全兰平
- 作品数:2 被引量:41H指数:2
- 供职机构:中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 多药耐药相关蛋白反义RNA对耐阿霉素人小细胞肺癌细胞株GLC4/ADR耐药性的调节被引量:4
- 2001年
- 目的 构建表达多药耐药相关蛋白 (MRP)反义RNA的真核表达载体 ,转染耐药细胞株 ,初步探讨其影响多药耐药 (MDR)的作用机理。方法 以MRPcDNA为模板 ,应用PCR扩增MRPmRNA5′端 (含起始子密码 )及MRPmRNA 3′端 (含终止子密码 )片段 ,通过定向克隆方法 ,构建表达MRP反义RNA的两个重组载体。通过Lipofectamine将其导入小细胞肺癌 (SCLC)耐阿霉素 (ADR)的细胞株GLC4/ADR中 ,经G418筛选 ,得到分别含pcDNA3空载 (M0 )、MRPmRNA5′端为靶区的反义RNA(Ma) ,MRPmRNA3′端为靶区的反义RNA(Mb)的 3个细胞克隆。检测细胞内ADR的蓄积改变以及荷瘤裸鼠对ADR的敏感性。结果 经RT PCR检测 ,外源片段可获稳定表达。Ma细胞及Mb细胞中 ,MRP表达分别抑制约 14 0 %和 83 0 % ,且胞内ADR蓄积量均有一定程度的增加 ;对ADR的耐药倍数与对照细胞M0相比 ,分别下降 9.5 %和 2 8.4%。虽然 ,MRP反义RNA对细胞的生长、细胞周期及ADR诱导的早期凋亡均无明显影响 ,但可提高荷瘤裸鼠对ADR的敏感性。结论 MRP反义RNA能抑制MRP蛋白的表达 ,并使转染细胞内ADR浓度增加 ,从而逆转MRP介导的MDR。对于配合化疗 ,提高MRP高表达患者的疗效 ,具有潜在的应用意义。
- 彭向红冯奉仪张维朱红霞刘爽周晓波全兰平徐宁志
- 关键词:小细胞肺癌多药耐药相关蛋白反义RNA阿霉素
- 抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达及其意义被引量:37
- 2005年
- 目的 检测抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达情况 ,并初步探讨survivin表达与食管癌的关系。方法 2 7例新鲜的食管癌组织提取RNA ,利用半定量RT PCR方法 ,检测食管癌中survivin的mRNA表达水平 ,与其相配对的正常组织进行比较分析。通过在食管癌细胞系中转染survivin的显性负突变体 (surT34A) ,观察食管癌细胞在软琼脂中的集落形成能力 ,并利用流式细胞仪分析食管癌细胞对抗凋亡能力。结果 2 7例食管癌组织中 ,有 18例survivin的表达高于配对的正常组织 ,食管癌组织中survivin的表达水平 (2 .0 8± 1.32 )明显高于正常对照组织 (1.2 2± 1.0 9)。在食管癌细胞系中也检测到survivin的表达。转染surT34A的EC970 6细胞在软琼脂中形成的集落数目明显少于对照细胞。survivin过表达可以使得EC970 6细胞在撤血清后凋亡减少 ,而surT34A则使EC970 6细胞凋亡增多。结论 survivin异常高表达与食管癌具有密切相关性。SurT34A可以抑制食管癌细胞的软琼脂集落形成能力 ,并使其对抗凋亡能力减弱 ,部分抑制食管癌细胞的恶性表型。
- 朱红霞王益华周翠琦张果白瑾峰全兰平刘芝华徐宁志
- 关键词:食管癌细胞抗凋亡基因食管癌组织集落形成琼脂