陈洁
- 作品数:5 被引量:20H指数:2
- 供职机构:邯郸市中心医院更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 内皮样细胞与脐静脉内皮细胞的比较被引量:1
- 2016年
- 背景:干细胞可诱导分化为内皮样细胞,用于治疗糖尿病下肢血管病变,但诱导后的内皮样细胞是否完全可以取代内皮细胞改善血管病变呢?内皮样细胞与内皮细胞有哪些异同?尚未得到解决。目的:探讨诱导后的内皮样细胞与脐静脉内皮细胞在形态、功能及活性方面的异同。方法:分离、培养脐带间充质干细胞及脐静脉内皮细胞,分别通过流式细胞仪及免疫组化进行鉴定,将分离出的脐带间充质干细胞用含10μg/L血管内皮生长因子、10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子及体积分数为2%胎牛血清的DMEM-LG/F12培养液向内皮样细胞方向诱导分化并用免疫组化进行鉴定,通过细胞迁移、活性物质测定及三维血管形成实验对内皮样细胞及内皮细胞进行比较。结果与结论:分离的脐带间充质干细胞经流式及免疫组化鉴定高表达间充质干细胞相关表面标志,脐静脉内皮细胞经免疫组化鉴定高表达CD31和VWF。脐带间充质干细胞经诱导液诱导后,进行免疫组化鉴定高表达CD31和VWF。细胞迁移、活性物质及三维血管形成实验均显示诱导后的内皮样细胞在功能及活性上与内皮细胞相似,且优于内皮细胞。
- 郝晓娟郝海英朱敏杰袁铮李伟伟陈洁朱旅云
- 关键词:脐带间质干细胞内皮细胞干细胞脐带间充质干细胞内皮样细胞血管形成
- 基于TLR4/NF-κB信号通路探讨金雀异黄酮对膜性肾病大鼠肾损伤的影响
- 2024年
- 目的 探讨金雀异黄酮对膜性肾病大鼠肾损伤及Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 从45只SD大鼠中随机取8只作为正常组,剩余大鼠采用尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法构建膜性肾病模型。将32只成模大鼠随机分为模型组、金雀异黄酮组、瑞沙托维组和金雀异黄酮+瑞沙托维组,每组8只。金雀异黄酮组给予金雀异黄酮30 mg/kg腹腔注射,瑞沙托维组给予瑞沙托维10 mg/kg腹腔注射,金雀异黄酮+瑞沙托维组分别给予金雀异黄酮30 mg/kg和瑞沙托维10 mg/kg腹腔注射,均1次/d,干预4周。检测肾功能指标[24 h尿蛋白、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血浆白蛋白];HE染色、Masson染色和透射电子显微镜观察肾组织病理学形态、胶原沉积情况及细胞超微结构;免疫荧光染色法观察肾组织中免疫球蛋白G(IgG)沉积情况;ELISA法检测肾组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;RT-PCR法检测肾组织中TLR4、NF-κB p65、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1)) mRNA表达情况,Western blot法检测肾组织中TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白、BUN、SCr水平均明显升高(P均<0.05),血浆白蛋白水平明显降低(P均<0.05);肾小球体积增大,肾小管细胞空泡样变,间质区炎性细胞浸润,间质区和肾小球大量胶原沉积,胶原容积分数明显升高(P<0.05);肾小球细胞肿胀,足突融合或消失,基底膜不规则增厚,上皮细胞下可见大量电子致密物沉积,IgG大量沉积;肾组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平及TLR4、NF-κB p65、TGF-β_(1) mRNA相对表达量和TLR4、NF-κB p65、TGF-β_(1)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)、p-Smad2/3蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),肾组织中Smad7蛋白相对表达量明显降低(P<0.05)。与模型组比较,各药物组大鼠24 h尿蛋白、BUN、SCr水平均明�
- 杨林燕陈洁侯世杰何琦苗盈盈孙楠
- 关键词:膜性肾病金雀异黄酮核因子-ΚB
- 葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织细胞凋亡的影响及其机制探讨被引量:16
- 2016年
- 目的:研究葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:选取120只实验用大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶提取物100 mg·kg^(-1)治疗组、葛根素(100,50,25 mg·kg^(-1))治疗组;采用夹闭双侧肾蒂血管45 min后恢复血流再灌注的方法制备肾缺血再灌注大鼠模型;再灌注后立即通过ip给药,每天1次,疗程2周。治疗完成后,称量体重和肾脏质量并计算肾脏指数,测定血清中尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),尿酸(UA)含量,PAS染色法观察肾脏组织形态学变化;末端标记法(TUNEL)染色法观察细胞凋亡状况并计算凋亡指数(AI);实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定肾脏组织蛋白激酶B(AKT),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达,并计算Bax/Bcl-2;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测肾脏组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白的表达并进行半定量分析;酶联免疫法测定血浆中血浆C-反应蛋白(CRP),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素^(-1)β(IL^(-1)β),白细胞介素-6(IL-6),细胞间黏附分子^(-1)(ICAM^(-1))水平。