吴乐园
- 作品数：10 被引量：37H指数：4
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗乙型肝炎病毒双质粒基因疫苗、其制备方法及应用
- 本发明公开了一种抗乙型肝炎病毒双质粒基因疫苗、其制备方法及其应用，双质粒基因疫苗由含粒细胞或巨噬细胞集落刺激因子GM-CSF信号序列的分子蛋白基因真核表达质粒HBV pS<Sub>2</Sub>.S，和含无关中间序列的人...
- 陈光明谢宗法杨富强何晓嫱黄英吴乐园
- 文献传递
- DNA疫苗免疫治疗作用及安全性实验研究
- 陈光明杨富强何晓嫱莫国玉黄明黄英吴乐园饶桂荣谢宗法刘惠萍
- 该课题组构建了HBV preS2.S重组质粒，并以此为DNA疫苗研究基础探讨细胞因子融合蛋白（IL-2/INF-γ）质粒pFP的免疫佐剂作用，同时利用电脉冲（EP）技术探讨提高双质粒DNA在体细胞的转染效果的实验充分说明...
- 关键词：
- 关键词：DNA疫苗细胞因子电转染
- 治疗型双质粒HBV DNA疫苗的构建及其鉴定被引量：16
- 2003年
- 为构建以人白细胞介素 2 /γ干扰素(hIL 2 /hIFN γ)融合基因为佐剂的治疗型HBVDNA疫苗 ,采用DNA重组技术分别构建含有HBV包膜中蛋白 (preS2 ·S)抗原和hIL 2 /hIFN γ融合蛋白的真核表达质粒即pcDNAS2 ·S和pcDNAIIF ,酶谱和测序分析表明克隆的preS2 ·S和hIL 2 /hIFN γ融合蛋白基因片段的方向、序列与预期相符。用脂质体转染试剂转染COS 7细胞 ,并用ELISA检测转染细胞培养上清中目的基因表达水平。结果显示 ,质粒转染后 4 8h达峰值 ,分别为HBsAg(P/N) =7.6 3、IL 2 =1 0 .35ng/ml、IFN γ =7.90ng/ml。以CTLL 2依赖细胞株/MTT比色法和微量细胞病变抑制法 (WISH VSV)检测pcDNAIIF转染后 4 8h培养上清中IL 2及IFN γ活性 ,结果分别为 998U/ml和 2 4 9U/ml。证明构建的重组质粒pcDNAS2 ·S和pcDNAIIF结构正确 。
- 何晓嫱陈光明黄英杨富强吴乐园莫国玉
- 关键词：疫苗DNA肝炎病毒乙型治疗型
- 电脉冲肌注法增强治疗型HBV DNA疫苗免疫效果的实验研究被引量：6
- 2003年
- 为提高细胞内质粒DNA的导入率并增强DNA疫苗诱导的免疫效果 ,采用在体电脉冲肌注法接种治疗型HBVDNA疫苗。结果接受电脉冲(2 0 0V/cm)肌注的 8只BALB/c小鼠局部肌肉组织荧光素酶活性为 1 6 1 70± 1 2 5 33RLU ,未加电脉冲对照组为 8 0 2±8 0 0RLU ,相差 4个数量级 ,差异具非常显著性 (P <0 0 0 5 ,t=3 6 74 )。新西兰兔电脉冲肌注法接种后第 2、4周 ,双质粒 (pS2 ·S +pFP)大剂量组 (5 0 +5 0 μg/只 )血清抗 HBs阳性动物数明显较同期未加电脉冲对照组 (大剂量 :1 0 0 0 +1 0 0 0 μg/只 )高 ,差异具显著性意义 (P <0 0 5 ) ;第 1 3周时 ,电脉冲免疫大 (5 0 +5 0 μg/只 )、中 (2 5 +2 5 μg/只 )、小 (5 +5 μg/只 )剂量组均有血清抗 HBs阳性鼠出现 ,分别为 5、4和 4 只 ,组间阳性动物数并无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,但均较同期的对照组高 ,并具有显著性意义 (P <0 0 5 )。