：选取就诊并经影像尿动力学检查发现膀胱输尿管反流的NB患儿110例．男63例．女47例，年龄4～12岁，平均7．5岁。按照充盈期有无DO，将其分为DO组（n=32）与无DO组（n=78）。观察记录两组发生膀胱输尿管反流时的膀胱灌注量、逼尿肌压并计算发生反流时的膀胱顺应性：记录两组充盈结束时最大膀胱测压容量、最大逼尿肌压并计算充盈期膀胱顺应性，按照反流级别将其分为轻度反流（Ⅰ～Ⅱ度），重度反流（Ⅲ一Ⅴ度），分析两组的反流侧别及反流程度有无差异。结果：DO组发生膀胱输尿管反流时的膀胱容量与顺应性分别为（107．5±21．3）mL和（5．6±1．8）mL／cmH2O，无DO组发生膀胱输尿管反流时的膀胱容量与顺应性分别为（124．7±35．6）mL、（6．7±2．3）mL／cmH2O，差异均有统计学意义（P〈0．05）；两组的逼尿肌压分别为（21．7±8．3）cmH2O、（19．6±9．2）cmH2O，差异无统计学意义；DO组充盈结束时的膀胱容量与顺应性分别为（198．7±36．5）mL、（5．8±1．9）mL／cmH2O，与无DO组充盈结束时的膀胱容量（223．8±40．2）mL与顺应性（6．5±1．4）mL／cmH2O相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；两组尿动力学检查结束时逼尿肌压分别为（35．8±7．1）cmH2O、（36．3±8．5）cmH2O，差异没有统计学意义。DO组单侧反流20例（63％），双侧返流12例（37％），无DO组单侧返流31例（40％），双侧返流47例（60％）．两组的反流程度均较严重。结论：膀胱容量小，膀胱顺应性差是有输尿管反流的NB患儿伴发DO时的尿动力学特征。
- 何翔飞文建国吴军卫李云龙冯锦锦闫少华张艳
- 关键词：神经源性膀胱膀胱输尿管反流逼尿肌过度活动
- 大鼠脊神经离断神经源性膀胱模型的建立被引量：3
- 2017年
- 目的建立大鼠脊神经离断神经源性膀胱（NB）模型并对其进行影像尿动力学评估。方法25只8周龄健康雌性SD大鼠，体重200～220 g，按照随机数字表法分为NB组（n＝15）和假手术（Sham）组（n＝10）。NB组大鼠行椎管内双侧腰6（L6）和骶1（S1）脊神经离断，Sham组只行椎板切除，不离断脊神经。术后1个月，两组大鼠行影像尿动力学评估。结果NB组大鼠术后出现排尿障碍，表现为下腹部饱满，可触及因尿潴留而增大的膀胱，按摩下腹部有较多尿液排出，Sham组大鼠无上述排尿障碍表现。影像尿动力学检查结果示：与Sham组比较，NB组大鼠逼尿肌无明显收缩，最大膀胱测压容量[（3.97±0.90） ml比（1.03±0.21） ml]和膀胱顺应性[（0.203±0.068） ml/cmH2O比（0.037±0.010） ml/cmH2O（1 cmH2O＝0.098 kPa）]明显增加（t＝10.070，P＝0.000；t＝7.616，P＝0.000），逼尿肌漏尿点压[（20.64±5.03） cmH2O比（27.88±3.94） cmH2O]明显降低（t＝3.746，P＝0.001）；同步影像检查结果显示与Sham组大鼠比较，NB组大鼠膀胱容积增大，呈＂橄榄球＂状。结论采用脊神经离断法能建立大鼠逼尿肌无收缩NB模型。
- 李云龙何翔飞高宛生文一博李延伟韩中将吴军卫冯锦锦闫少华文建国
- 关键词：神经源性膀胱脊神经尿动力学
- 正常和肾积水胎儿肾脏水通道蛋白1-3的表达被引量：3
- 2017年
