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PRAS40与14-3-3蛋白各亚型相互作用的酵母双杂交系统检测: 2007年; PRAS40是近几年新发现的Akt作用底物,14-3-3结合蛋白。为确定PRAS40与14-3-3蛋白7种亚基间相互作用关系,利用gateway方法构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒pEG-PRAS40及转录激活质粒pJG-PRAS40,将PRAS40和14-3-3各亚型质粒分别作为诱饵蛋白质粒及转录激活质粒共转化酵母细胞EGY48,通过氨基酸营养缺陷生长实验及β-半乳糖苷酶显色反应分析两种蛋白相互作用程度。酶切鉴定证实成功地构建了pEG-PRAS40和pJG-PRAS40质粒,酵母双杂交实验结果显示PRAS40可以和14-3-3亚型tau,beta,zeta及epsilon相结合,epsilon较强,beta和zeta次之,tau较弱。此结果将为深入研究PRAS40与14-3-3蛋白生物学功能及发现药物靶标奠定基础。; 刘康武黄蓓谭阳吴东明; 关键词：GATEWAY技术酵母双杂交

藻蓝蛋白亚基光动力作用效果及在体内分布规律的研究: 光动力学疗法(PDT)作为一种新型医疗手段，在多种疾病的治疗过程中起到了越米越重要的作用，特别是对部分肿瘤的治疗效果明显。藻蓝蛋白(C-PC)为螺旋藻中重要的捕光蛋白，由a及β亚基组成。本实验研究表明，C-PC亚基可以在...; 谭阳; 关键词：PDT 细胞抑制作用光动力学疗法; 文献传递

14-3-3 zeta蛋白C-端多肽抗体的制备与鉴定: 2007年; 目的制备14-3-3 zeta蛋白C-端多肽多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法用生物信息学分析14-3-3 zeta蛋白的同源性、亲水性和抗原性,设计并合成zeta蛋白C-端特异性的氨基酸序列,将其与牛血清白蛋白铰链;分别转化14-3-3的7个亚型质粒于大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,并分离纯化His-zeta融合蛋白;分别以zeta C-端多肽及zeta融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体;用Western blot分析zeta蛋白C-端多肽抗体亚型特异性,并用该特异性抗体检测zeta蛋白在COS-7细胞中的分布规律。结果在14-3-3的7个亚型蛋白存在的条件下,zeta蛋白C-端多肽抗体仅识别zeta亚型蛋白,而zeta融合蛋白抗体可以识别gamma、zeta、tau3种亚型;14-3-3zeta蛋白主要分布在COS-7细胞质一侧。结论已获得了亚型特异性的14-3-3zeta多克隆抗体,该抗体可用于14-3-3zeta免疫细胞化学等分析。; 吴东明黄蓓谭阳谭振; 关键词：多克隆抗体生物信息学特异性

藻蓝蛋白光敏剂的肿瘤靶向性研究: 黄蓓王永中孙昕孙兆奇刘晓颖谭阳郭瑞勇左漫漫胡玲魏皓; 该项目筛选出具有较强光敏作用的藻蓝蛋白组份为藻蓝蛋白α/β亚基。用水蚤所做光毒性实验表明，在相同光照强度条件下，藻蓝蛋白亚基的光毒性较photofrinⅡ弱。项目采用薄膜水合一超声分散法制备藻蓝蛋白亚基脂质体，脂质体的粒...; 关键词：; 关键词：肿瘤靶向性

藻蓝蛋白亚基细胞渗透性及对肿瘤细胞光敏作用的研究被引量：8: 2007年; 目的:研究藻蓝蛋白亚基对SP2/0、S180、COS7、C6的最佳渗透条件及由其介导的PDT对肿瘤细胞的抑制作用。方法:采用柱层析方法从藻蓝蛋白样品中分离得到藻蓝蛋白亚基,通过荧光显微镜观察其在细胞内的渗透特性,并以He-Ne激光器为激发光源,MTT法检测藻蓝蛋白亚基光敏作用对肿瘤细胞生长的抑制作用。结果:藻蓝蛋白α、α/β亚基在75μg/mL浓度下可以在4 h时充分地进入细胞,并可以在细胞内稳定2 h以上;藻蓝蛋白中的α,β亚基稳定性和作用不相同,β亚基荧光性强但易于降解,由α亚基介导的PDT作用比α/βPDT作用强;100μg/mLα亚基介导的PDT对SP2/0和S180两种悬浮细胞的抑制率可分别达到78.6%和39.8%,强于贴壁细胞C6和COS7的29.2%和17.8%。结论:藻蓝蛋白α亚基在合适的渗透条件下表现出较强的光动力学抗肿瘤效果,且PDT效果与光敏剂浓度、照射剂量及细胞类型相关。; 谭阳黄蓓任艳敏刘康武; 关键词：PDT 肿瘤抑制

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谭阳