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用于细胞核钙成像的新型钙指示剂的构建与鉴定(英文): 2015年; 细胞核钙离子是基因转录等细胞核反应过程重要的调控因子.然而,细胞核内钙离子信号的调控机制尚不清楚.缺乏稳定的、敏感的细胞核钙指示剂,是导致其调控机制难以研究的重要原因之一.针对这一问题,设计了能够在细胞核内特异性表达的、具有核定位功能的钙指示剂.以基因编码钙指示剂(GECIs)家族成员GCa MP6为模板,首先融合了对钙离子不敏感的红色荧光蛋白td Tomato来对局部的钙信号进行量化,其次融合了核定位信号(NLS),使GCa MP6能够特异定位于细胞核中.结果表明,NLS-GCa MP6-td Tomato能够在细胞核中有效发挥作用,并且在钙敏感性与动力学上,也与GCa MP6相当.这一新型细胞核钙指示剂将为研究细胞核钙离子的功能及其调控机制提供新的方法与途径.; 齐特杨华乾范雪新赵天郭运波丁卫叶海虹

一种改进的星形胶质细胞原代培养方法被引量：2: 2016年; 目的改进大鼠大脑皮质星形胶质细胞的体外培养,旨在通过较简便的方法获得高纯度形态典型的星形胶质细胞,为研究星形胶质细胞的生物学作用提供实验模型。方法以新生大鼠为星形胶质细胞来源,利用不同规格的吸头相互叠套,逐步机械吹打,使细胞分散,制备单细胞悬液;获得的单细胞悬液用差速黏附处理去除成纤维细胞,原代培养14d后,恒温振荡法去除小胶质细胞等杂质细胞;胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)和S100β免疫荧光共染色,鉴定细胞纯度。结果这种改进的星形胶质细胞培养方法 ,分离培养出星形胶质细胞,阳性率达95%以上。结论采用机械吹打方法建立原代星形胶质细胞培养体系,是一种比较简便、值得推广的可用于体外细胞培养研究工作的有效方法。; 徐平湘齐特肇玉明刘晓卉陆莉; 关键词：星形胶质细胞原代培养

UPLC-MS/MS法测定红景天提取物中6种活性成分的含量被引量：6: 2016年; 目的：建立并验证同时测定红景天（Rhodiola）提取物中红景天苷、红景天素、草质素苷、草质素、山柰酚和槲皮素6种活性成分含量的UPLC-MS/MS方法。方法色谱条件：采用Zorbax Eclipse plus C18色谱柱（100 mm×2.1 mm，3.5μm）；0.2%甲酸水-乙腈为流动相，洗脱方式为梯度洗脱；流速为0.4 ml/min；柱温为25℃。质谱条件：采用电喷雾离子源（ESI），负离子检测，扫描方式为多反应监测模式（MRM）。结果6种活性成分分别在10～20000，10～4000、10～4000、5～2000、10～2000和5～2000 ng/ml之间线性关系良好。仪器精密度RSD＜3.31%，6种活性成分的稳定性RSD＜5.07%，重复性RSD＜4.05%，平均回收率在99.27%～108.91%，RSD均＜4.92%。结论本法可同时测定红景天提取物中6种活性成分含量，具有快速、灵敏度高、专属性好，重复性好的特点。; 赵亮齐特葛贝康徐平湘薛明; 关键词：UPLC-MS/MS 红景天提取物红景天苷红景天素山柰酚槲皮素

原代大鼠脑微血管内皮细胞培养方法的改进被引量：5: 2016年; 血脑脊液屏障（blood brain barrier,BBB）是机体的内部屏障之一,由介于血循环与脑实质间的软脑膜、脉络丛的脑毛细血管壁和包于壁外的胶质膜所组成,是中枢神经系统的重要解剖结构基础[1]。血脑脊液屏障主要是由脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells,BMECs）和周细胞构成,星形胶质足突包绕毛细血管的外周,覆盖其95%～99%的表面积。; 徐平湘齐特陆莉薛明肇玉明; 关键词：脑微血管内皮细胞细胞培养方法血脑脊液屏障

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