- 目的探讨正常和肾积水胎儿肾脏水通道蛋白1-3（AQP1-3）在孕中、晚期表达的差异。方法收集本院母亲身体健康，因其他原因而引产的21例正常胎JL（孕中期12例，孕晚期9例）和9例孕晚期肾积水胎儿肾脏标本；应用免疫组织化学方法检测各组肾脏AQPl-3的定位与表达。同时采用Western Blot检测正常和肾积水胎儿肾脏AQP1-3蛋白表达水平。同期收集本院8例成人因肾癌行肾切除术远离肿瘤的正常肾脏组织作为AQP1-3表达阳性对照。结果免疫组化结果显示AQP1阳性染色主要分布于肾小球毛细血管内皮细胞、近曲小管的上皮细胞及髓袢降支细段上皮细胞胞质；AQP2阳性染色主要分布于肾脏集合管上皮细胞胞膜和胞质；AQP3阳性染色主要分布于肾脏集合管主细胞的基底侧。经Image-ProPlus图像分析软件统计分析，孕中期肾脏AQP1-3表达分别为0．375±0．056、0．278±0．031和0．312±0．050，均弱于孕晚期组（分别为0．483±0．062、0．356±0．048和0．501±0．068），肾积水组AQP1-3表达分别为0．308±0．051、0．247±0．039和0．282±0．056，也均弱于同孕期正常胎儿，且胎儿肾脏AQP1-3表达均弱于成人对照组（分别为0．626±0．084、0．432±0．049和0．687±0．058，P〈0．05）。Western Blot同样显示正常孕晚期胎儿AQP1-3蛋白表达量（0．96±0．07、0．94±0．06和0．95±0．05）显著高于孕中期（0．82±0．05、0．76±0．04和0．79±0．04），且高于同孕期肾积水组表达量（0．54±0．04、0．42±0．03和0．53±0．04，P〈0．05）。结论胎儿积水肾脏AQP1-3的表达水平较正常胎儿明显降低提示胎儿积水肾脏浓缩稀释功已经受损。
- 任川川冯锦锦谢佳丰贾智明闫少华郑湘予文建国王琼
- 关键词：水通道蛋白胎儿肾积水
- 组胺H3受体缓解成肌分化过程中外源性肿瘤坏死因子诱导炎症反应的研究
- 2019年
- 目的探讨在成肌分化过程中,组胺H3受体对外源性肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的C2C12细胞炎症反应的作用,从分子角度阐明小儿尿道括约肌的发育和损伤修复过程对外源性炎症刺激的抵抗机制。方法利用外源性TNF-α刺激小鼠C2C12成肌细胞分化各阶段,将分化0、3、6d,分别记为D0、D3和D6阶段,在体外模拟小儿尿道括约肌发育和损伤修复过程中遭遇外源性感染的过程。实验分组为空白对照组、TNF-α组、TNF-α+H3受体激动剂(methimepip,Met)组和TNF-α+H3受体阻滞剂(cirpoxifan,CXP)组。釆用CCK-8法和流式法检测各组分化过程中细胞的生长活性和凋亡的影响;实时定量聚合酶链反应(quantificational real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测细胞炎症小体蛋白NLRP3以及早中晚细胞分化标志物MyoDl、Myogenin、Myosin-2的表达;ELISA法检测炎性因子IL-邛的分泌。结果C2C12细胞分化过程中,CCK-8法检测显示TNF-a和TNF-a+CXP会导致各分化阶段细胞的生长活性明显降低(P<0.05),而TNF-a+Met组的细胞活性与对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。TNF-α和TNF-α+Met均不引起细胞凋亡63.3%,TNF-α+CXP导致61.3%的D6阶段细胞发生凋亡。TNF-α诱导D3和D6阶段细胞炎症小体蛋白NLRP-3的mRNA表达分别增加101%和90%,Met降低TNF-α诱导的NLRP3 mRNA达33%和37%,而CXP增加TNF-α诱导的NLRP3mRNA达23%和24%。