宋革
- 作品数:5 被引量:14H指数:2
- 供职机构:第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- pCDNA3.0载体介导METH1基因对人脐静脉内皮细胞生长的抑制被引量:3
- 2004年
- 目的研究METH1基因对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)体外生长的抑制作用。方法构建真核表达载体pCDNA3.0-METH1,转染肝癌细胞系HepG2中。体外扩增HUVEC,采用MTT法检测HepG2/METH1及HepG2培养的上清对HUVEC增殖的影响。结果成功的构建了真核表达载体pCDNA3.0-METH1,并在HepG2中稳定表达。MTT法结果显示与对照组相比,HepG2/METH1组对HUVEC增殖有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性(P<0.01);而HepG2组对HUVEC增殖有明显的促进作用,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论pCDNA3.0-METH1对HUVEC体外生长具有明显的抑制作用,提示METH1对瘢痕内血管的抑制治疗具有潜在的临床应用价值。
- 张阳鲁开化宋革裴兆辉郭树忠雷永红夏文森张琳西
- 关键词:血管形成HUVEC
- 人血管生成抑制分子的分子克隆与真核表达被引量:11
- 2004年
- 目的 克隆人血管生成抑制分子 (METH1)全长cDNA ,建立稳定表达人METH1分子的哺乳动物细胞系。方法 RT PCR获取人METH1cDNA ,序列测定后克隆人真核表达载体pCDNA3 0中 ,用脂质体转染入HepG2细胞 ,G4 18筛选出稳定表达细胞系 ,用RT PCR与Westernblot分别检测RNA和蛋白表达水平。结果 RT PCR扩增得到预期大小的目的条带 ,序列分析表明成熟肽编码区与发表序列 [GI∶5 72 5 5 0 5 ]完全一致 ;克隆人pCDNA3 0中得到METH1真核表达载体 ,G4 18筛选 3周后得到稳定表达细胞系 ,RT PCR与Westernblot显示METH1在HepG2细胞中有高水平表达。结论 人METH1全长cDNA成功克隆 ,并在哺乳动物细胞系HepG2中获得稳定表达 ,为进一步研究METH1分子对增生性瘢痕血管形成的作用奠定了理论基础。
- 张阳鲁开化郭树忠宋革杨国嵘王臻雷永红
- 关键词:分子克隆真核表达RT-PCR整形外科
- 感染与癌症诱导发生的研究被引量:1
- 2005年
- 张阳宋革张燕
- 关键词:肿瘤炎症细菌病毒
- 炎性细胞和肿瘤细胞分泌的炎性介质
- 2004年
- 张阳宋革鲁开化
- 关键词:肿瘤炎性细胞细胞因子
- 增生性瘢痕血管形成抑制作用中色素上皮衍生因子的分子克隆与真核表达被引量:1
- 2004年
- 目的:克隆人色素上皮衍生因子(PigmentEpithelium-DerivedFactor,PEDF)全长cDNA,建立稳定表达人PEDF分子的哺乳动物细胞系。方法:RT-PCR获取人PEDFcDNA,序列测定后克隆入真核表达载体pCDNA3.0中,用脂质体转染入HepG2细胞,G418筛选出稳定表达细胞系,用RT-PCR与Westernblot分别检测RNA和蛋白表达水平。结果:RT-PCR扩增得到预期大小的目的条带,序列分析表明成熟肽编码区与发表序列完全一致;克隆入pCDNA3.0中得到PEDF真核表达载体,G418筛选3周后得到稳定表达细胞系,RT-PCR与Westernblot显示PEDF在HepG2细胞中有高水平表达。结论:人PEDF全长cDNA成功克隆,并在哺乳动物细胞系HepG2中获得稳定表达,为进一步研究PEDF分子对增生性瘢痕血管形成的作用奠定了理论基础。
- 张阳鲁开化郭树忠宋革雷永红宋宝强夏文森
- 关键词:增生性瘢痕血管形成色素上皮衍生因子基因克隆