梁至洁 作品数:22 被引量:69 H指数:5 供职机构: 广西医科大学第五附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广西壮族自治区自然科学基金 南宁市科学研究与技术开发计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
纳米脂肪的研究进展及临床应用 被引量:3 2019年 背景:近年来人们对纳米脂肪的研究也逐渐拓宽及拓深,其应用也越来越广。目的:综述近年来纳米脂肪的研究及应用。方法:以"Nanofat、Adipose-Derived Stem Cells、fat grafting"为英文检索词,以"纳米脂肪、脂肪干细胞、脂肪移植"为中文检索词,检索中国知网全文数据库、万方全文数据库、维普期刊全文数据库、Pub Med数据库有关纳米脂肪及脂肪干细胞的文献,保留52篇文献进一步总结分析。结果与结论:综合目前对纳米脂肪的研究,证实纳米脂肪在抗衰老、瘢痕、创面修复、填充等效果明显,但样本数据不大,需要更大、更多的样本及数据支撑。目前制备方法得到的纳米脂肪包括多种成分,具体作用机制还需更深层次的研究,且目前制备方法尚无统一标准,诸多环节如:选取脂肪来源、抽吸脂肪方法、机械乳化过滤脂肪程序及纳米脂肪移植注射后的护理等均有待进一步完善。 易晓林 梁至洁 黎洪棉关键词:脂肪干细胞 脂肪移植 抗衰老 脂肪 秦皮甲素通过下调人类免疫缺陷病毒短转录诱导物连接因子1抑制三阴性乳腺癌细胞增殖 被引量:6 2020年 目的探讨秦皮甲素对三阴性乳腺癌细胞增殖的影响及其分子机制。方法分别以28、56、112、225、450和900μmol/L的秦皮甲素处理三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞24、48和72 h,同时设空白对照组,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力。分别以225、450和900μmol/L的秦皮甲素处理MDA-MB-231细胞48 h,同时设空白对照组,采用倒置显微镜观察细胞的形态变化,采用克隆形成实验检测克隆形成能力,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞中人类免疫缺陷病毒短转录诱导物连接因子1(FBI-1)、p53和p21 mRNA的表达水平,采用Western blot法检测细胞中FBI-1、p53、p21和Ki67蛋白的表达水平。结果与空白对照组相比,经28、56、112、225、450和900μmol/L秦皮甲素处理后MDA-MB-231细胞活性均明显降低,并呈浓度依赖性和时间依赖性。225、450和900μmol/L秦皮甲素处理后,MDA-MB-231细胞皱缩变扁,贴壁差,并出现不完整细胞,脱落,细胞间距变大,其中900μmol/L秦皮甲素组细胞变化最明显;与空白对照组比较,225、450和900μmol/L秦皮甲素组细胞克隆形成率均降低[分别为(77.18±5.13)%、(65.94±4.98)%和(45.92±3.70)%,均P<0.01],FBI-1 mRNA及蛋白表达增高(均P<0.01),p53和p21 mRNA及蛋白表达降低(均P<0.01),Ki67蛋白表达降低(P<0.01),且均呈浓度依赖性。结论秦皮甲素可能通过FBI-1调控细胞周期相关的p53-p21通路,影响DNA复制,从而抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖。 莫淼 陈茂剑 黄怡 蒋玮 覃庆洪 梁至洁 杨伟萍 韦长元关键词:秦皮甲素 三阴性乳腺癌 P21 重组腺病毒介导的绿色荧光蛋白转染对兔脂肪干细胞生长增殖及成脂分化的影响 2016年 目的:探讨携带绿色荧光蛋白的腺病毒载体(Ad—GFP)转染兔脂肪干细胞(rADSCs)后对其生长增殖及成脂分化的影响。方法:取新西兰大白兔(1.5~2.0kg、8~12周龄)腹股沟皮下脂肪垫3mL,采用贴壁法体外分离培养rADSCs。取第3代rADSCs细胞分为Ad—GFP转染组(A组)和未转染的对照组(B组),流式细胞术检测Ad-GFP转染rADSCs的效率。比色法检测两组细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,四氮唑复合物(XTT)比色法检测rADSCs的增殖情况。