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孙隽
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烟台毓璜顶医院
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相关领域:
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孙成铭
烟台毓璜顶医院
张成林
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烟台毓璜顶医院
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一种药物基因组学检测试剂盒
本实用新型公开了一种药物基因组学检测试剂盒,包括试剂盒设备主体、分类机构和保护机构,试剂盒设备主体的底部固定连接有分类机构,试剂盒设备主体的顶部固定活动连接有保护机构,保护机构的顶部嵌入连接有保护挡板,保护挡板的顶部嵌套...
孙隽
文献传递
一种检测11种常见感染性腹泻病原体的基因芯片及其应用
本发明涉及一种基因芯片及其应用,属于生物检测领域。本发明针对11种临床常见感染性腹泻病原微生物设计了一组检测探针,以及含有该组探针的基因芯片。本发明的检测探针包括副溶血弧菌探针、创伤弧菌探针、霍乱弧菌探针、溶藻弧菌探针、...
孙成铭
栾材富
刘杰
伊茂礼
李少君
吴金英
张守信
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孙隽
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一种检测11种常见感染性腹泻病原体的基因芯片及其应用
本发明涉及一种基因芯片及其应用,属于生物检测领域。本发明针对11种临床常见感染性腹泻病原微生物设计了一组检测探针,以及含有该组探针的基因芯片。本发明的检测探针包括副溶血弧菌探针、创伤弧菌探针、霍乱弧菌探针、溶藻弧菌探针、...
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文献传递
RNase9蛋白在男性生殖系统中的表达及功能
2015年
目的:研究核糖核酸酶9(RNase9)在男性生殖系统中的表达、定位及功能,为其异常所引起的不育症诊断和治疗提供理论基础。方法采用生物信息学分析人RNase9的结构,预测其功能;利用基因重组技术构建了原核表达载体制备重组RNase9蛋白。通过RT-PCR检测RNase9蛋白在不同组织中的表达,比较老年人(76.3±8.1岁)、成年人(31.2±5.6岁)和胎儿(0.8±0.2岁)附睾组织RNase9蛋白表达量的差异。应用免疫荧光实验观察RNase9蛋白在睾丸、附睾、精子上的定位。应用酵母tRNA底物实验检测RNase9核糖核酸酶活性。分别向精子悬液中加入免疫前血清(A组)和鼠抗RNase9多抗血清(B组),应用抗体封闭精子运动实验检测RNase9蛋白对精子运动能力[平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)]的影响。8~12周龄金黄地鼠肌注孕激素和人绒毛膜促性腺激素,取卵子与两组精子孵育后(A组精子用免疫前血清,B组精子用RNase9抗血清封闭5 h;实验中所用卵子的数目分别是A组60个和B组62个),应用抗体封闭精子穿卵实验检测RNase9蛋白对精子穿卵能力的影响。结果经过生物信息学分析,RNase9基因属于核糖核酸酶A超家族一新成员,N末端含23个氨基酸的信号肽序列,相对分子质量约为20000,等电点PI 5.92;含5个N-糖基化位点、2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点、1个NDUFC2位点和2个胰-核糖核酸酶功能域标签位点。RNase9蛋白在人附睾、睾丸、心脏,肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、胃多种组织广泛表达,在附睾组织中表达量较高;在成年人附睾组织中的表达量明显高于胎儿和老年人附睾组织(均P〈0.05)。RNase9蛋白特异结合在精子的赤道后颈部,原核表达获得高纯度具有生物活性的重组蛋白和相应的抗体。核糖核酸酶实验显示RNase
刘杰
张守信
张成林
孙隽
孙成铭
关键词:
睾丸
附睾
精子
精子能动性
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