TNF-α使D3和D6阶段细胞的分化标志物MyoD1 mRNA降低38%和22%,Myogenin mRNA降低29%和35%,Myosin-2 mRNA降低42%和33%;Met进一步降低TNF-α刺激下的D3和D6阶段细胞各标志物达23%和31%,23%和26%,31%和36%,而CXP增加TNF-α刺激下的D3和D6阶段细胞各分化标志物达40%和25%,35%和31%,50%和21%。ELISA显示TNF-α诱导D6细胞分泌IL-1β的分泌量为49.7pg/ml,Met降低了IL-1β的分泌量,为37.9pg/ml结论TNF-α能诱导C2C12细胞发生炎症反应并抑制成肌分化过程;组胺H3受体可抑制TNF-α诱导的炎症反应并有序调控分�
- 陈燕冯锦锦黄晨旭李一冬闫少华王一鹤文建国
- 关键词：尿道括约肌组胺H3受体成肌分化炎症反应
- 佛司可林对活化的人单核巨噬细胞分泌白细胞介素-1β的抑制作用被引量：5
- 2018年
- 目的 探讨佛司可林对人单核巨噬细胞(THP-1巨噬细胞)内核苷酸结合寡聚化结构域样受体3 (NLRP3)炎症小体活化及活化后白细胞介素-1β(IL-1β)炎性因子分泌的影响,从而为临床治疗小儿炎症性疾病提供参考.方法 利用佛波酯诱导人单核细胞系THP-1细胞分化成巨噬细胞,尼日利亚菌素活化巨噬细胞,佛司可林(10、50、100 μmol/L)刺激活化的巨噬细胞;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测细胞炎症小体核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP-3)、炎性因子IL-1β和Caspase-1 mRNA表达;Western blot法检测细胞炎症小体NLRP-3、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1前体(pro-Caspase-1)和Caspase-1蛋白量的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎性因子IL-1β蛋白的表达.结果 尼日利亚菌素使THP-1巨噬细胞的NLRP-3、IL-1β和Caspase-1蛋白的mRNA表达分别提高为未激活组的7.59倍(P<0.001)、579.10倍(P<0.001)和3.59倍(P<0.001),但佛司可林刺激对激活的THP-1巨噬细胞的炎症小体NLRP-3、炎性因子IL-1β和Caspase-1的mRNA表达无影响(P>0.05).Western blot结果显示,佛司可林对激活的THP-1巨噬细胞的pro-IL-1β和pro-Caspase-1的蛋白量表达无明显影响(P>0.05),但明显降低NLRP-3和Caspase-1的蛋白量表达(P<0. 001).ELISA结果提示,尼日利亚菌素使THP-1巨噬细胞的IL-1β的分泌由未激活量584.0 nmol/L升高到激活量2 695.6 nmol/L(t=16.031 1,P<0.001),而佛司可林10 μmol/L、50 μmol/L和100 μmol/L分别可使激活量降为1 858.4 nmol/L(t=5.365 5,P<0.001)、1 467.9 nmol/L(t=8.047 5,P<0.001)和1 246.7 nmol/L(t=10.199 1,P<0.05).结论 佛司可林不影响激活的THP-1巨噬细胞炎症相关蛋白前体的基因转录和蛋白翻译表达,但降低其炎性因子IL-1β翻译后的蛋白分泌量,从而抑制炎性反应,可用于治疗由IL-1β引起的炎性疾病.
