王继峰 作品数:259 被引量:2,516 H指数:28 供职机构: 复旦大学附属上海市第五人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 文化科学 更多>>
脾虚复合肺纤维化影响大鼠肺功能的初步研究 被引量:9 2017年 目的观察灌胃大黄致脾虚后复合博莱霉素造模对大鼠肺功能的影响,以探讨脾虚与肺纤维化的关系。方法将SD大鼠随机分为正常组、脾虚组、模型组、复合组,采用灌胃大黄加饥饱失常30 d的方法建立脾虚模型,然后采用气管内注射博莱霉素(5 mg/kg)复合肺纤维化造模,模拟脾虚证候下罹患肺纤维化。注射博莱霉素4周后检测动物肺功能,计算脏器系数,HE和Masson染色观察肺组织大体及气道病理变化。结果模型组与正常组比较,肺脏质量、肺系数升高(P<0.05),肺动态顺应性(Cydn)、用力肺活量(FVC)、质量FVC下降(P<0.05),第0.4秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(0.4秒率,FEV0.4/FVC%)增加(P<0.05),用力最大呼气流速(PEF)、最大呼气中期流速(MMF)下降(P<0.05),病理显示气管内注射博莱霉素所致肺纤维化为气道中心性分布,小气道内可见上皮细胞脱落及黏液栓。单纯脾虚动物停止脾虚造模后各项肺功能指标正常。脾虚复合组与模型组比较,0.4秒率显著升高(P<0.05),病理显示肺组织纤维化区域占比增加。结论灌胃大黄加饥饱失常30 d造成脾虚是复合气管内注射博莱霉素造成的肺纤维化大鼠限制性通气功能障碍加重的潜在不利因素。 朱曼 康荻 张慧 李彧 唐磊 申萌萌 黄春芳 王继峰 牛建昭 李亚东关键词:博莱霉素 限制性通气功能障碍 脏器系数 钌红染色对大鼠特发性肺间质纤维化的超微结构分析 被引量:1 2005年 目的:观察钌红染色方法标记大鼠特发性肺间质纤维化(id iopath ic pu lmonary fibrosis,IPF)的超微结构的特点。方法:180只SD大鼠随机分为6组,盐酸博莱霉素气管内注射造模,复方鳖甲片高、中、低剂量治疗。分别于7d、14d、28d取材,钌红染色电镜观察。结果:钌红明显标记基底膜和表浅层细胞周围的胶原纤维。使细胞轮廓和内部结构更清晰。7d纵断面既可显示成束的胶原纤维,特别是基膜和细胞之间有成束的胶原纤维堆积。14d上皮细胞外基膜区域性折叠、扭曲或缺损。基板处钌红沉积,呼吸膜增厚。28d基膜厚薄不均匀,完整性破坏。Ⅱ型细胞在三阶段不同病理时期有不同改变。细胞内前胶原增多,粗面内质网扩张,胶原纤维在间质大量堆积,排列纵横交错。结论:钌红染色更清晰显示基底膜和表浅层细胞周围的胶原纤维,更利于观察IPF的纤维分布和厚度。 段斐 牛建昭 王继峰 李健 杨美娟 孔璐 谷晓红关键词:染色法 肺纤维化 胶原 显微切片术 脂多糖诱导大鼠肝星状细胞增殖与提高其胶原表达水平的细胞模型研究 被引量:10 2003年 目的:建立较为全面反映肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)活化效应的细胞模型。方法:应用脂多糖(lipopolysccharide,LPS)刺激体外培养的大鼠HSC。噻唑蓝(MTT)法测定HSC增殖率。免疫组化法显示HSC表达其Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达水平,并进行图象分析。结果:LPS明显刺激HSC的增殖并提高Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平,与对照组比较差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:LPS诱导HSC活化模型能够相对全面地反映HSC活化的效应。 王健 牛建昭 河福金 于世赢 白锦文 李或 赵丽云 赵福建 王继峰关键词:肝星状细胞 细胞增殖 脂多糖 胶原 以小鼠子宫增重实验考察四物汤植物雌激素样作用的配伍规律 被引量:19 2009年 目的用正交设计原理,通过研究不同配伍比例的四物汤(熟地、当归、白芍、川芎)对幼鼠子宫增重和血清雌激素水平的影响,探讨四物汤的植物雌激素样作用。