陈林华
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 外源性视黄酸对人巩膜成纤维细胞MMP-2及TIMP-2 mRNA水平的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 研究外源性视黄酸（RA）对人巩膜成纤维细胞（HSF）生长的调控,以及对基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶2组织抑制剂（TIMP-2）mRNA水平的影响.方法 体外培养HSF,取第5～7代细胞,经10^-10、10^-9、10^-8、10^-7、10^-6mol/L浓度的RA作用6 d后,进行细胞计数,观察RA对HSF生长的调控情况;用Real-time PCR检测RA作用后HSF中MMP-2、TIMP-2的mRNA水平.对不同浓度组问比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验.结果 RA作用HSF 6 d后,浓度≥10^-9 mol/L RA组对细胞的生长抑制作用差异均有统计学意义（P〈0.05）,随着RA浓度增高,细胞数量逐渐减少,抑制作用呈剂量效应.RA作用6 d后,RA≥10^-8 mol/L时,HSF中MMP-2 mRNA水平有升高趋势,但各组差异无统计学意义（P〉0.05）;RA≥10^-9 mol/L时,TIMP-2 mRNA水平下降（P〈0.05）.结论 RA能够抑制HSF的生长,并可能通过调控TIMP-2的mRNA水平,使巩膜主动重塑.
- 陈林华王教陈晓燕鹿润霞周翔天
- 关键词：维甲酸巩膜基质金属蛋白酶2
- p85a基因对小鼠大脑皮层投射神经元迁移的影响被引量：3
- 2014年
- Pi3k/Akt信号通路是近年来发现的参与细胞增殖、调控的重要通路,Pi3k激活可介导多种细胞功能,Pi3k由p85a和p110构成。该研究通过干扰p85a基因的表达,探讨其在小鼠大脑皮层投射神经元迁移中的作用。首先,构建p85a基因的对照质粒(scramble)、siRNA质粒(sip85a-1、sip85a-2)和过表达质粒(OEp85a);接着转染N2a细胞,48 h后,用定量PCR方法检测p85a基因mRNA的表达情况。随后,将sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒分别转入小鼠大脑,4 d后,借助免疫荧光方法检测皮层神经元的迁移情况。定量PCR结果显示:与对照相比,转染sip85a-1、sip85a-2均能显著降低N2a细胞中p85a基因的mRNA表达,抑制效率约为40%(P<0.05);而转染OEp85a质粒后,能显著增加p85a基因mRNA的表达,约为对照组的12倍(P<0.01)。胚胎电转结果中,各区EGFP阳性神经元数目定量分析显示,sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒均能显著抑制神经元的迁移(P<0.05)。大脑发育阶段中,p85a基因在适当范围内,对平衡神经元迁移过程中起着重要作用。
- 陈林华曹华腾涂晓萌王教李雪
- 关键词：迁移定量PCR
- MicroRNA-1调控人结肠癌细胞周期及其机制的研究被引量：2
- 2017年
- 该研究通过阳离子脂质体介导的方法将microRNA-1(miR-1)转染入人结肠癌细胞HT-29和HCT 116,使其过表达。应用MTS法、克隆形成实验、流式细胞术检测转染后细胞增殖及细胞周期的变化情况,结果发现,miR-1能使HT-29和HCT 116细胞周期滞留在G1期,显著抑制细胞的增殖;通过靶基因预测及荧光素酶分析法预测并确定CCND1(cyclin D1)和CDK6(cyclin dependent kinases 6)是miR-1作用的靶基因。采用Western blot法检测细胞内相关蛋白质表达水平,结果发现,miR-1能下调HT-29和HCT 116中细胞周期相关蛋白CDK2、CDK4、p-Rb(retinoblastoma gene)、E2F1(E2F transcription factor 1)、p-Cdc2(cell division cycle 2)等蛋白质水平。通过人结肠癌裸鼠动物模型检测miR-1对结肠癌细胞体内成瘤能力的改变情况,研究发现,miR-1能在体显著抑制人结肠癌细胞增殖能力。该研究表明,miR-1通过下调靶基因cyclin D1、CDK6的表达,并影响细胞周期相关蛋白CDK2、CDK4的水平,下调了决定细胞周期进程的关键蛋白Rb及Cdc2的磷酸化水平,同时也降低了E2F1蛋白质水平,使细胞周期滞留在G1期,从而抑制了细胞增殖。
- 陈通克陈林华王教王丽花
- 关键词：MICRORNA-1人结肠癌增殖细胞周期
- 两种微量RNA扩增方法的比较研究被引量：2
- 2011年
- 本研究通过比较体外转录和单引物扩增这两种扩增微量RNA的不同方法,以寻找一种高效的扩增方法。我们用两种不同方法分别扩增小鼠大脑全皮层及第五皮层细胞的RNA,扩增的RNA合成cDNA后进行荧光定量PCR实验,根据PCR结果比较两种不同扩增方法的效率。WT-ovation扩增RNA的效率约为IVT效率的2.8倍;IVT方法扩增后,基因D-C值与引物距离mRNA 3'端的长度及mRNA的长度均存在正线性相关(P<0.05),即引物距离mRNA的3'端越近、mRNA越短,基因D-Ct值越低。而WT-ovation方法扩增后,基因D-Ct值与引物距离mRNA 3'端的长度及mRNA的长度均不存在统计学相关性。与IVT方法相比,WT-ovation方法效率更高,扩增时受影响因素较少、更稳定。
- 陈林华赵月娥陈晓燕高英
- 关键词：定量PCR
- 小鼠大脑皮质脊髓投射神经元核糖体蛋白质相关基因表达的研究
- 2014年
- 该研究采用激光显微切割技术从小鼠大脑第五皮层捕获少量皮质脊髓投射神经元,并分析其分子生物学特征。首先,提取神经元微量RNA,再借助WT-ovation试剂盒扩增RNA,随后利用合成的cDNA进行荧光定量PCR实验,分析投射神经元核糖体蛋白相关基因的表达情况。结果发现,与大脑皮层其它皮层组织相比,第五皮层投射神经元内部分核糖体蛋白相关基因的表达相对较高。这表明第五皮层投射神经元可能具有活跃的蛋白质合成功能,是核糖体蛋白质的能量场所,借此维持第五皮层脊髓投射神经元长轴突和大胞体的能量需要。
- 陈林华王丽花王教李雪
- 关键词：投射神经元核糖体蛋白质