- 陈燕冯锦锦闫少华李一冬李云龙文建国
- 关键词：炎症佛司可林巨噬细胞白细胞介素-1Β
- 不同孕期胎儿肾脏及羊水中水通道蛋白2的表达及其意义被引量：1
- 2018年
- 目的探讨不同孕期胎儿肾脏及羊水中水通道蛋白。2（aquaporin-2，AQP-2）的表达规律。方法收集引产胎儿肾脏22例，按妊娠时间分为3组：17-23^＋6周8例，24-31^＋6周8例，32-38^＋6周6例。采用Western blot法检测不同孕期。肾脏中AQP-2的表达。收集不同妊娠时期羊水24例，按妊娠时问分为3组：17-23^＋6周10例，24-31^＋6周6例，32-38^＋6周8例。收集8例健康成人晨尿作为阳性对照。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测羊水中AQP-2的表达，采用冰点渗透压测定仪检测不同孕期羊水的渗透压。结果随胎龄增加，胎儿。肾脏中AQP-2的表达水平逐渐增加（17-23^＋6周：0．986±0．335，24-31^＋6周：1．566±0．272，32-38^＋6周：2．080±0．246），组问比较差异有统计学意义（P〈0．05）。不刷孕期羊水与肾脏中AQP-2的变化呈正相关（r=0．985，P〈0．05），且随胎龄增加表达逐渐增加[17-23^＋6周：（30．253±5．843）mg／L，24-31^＋6周：（35．103±7．271）mg／L，32-38^＋6周：（42．580±1．230）mg／L，成人尿液：（46．493±0.450）mg／L]。妊娠不同时期羊水渗透压分别为17-23^＋6周（272．6004-4．827）mmol／L，24-31^＋6周（252．0004-15．360）mmol／L，32-38^＋6周（261．7504-5．560）mmol／L，成人尿液（455．2504-4．573）mmol／L，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论胎儿肾脏和羊水中AQP-2的表达呈良好相关性，提示羊水中的AQP-2可反映胎儿肾脏中AQP-2的表达水平。
- 冯锦锦闫少华郭曦文一博李延伟韩中将李云龙何翔飞花朝阳宋攀文建国
- 关键词：水通道蛋白-2肾脏羊水胎儿
- 促红细胞生成素对双侧输尿管梗阻解除后幼鼠肾脏水通道蛋白-1表达及功能的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨促红细胞生成素(EPO)对双侧输尿管梗阻-梗阻解除(BUO-R)后幼鼠肾脏水通道蛋白-1(AQP-1)表达及功能的影响。方法幼年雄性SD大鼠48只,随机号码表法分为双侧输尿管完全梗阻(BUO)组(n=6)、双侧输尿管梗阻-梗阻解除(BUO-R)组(n=12)、BUO-R+EPO组(n=12)及假手术组(Sham组)(n=18)。实验组采用输尿管结扎法建立双侧输尿管完全梗阻模型,BUO组梗阻24 h后处死;BUO-R组和BUO-R+EPO组梗阻24 h后解除梗阻,BUO-R+EPO组于解除梗阻后1 h、1 d、3 d、5 d给予EPO腹腔注射(500 IU/kg),BUO-R组相同时间点给予同等剂量的9 g/L盐水,分别在解除梗阻后3 d、7 d处死幼鼠;Sham组仅分离输尿管,不予结扎,分别于梗阻术后24 h、解除梗阻后3 d、7 d处死幼鼠,各组幼鼠处死前取双肾标本并采集血液标本。解除梗阻后将幼鼠放置于代谢笼中,记录24 h饮水量和尿液量,并收集尿液用于检测尿液渗透压的变化。检测各组幼鼠血浆渗透压、血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,采用免疫组织化学、Western blot检测各组肾脏组织中AQP-1蛋白表达水平。结果BUO-R后3 d,24 h饮水量和尿液量BUO-R组最多,BUO-R+EPO组次之,Sham组最少(P<0.05);尿液渗透压Sham组最高,BUO-R+EPO组次之,BUO-R组最低(P<0.05);血浆渗透压、Cr、BUN BUO-R组最高,BUO-R+EPO组次之,Sham组最低,但均低于BUO组(P<0.05)。梗阻解除后7 d,Sham组无明显变化,BUO-R组和BUO-R+EPO组以上各项指标逐渐恢复,但仍未达到正常水平(P<0.05),BUO-R组与BUO-R+EPO组比较差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果显示Sham组染色强度最强,BUO-R+EPO组次之,BUO-R组再次,BUO组最弱;解除梗阻后7 d与解除梗阻后3 d相比,BUO-R+EPO组和BUO-R组染色强度均增强,仍低于Sham组。经Western blot进一步验证,各组幼鼠肾脏AQP-1表达量Sham组最高,BUO-R+EPO组次之,BUO-R组再次,BUO组最低(P<0.05);解除梗阻后7 d与解除梗阻后3 d相比,BUO-R+EPO组、BUO-R组表达量均增高
- 郭曦冯锦锦闫少华文一博文建国
- 关键词：促红细胞生成素双侧输尿管梗阻肾脏水通道蛋白-1