方法将正常性未成熟雌性ICR小鼠,随机分为9个正交实验组,每组12只,分别灌胃按L9(34)正交实验设计配制的9个生药质量浓度为1g·mL-1的四物汤药液,每天1次,连续7天,第8天眼眶取血,分离血清,用ELISA试剂盒检测血清E2、P、FSH水平,分离子宫并称重,计算子宫系数。结果熟地等四味药物对幼鼠子宫系数影响顺序为B>D>C>A,子宫系数增加较大的组合为A3B2C1D2,川芎对幼鼠子宫系数影响有统计学意义;四味药物对幼鼠血清E2水平的影响顺序为D>A>B>C,血清E2水平较高的组合为A3B3C3D2,四味药物对血清E2水平的影响均无统计学意义;四味药物对血清P的影响顺序为A>C>D>B,血清P水平较高的组合为A1B2C2D2,熟地对血清P的影响有统计学意义;四味药物对血清FSH水平影响顺序为D>A>C>B,血清FSH水平较高的组合为A3B2C2D2,川芎对血清FSH水平影响有统计学意义。结论不同配伍比例的四物汤,植物雌激素活性有显著差异,临床应根据患者的具体情况,综合考虑用药。 郝庆秀 王继峰 牛建昭 赵丕文 崔烨 孙丽萍 薛晓鸥关键词:四物汤 植物雌激素 小鼠 子宫增重 性激素水平 二仙汤及其组方中药对幼年大鼠卵巢形态学影响 被引量:15 2010年 目的:通过二仙汤及其组方中药对幼年大鼠卵巢的形态学观察,探讨其对卵巢功能的影响机制。方法:幼年SD大鼠54只,分为正常对照组、阳性对照组、二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、巴戟天组、当归组、黄柏组和知母组9组。各组给药6d后麻醉大鼠,取血清测量卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)的含量,分离摘取双侧卵巢,称重后常规石蜡包埋切片,行HE染色和免疫组织化学染色。结果:阳性对照组、仙茅组和黄柏组卵巢系数与正常组对比增加明显,差异有统计学意义(P<0.05)。仅阳性对照组E2含量升高。HE染色发现阳性对照组、二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、当归组和黄柏组卵泡数量明显增多,其中阳性对照组、仙茅组和黄柏组可见黄体形成。免疫组织化学染色发现雌激素受体α(ERα)在各组大鼠的卵巢颗粒细胞中未见表达,雌激素受体β(ERβ)主要表达于各组大鼠的卵巢颗粒细胞的细胞核中;二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、当归组和黄柏组ERβ表达显著增强(P<0.05)。结论:二仙汤及其方中温肾药(淫羊藿、仙茅),滋阴药(黄柏)和调理冲任药(当归)通过上调卵泡颗粒细胞ERβ表达,促进卵泡发育成熟和排卵。 陶仕英 牛建昭 杨美娟 赵丕文 王继峰关键词:二仙汤 卵巢 雌激素受体 补骨脂等5种中药植物雌激素活性的实验研究 被引量:36 2008年 目的评价补骨脂等5种中药的植物雌激素活性及其可能机制。方法正常Wistar雌性大鼠(刚断乳)96只,随机分为12组(溶剂对照组、己烯雌酚组、5个中药组和5个中药+己烯雌酚组)。各组动物给药4d后处死,计算动物子宫系数和体重增幅;取血并分离血清。利用雌激素受体(ER)阳性MCF7细胞,以MTT法检测含药血清对细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测含药血清对细胞周期的影响。结果①灌胃补骨脂、川牛膝能明显增加大鼠的子宫系数(P<0.05);灌胃补骨脂、川牛膝、红花可使己烯雌酚引起的大鼠子宫系数的升高受到显著抑制(P<0.05);灌胃川牛膝可使大鼠的体重增幅明显上升(P<0.05);②补骨脂、川牛膝、红花、丹参等中药组含药血清均可使MCF7细胞增殖加速(P<0.01),加入ERβ激动剂DPN可减弱其促增殖效应;在拮抗实验中,中药组含药血清对细胞增殖的促进作用较单独使用己烯雌酚的组别有明显下降,加入DPN可进一步增强其下降效应(P<0.05或P<0.01);③补骨脂、川牛膝、丹参、菟丝子等中药组含药血清均可提高细胞增殖指数;各中药+己烯雌酚组含药血清对己烯雌酚引起的细胞增殖指数的增加均无明显的拮抗作用。