细胞成脂分化14d后行油红O染色,检测脂肪细胞分化率及细胞内脂滴含量。结果:两组rADSCs表面标志物CD29、CD44、CD90、CD105阳性表达率均在95%以上。不同MOI值rADSCs转染效率不同,当MOI值为10、30、50、100时转染效率分别为11.2%、42.7%、95.3%、97.1%。Ad—GFP转染后的rASCs贴壁后呈梭形,细胞质丰富,保持了良好的正常形态。两组rASCs培养上清液中LDH含量及rADSCs增殖情况比较,差异均无统计学意义(均P〉0.05)。两组细胞分化率和细胞内脂滴含量比较,差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论:Ad—GFP转染rADSCs后,GFP可在细胞内稳定表达,对细胞无明显毒性作用,不影响rADSCs的生长、增殖及成脂化能力,是一种理想的脂肪干细胞示踪标记方法。 陈海 梁至洁 梁一丹 黎洪棉关键词:脂肪干细胞 细胞标记 白藜芦醇通过下调POLD1抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮间质转化 被引量:2 2021年 目的探讨白藜芦醇(RSV)通过下调POLD1对MDA-MB-231细胞上皮间质转化的影响。方法CCK-8检测RSV对MDA-MB-231细胞活性的抑制能力。使用重组慢病毒转染MDA-MB-231细胞构建POLD1-OE及POLD1-NC细胞系,RSV分别刺激各细胞后,蛋白印迹法检测POLD1、EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin及Vimentin的表达;Transwell侵袭和划痕实验分别检测各实验组细胞的侵袭和迁移能力。结果RSV能显著抑制MDA-MB-231细胞的存活率,同时能够降低POLD1、N-cadherin及Vimentin的表达,上调E-cadherin的表达,且明显抑制细胞的迁移和侵袭能力;但上述作用效应在POLD1过表达的MDA-MB-231中被一定程度拮抗。结论RSV能够抑制MDA-MB-231细胞的活性及EMT,下调POLD1是RSV抑制MDA-MB-231细胞EMT的关键机制之一。 王梦欣 梁至洁 梁至洁 万言 蒋洪棉 黎洪棉 黎洪棉 韦长元关键词:白藜芦醇 乳腺癌 上皮间质转化 淫羊藿苷对表皮生长因子诱导的乳腺癌细胞MCF-7上皮间质化调控过程的影响 被引量:4 2021年 目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对乳腺癌细胞MCF-7的作用,以及ICA对表皮生长因子(EGF)诱导的MCF-7细胞上皮间质转化(EMT)的作用及机制。方法:CCK-8法检测ICA对乳腺癌细胞MCF-7存活能力的影响并确定后续试验的干预浓度;设立空白对照组、EGF刺激组、EGF+ICA组;划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验检测EGF及ICA+EGF对MCF-7细胞迁移及侵袭能力的影响;Western Blot检测AKT、p-AKT、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。结果:ICA对乳腺癌细胞MCF-7有杀伤作用,且呈浓度依赖性;各组MCF-7细胞24h愈合率由高到低依次为:EGF刺激组>EGF+ICA组>空白对照组(P<0.01);各组穿过膜的细胞数由高到低依次为:EGF刺激组>EGF+ICA组>空白对照组。与空白对照组比较,EGF刺激组p-AKT、N-cadherin、Vimentin蛋白表达量显著增加(P<0.01),E-cadherin蛋白表达量显著减少(P<0.01)。与EGF刺激组比较,EGF+ICA组p-AKT、N-cadherin、Vimentin蛋白表达量显著减少(P<0.01),E-cadherin蛋白表达量显著增加(P<0.01)。结论:ICA能够抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖。同时ICA还可以抑制EGF所诱导的EMT过程,可能是通过下调PI3K/AKT信号通路实现的。 