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艾冬冬
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重组人EGF-IL-18融合蛋白直接竞争ELISA方法的建立
2014年
目的:建立检测给药食蟹猴血清中重组人表皮生长因子-白介素-18 (rhEGF-IL-18)融合蛋白含量的直接竞争ELISA方法,为该融合蛋白的动力学研究提供方法学.方法:用棋盘法确定包被抗体和酶标抗原工作浓度,建立直接竞争ELISA方法,并对其进行方法学评价.结果:包被抗体和酶标抗原的最适工作浓度为4 μg/mL和1∶1 000.建立的标准曲线的曲线范围为100~ 900 ng/mL,R2为0.9898;日内精密度和日间精密度的最大变异系数分别为2.42%和2.20%;回收率95.3% ~103.0%;样品在室温放置1 h、冻融2次和冻存20 d三种条件下检测结果均较稳定,相对标准差均小于15%;定量下限为20.0 ng/mL.结论:本研究建立的ELISA方法稳定且可行.
洪德芳
艾冬冬
丁麟超
吕建新
钟连进
厉保秋
高丽昌
金丽琴
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