结论补骨脂、川牛膝、红花、丹参、菟丝子等5种中药均具有一定的植物雌激素作用,但其作用强弱及途径有所差异。 牛建昭 赵丕文 王继峰 于杰 王大伟 沈丽霞关键词:中药 植物雌激素 MTT法 细胞周期 利用亲水富集策略分析人血浆中N-糖基化蛋白及N-糖类型 被引量:5 2013年 蛋白质的N-糖基化是最重要的翻译后修饰之一,许多已知的血浆肿瘤诊断标志物及治疗靶标都是N-糖基化蛋白。针对血浆的糖蛋白质组研究有利于发现新的蛋白标志物。然而,血浆蛋白质浓度分布的动态范围非常宽,且同一位点上的糖链存在微观不均一性,影响了血浆中糖蛋白的鉴定效率。本文利用亲水材料ZIC-HILIC制备亲水富集柱分别对人血浆中的N-糖链和N-糖肽进行富集,并结合碱性反相色谱进行肽段的预分离和高准确度质谱分析,最终在健康人的血浆中鉴定到了299个糖基化蛋白、637个糖基化位点,并识别出31种不同的糖型。在这些鉴定到的糖基化位点中,新发现有107个N-糖基化位点(占总位点数的16.8%)。本方法操作简单,可以有效富集N-糖肽和N-糖,为在血浆中寻找糖蛋白和糖链生物标志物提供了可靠的手段。 马成 潘一廷 张琪 王继峰 钱小红 应万涛关键词:反相色谱 芍药苷对放射线致血虚证小鼠骨髓Epo和G-CSF基因表达的影响 被引量:41 2005年 目的:考察芍药苷对放射线致血虚证小鼠的生血作用及对骨髓Epo、G CSF基因表达的影响,为阐明芍药苷补血作用的分子机制提供依据。方法:采用3.5Gy60 Coγ射线全身1次性照射,制备小鼠血虚证模型,检测外周血象,骨髓集落培养观察并计数CFU GM、BFU E、CFU E、CFU mix ,RT PCR观察并检测骨髓Epo和G CSF基因表达。结果:芍药苷显著升高放射线致血虚证小鼠外周血白细胞数量和骨髓CFU GM、BFU E、CFU E、CFU mix数量,上调骨髓Epo和G CSF基因表达。结论:芍药苷具有生血作用,促进骨髓Epo和G CSF基因的表达可能是其生血作用的机制之一。 郭平 王继峰 王升启关键词:芍药苷 血虚证 造血祖细胞 骨髓 逆转录-聚合酶链反应 三七总皂苷对肺纤维化小鼠血清中Ⅳ-C型胶原透明质酸的干预作用 被引量:6 2010年 目的:研究三七总皂苷对小鼠肺纤维化血清中Ⅳ-C型胶原及透明质酸的的影响。方法:C57BL/6雄性小鼠60只,分为三七总皂苷高、中、低剂量组,强的松组,模型组,假手术组,每组10只。除假手术组外其余各组小鼠气管内一次性滴注盐酸博莱霉素,假手术组小鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后第2天开始给药,持续到处死动物的前一天。三七总皂苷高、中、低剂量组分别为120、60、30mg/kg/d,强的松组为0.56mg/kg,假手术组、模型组分别灌服等体积的生理盐水。于28d后处死,观察比较各组小鼠血清中Ⅳ-C型胶原及透明质酸的含量。结果:模型组小鼠肺组织中Ⅳ-C型胶原、透明质酸含量均明显高于假手术组(P<0.01),与模型组相比,三七总皂苷高中低剂量组均能降低小鼠血清中Ⅳ-C型胶原、透明质酸含量,其中中、高剂量组的降低作用较为显著(P<0.01)。结论:三七总皂苷可通过降低肺纤维化小鼠细胞外基质含量而发挥治疗肺纤维化作用。 孙晓芳 黄春芳 杨长福 牛建昭 段斐 杨美娟 王小波 刘霞 王继峰关键词:三七总皂苷 肺纤维化 透明质酸 从细脚拟青霉分离的新环二肽与新十元环内酯 被引量:3 2014年 利用反相色谱、凝胶色谱和硅胶色谱从细脚拟青霉发酵液中分离得到4个活性化合物.通过核磁共振波谱、质谱、X射线晶体衍射分析和理化数据鉴定化合物1为新环二肽[(3S)-6-苯乙基-3-异丙基-1-甲基-2,5-二酮哌嗪],化合物2为新十元环内酯[(4S,10R)-4-羟基-8-氧代-10-甲基癸内酯],化合物3为Cepharosporolide C,化合物4为Cepharosporolide E.细胞毒性实验结果表明,5μmol/L的化合物1对前列腺癌细胞22RV1和DU-145的抑制率分别为37.8%和38.6%,5μmol/L的化合物2对前列腺癌细胞22RV1和DU-145的抑制率分别为32.5%和40.6%,具有一定抗肿瘤活性. 郑永标 庞海月 王继峰 陈丹霞 施国伟 黄建忠关键词:细脚拟青霉 内酯 细胞毒性