王梦欣 万言 梁至洁 朱丹丹 黄怡 陈茂剑 朱懋光 韦长元关键词:淫羊藿苷 MCF-7细胞 PI3K/AKT通路 表皮生长因子 乳腺癌 基于SEER数据库分析激素受体对Ⅳ期男性乳腺癌原发病灶切除获益影响 被引量:1 2019年 目的目前对于Ⅳ期男性乳腺癌原发灶手术切除考虑谨慎,但原发灶手术有可能够提高生存率。分析手术与否与Ⅳ期男性乳腺癌预后获益有何相关,并分析其获益因素,为男性乳腺癌诊治提供依据。方法提取美国国立癌症研究所数据库(Surveillance,Epidemiology,and End Results,SEER)1990-01-01-2009-12-31共344例Ⅳ期男性乳腺癌患者数据,采用t检验和χ2检验进行单变量描述性分析,Cox比例风险模型进行单因素分析及多因素分析,以确定与生存的独立因素。Log-rank检验并绘制Kaplan-Meier生存曲线分析手术对预后的影响。结果单因素分析发现,原发部位手术能够使Ⅳ期男性乳腺癌得到生存获益(手术与非手术比较,P<0.001),患者诊断年龄(>65岁/≤65岁,HR=1.580,95%CI:1.268~1.971,P<0.001)与雌激素受体(阳性/阴性,HR=1.965,P<0.001)和孕激素受体(阳性/阴性,HR=1.312,P<0.001)是影响Ⅳ期男性乳腺癌预后的主要保护因素;多因素分析发现,患者年龄、雌激素受体状态、手术与否是显著影响患者预后,均P<0.001。结论Ⅳ期男性乳腺癌患者接受原发灶手术后提高了患者的生存率,其中雌激素受体/孕激素受体阳性患者有生存优势,可为今后男性乳腺癌诊治的参考。 万言 梁至洁 朱丹丹 王梦欣 陈茂剑 韦长元关键词:激素受体 靶向TGF-β1抑制甲状腺癌细胞迁移侵袭能力的实验研究 2022年 探讨转化生长因子-β(Transforming growth factor beta 1,TGF-β1)与甲状腺癌鳞癌细胞增殖及侵袭能力的相关性。方法 选取2018.1~2020.12南宁市第一人民医院甲状腺癌切除术患者的癌组织及相应的癌旁组织病理切片,免疫组化检测并比较TGF-β1的表达。慢病毒转染下,构建TGF-β1表达敲低的甲状腺癌SW579细胞株(SW579/ TGF-β1(-)),以空载转染为对照(SW579/ NC),免疫蛋白印迹试验(Western Blot,WB)检测EMT相关蛋白Vimentin、MMP9及E-Cadherin的表达水平、划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞的迁移及侵袭能力。结果 TGF-β1在甲状腺癌组织中阳性表达率为94.59%(35/37),癌旁组织阳性率为16.21%(6/37),P0.000。WB结果显示,敲低SW579细胞中TGF-β1的表达,能够明显下调EMT相关蛋白Vimentin及MMP9的表达水平(T8.781,P0.001;T3.357,P0.028),并显著提高E-Cadherin的表达水平(T-5.273,P0.006)。划痕试验显示,SW579/ NC细胞的24 h愈合率为(37.25±7.01)%,SW579/ TGF-β1(-)细胞的愈合率为(23.99±1.29)%,P>0.05。Transwell侵袭实验显示,SW579/ NC细胞的穿膜细胞数为127.33±9.61个/视野,SW579/ TGF-β1(-)细胞的穿膜细胞数为37.67±3.51个/视野,P0.000。结论 TGF-β1在甲状腺癌组织中呈高表达,是诊断甲状腺癌的潜在指标;同时TGF-β1在甲状腺癌细胞的EMT及迁移侵袭中发挥了重要的作用,是治疗甲状腺癌的潜在靶点. 蒋洪棉, 梁至洁 罗丽凤 冯振博关键词:癌组织 转染 人参皂苷Rg1促进人乳腺脂肪来源干细胞体外增殖与成骨分化 本文的目的是探讨不同浓度人参皂苷Rg1在体外培养条件下对正常人乳腺脂肪来源干细胞(human breast adipose-derived stem cells,HBASCs)增殖和成骨分化的影响.HBASCs具有成骨分... 黎洪棉 梁至洁 池刚毅 黄海 邓国雄 彭契六关键词:人参皂苷RG1 成骨分化 基质细胞衍生因子1α诱导脂肪来源干细胞迁移促进糖尿病缺血下肢肌肉修复的实验研究 被引量:2 2023年 背景与目的:基质细胞衍生因子1α (SDF-1α)是一种定向诱导细胞迁移的趋化因子,研究显示,间充质干细胞(MSCs)在受损组织中可以沿着SDF-1梯度迁移到损伤部位并参与组织修复,然而目前尚缺乏SDF-1α诱导脂肪来源干细胞(ASCs)对糖尿病缺血下肢进行组织修复的体内研究。