结果:与模型组比较,葛根素(100,50 mg·kg^(-1))治疗组大鼠肾脏指数明显降低(P<0.05,P<0.01),血清中BUN,SCr,UA含量明显降低(P<0.05,P<0.01);葛根素各治疗组肾脏组织病理性形态学变化呈不同程度改善,肾小球细胞凋亡状况呈不同程度好转,均以100 mg·kg^(-1)治疗组效果最为显著,葛根素100,50 mg·kg^(-1)治疗组肾小球细胞AI显著降低(P<0.05,P<0.01),肾脏组织中Bax mRNA表达明显下调且Bcl-2 mRNA表达明显上调(P<0.05,P<0.01),Bax/Bcl-2明显降低(P<0.01),且100 mg·kg^(-1)治疗组AKT mRNA表达显著上调(P<0.01);Caspase-3蛋白表达量明显降低(P<0.05,P<0.01)。葛根素(100,50 mg·kg^(-1))治疗组大鼠血浆中CRP,TNF-α,IL-6水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),且100 mg·kg^(-1)治疗组IL^(-1)β,ICAM^(-1)含量水平明显降低(P<0.05
- 朱敏杰郝海英陈洁赵京梅郝晓娟
- 关键词:葛根素肾脏缺血再灌注细胞凋亡
- 葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织的保护作用及其机制研究被引量:6
- 2016年
- 目的研究葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织的保护作用及其机制。方法将120只实验用大鼠随机数字表法分为6组:假手术组,模型组,葛根素高剂量(100 mg·kg^(-1))、中剂量(50 mg·kg^(-1))、低剂量(25 mg·kg^(-1))治疗组,银杏叶提取物(100 mg·kg^(-1))治疗组;采用夹闭双侧肾蒂血管45 min后松夹恢复血流灌注的方法建立肾缺血再灌注大鼠模型;再灌注后立即腹腔注射给药,每天1次,疗程2周。称量各组大鼠体质量、肾脏重量并计算肾脏指数,测定24 h尿量和24 h尿蛋白量(UPro),测定血清中血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿酸(UA)含量,通过苏木精-尹红(HE)染色观察肾脏组织形态结构改变;末端标记法(TUNEL)观察肾小球细胞凋亡状况,并计算凋亡指数(AI);测定肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,通过ELISA法测定血清中白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量水平。结果较模型组,葛根素高、中剂量组大鼠肾脏重量减轻且肾脏指数降低,24 h尿量和UPro均减少,血清中BUN、SCr、UA含量降低,上述均差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);葛根素治疗组大鼠肾脏组织病变和肾小球细胞凋亡状况呈不同程度改善,以葛根素高剂量组效果最为显著,并且葛根素高、中剂量组大鼠肾小球细胞凋亡指数较模型组降低(P<0.05,P<0.01);葛根素高、中剂量组肾脏组织中SOD、CAT活性升高且MDA含量降低,血清中IL-1和TNF-α含量降低,且高剂量组GSH-Px活性升高,上述均差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论葛根素对肾缺血再灌注大鼠肾脏组织具有保护作用;其机制可能与葛根素能够有效改善抗氧化酶活性、降低氧化应激损伤、抑制炎性反应有关。
- 朱敏杰郝海英陈洁赵京梅郝晓娟
- 关键词:葛根素肾脏缺血再灌注
- 基于Nrf2/HO-1通路探讨金雀异黄酮对糖尿病肾病大鼠肾损伤的影响及机制
- 2023年
- 目的探讨金雀异黄酮对糖尿病肾病大鼠肾组织损伤的影响及其可能的分子机制。方法取雄性SD大鼠55只,随机选择10只作为正常组,其余大鼠采用一次性腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg的方法复制糖尿病肾病模型。将40只成模大鼠随机分为模型组、金雀异黄酮组、鸦胆子苦醇组和金雀异黄酮+鸦胆子苦醇组,每组10只。金雀异黄酮组给予30 mg/kg金雀异黄酮灌胃,鸦胆子苦醇组给予鸦胆子苦醇2 mg/kg灌胃,金雀异黄酮+鸦胆子苦醇组给予30 mg/kg金雀异黄酮和鸦胆子苦醇2 mg/kg灌胃,均1次/d,连续灌胃6周。检测各组大鼠空腹血糖(FPG)水平及肾功能指标[血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和24 h尿微量白蛋白(24h U-mAlb)],计算肾脏指数,HE染色、PAS染色、Masson染色观察肾组织形态,透射电子显微镜观察肾细胞超微结构,分光光度法检测肾组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测肾组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)含量,Western blot法检测肾组织中E2相关因子2(Nrf2)、p-Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、总核因子κB(NF-κB)、胞核NF-κB蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠FPG、SCr、BUN、24hU-mAlb水平和肾脏指数均明显升高(P均<0.05);肾小球肥大、硬化,炎性浸润,胶原沉积,肾小球细胞可见足突肿胀或消失、基底膜弥漫性增厚、线粒体嵴断裂或消失;肾组织中T-SOD、CAT活性均明显降低(P均<0.05),MDA、TNF-α、IL-1β、IL-8含量均明显升高(P均<0.05);肾组织中p-Nrf2、HO-1、NQO1蛋白相对表达量及p-Nrf2/Nrf2比值均明显降低(P均<0.05),胞核NF-κB蛋白相对表达量及胞核NF-κB/总NF-κB比值均明显升高(P均<0.05)。与模型组比较,金雀异黄酮组和金雀异黄酮+鸦胆子苦醇组大鼠FPG、SCr、BUN、24hU-mAlb水平和肾脏指数均明显降低(P均<0.05);肾组织
- 陈洁杨林燕郝晓娟何琦侯世杰
- 关键词:金雀异黄酮糖尿病肾病肾损伤血红素加氧酶1