因此,本研究探讨SDF-1α促进大鼠脂肪来源干细胞(r ASCs)向糖尿病大鼠缺血下肢肌肉组织迁移及对组织修复的影响。方法:取SD大鼠脂肪组织分离培养rASCs,行细胞形态观察,鉴定成脂、成软骨及成神经分化能力,并使用带绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒转染和标记r ASCs。将大鼠用STZ法构建糖尿病模型,并结扎大鼠的右下肢股动脉造成下肢缺血后,随机分为两组,通过尾静脉向两组大鼠体内注射r ASCs,其中一组在患肢中段部位肌肉处注射SDF-1α蛋白(SDF-1α+rASCs组),另一组则用同样方式注射等量磷酸盐缓冲溶液(rASCs组)。治疗后的第1、2周行大鼠双下肢血流量检测,计算及比较各组大鼠的缺血下肢-健侧下肢血流比值。在第4周时处死大鼠,取缺血部位的肌肉组织行HE染色,观察不同治疗方法组中肌肉组织的排列情况。以因子Ⅷ(FⅧ)作为微血管的标记,行免疫荧光染色,荧光显微镜下观察组织中FⅧ及GFP的分布情况。结果:所培养的细胞呈长梭形或多角形样生长,并可向脂肪、软骨、神经细胞多向分化,鉴定为rASCs。糖尿病下肢缺血大鼠下肢血流量检测结果显示,在治疗后第1周SDF-1α+rASCs组的缺血下肢-健侧下肢血流比值明显高于r ASCs组(0.33±0.03 vs. 0.26±0.02,P=0.016),治疗后第2周可发现上述差异进一步扩大(0.60±0.02 vs. 0.47±0.01,P=0.050)。HE染色结果显示,在治疗后第4周SDF-1α+rASCs组大鼠的肌肉组织排列更为整齐。免疫荧光结果显示,SDF-1α+rASCs组的骨骼肌组织中r ASCs的数量在治疗后第4周明显高于rASCs组(P<0.05),还能观察到红色荧光(FⅧ 黄东琳 梁至洁 朱丹丹 蒋洪棉 宁艳 黎洪棉关键词:缺血 下肢 糖尿病 趋化因子CXCL12 间质干细胞 淫羊藿苷优化大鼠脂肪干细胞促进超长随意皮瓣存活的实验研究 被引量:1 2022年 目的 探讨淫羊藿苷(ICA)优化大鼠脂肪干细胞(rASCs)促进超长随意皮瓣存活的作用及机制。方法 选择6周龄雌性健康无特定病原体(SPF)级SD大鼠作为实验动物。提取rASCs并鉴定其多向分化能力及表面标志物。通过蛋白免疫印迹(WB)实验检测不同浓度ICA(0、0.1、1、10μM)对rASCs中血管生成因子[血管内皮生长因子(VEGF)、血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)、成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)、胰岛素样生长因子-2(IGF-2)]表达的影响。设置rASCs组(予未处理的rASCs)、ICA+rASCs组(予1μM ICA预处理的rASCs)及空白对照组(予等体积PBS),每组3只大鼠,根据分组在皮瓣蒂部注射相应细胞悬液。于治疗后7、14、28 d评估皮瓣存活情况。治疗后28 d取皮瓣组织行组织学及WB实验,检测组织中微血管密度(MVD)、胶原含量及各血管生成因子的表达情况。结果 rASCs具有成脂、成骨和成软骨分化的能力,CD29及CD44呈高表达,不表达CD45。WB结果提示ICA处理能显著提高rASCs中血管生成因子的表达(P<0.05)。动物实验结果显示,与空白对照组比较,rASCs组及ICA+rASCs组治疗后7 d、14 d的皮瓣存活面积比更高(P<0.05);在治疗后28 d,仅ICA+rASCs组的皮瓣存活面积比显著高于空白对照组(P<0.05)。组织学实验结果显示,与空白对照组相比,rASCs组和ICA+rASCs组的皮瓣组织结构排列更为紧密,MVD、胶原含量显著提高(P<0.05)。WB结果显示,rASCs组和ICA+rASCs组的VEGF、PDGF-BB和FGF-2蛋白表达水平均显著高于空白对照组(P<0.05),且ICA+rASCs组的VEGF、PDGF-BB蛋白表达水平较rASCs组更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ICA能够提高rASCs血管生成因子的表达水平,这可能是其优化rASCs促进大鼠超长随意皮瓣存活的机制。 梁至洁 黄东琳 朱丹丹 易晓林 宁艳 蒋洪棉 罗丽凤 黎洪棉关键词:脂肪来源干细胞 淫羊藿苷 超长随意皮瓣 血管新生