恒河猴电脉冲肌注法接种后 8周血清抗 HBs阳性动物数为大剂量 (1 0 0 0 +1 0 0 0 μg/只)组 3/ 3只 ,中剂量 (5 0 0 +5 0 0 μg/只 )组 2 / 3只 ,小剂量 (1 0 0 +1 0 0 μg/只 )组 0 / 3只 ,大剂量组与小剂量组及非电脉冲对照组之间比较差异具有显著性意义 (P <0 0 5 ) ;至免疫第 1 3周时 ,电脉冲免疫的大、中、小
- 杨富强赵勇刚陈光明何晓嫱吴乐园莫国玉
- 关键词：乙型疫苗EP
- HBV DNA疫苗诱导健康及HBV转基因小鼠细胞免疫应答被引量：2
- 2003年
- 采用HBVCTL表位多肽体外刺激或冲击免疫效 (E)、靶(T)细胞 ,以观察DNA疫苗诱导健康及HBV转基因 (Tg)小鼠细胞免疫效果。结果发现 ,DNA疫苗能有效诱导健康BALB/c小鼠CTL活性 ,活性强弱与E/T比值及其上清液中IFN γ分泌水平有一定关系。HBsAg表位多肽(pp2 0 )体外刺激DNA疫苗免疫组效应细胞 ,培养上清IL 1 2释放水平 (2 1 1 3± 39 8pg/ml)明显较对照组 (86 7±2 7 1 pg/ml)高(P <0 0 5 ,t=4 4 82 )。DNA疫苗免疫HBVTg小鼠诱导CTL活性 (1 2 7%± 6 7% )较蛋白疫苗免疫对照组(1 7%±3 2 % )高(P <0 0 1 ,t=3 6 2 9) ;其效应细胞体外受 pp2 0刺激后分泌IL 1 2水平 (4 0 0± 30 1pg/ml)明显高于同期空载体免疫对照组 (3 8±3 0 pg/ml,P <0 0 5 ,t=2 376 )。采用在体电脉冲法DNA疫苗接种的 5只HBVTg小鼠中 ,于 4周时有 2只血清HBsAg阴转 ,并于 8周时出现抗 HBs阳性 ,而对照组中无一例血清HBsAg发生变化。表明HBVDNA疫苗能有效诱导健康及HBVTg小鼠细胞免疫应答 。
- 杨富强陈光明何晓嫱吴乐园莫国玉黄英
- 关键词：肝炎乙型
- 抗乙型肝炎病毒双质粒基因疫苗、其制备方法及应用
- 本发明公开了一种抗乙型肝炎病毒双质粒基因疫苗、其制备方法及其应用，双质粒基因疫苗由含粒细胞或巨噬细胞集落刺激因子GM－CSF信号序列的分子蛋白基因真核表达质粒HBV pS<Sub>2.</Sub>S，和含无关中间序列的人...
- 陈光明谢宗法杨富强何晓嫱黄英吴乐园
- 文献传递
- 哺乳动物眼睛提取物
- 本发明涉及的是一种哺乳动物眼睛的提取物,具体地讲,它是用生化技术从动物眼睛组织中提取的多肽物质,分子量约为10KD;本发明所述的眼睛提取物有维持视网膜神经元存活,促进神经元发育和易化突起生长的作用,可以用于视神经变性和视...
- 陈光明谢宗法杨富强黄英吴乐园
- 文献传递
- 欣洛维对实验性胃溃疡的治疗效果观察被引量：8
- 1997年
- 欣洛维对实验性胃溃疡的治疗效果观察５１０６０２广州解放军第４５８医院杨富强陈光明吴乐园黄英王东晓关键词胃溃疡；治疗学中国图书资料分类号Ｒ６５６．６２欣洛维（ＴＰ）由健康乳猪新鲜胸腺提取，是具有较强促细胞增殖活性的蛋白类口服制剂，临床治疗胃、十二指肠溃...
- 杨富强陈光明吴乐园黄英王东晓
- 关键词：胃溃疡欣洛维药物疗法
- 治疗型HBV基因疫苗免疫效果的研究被引量：9
- 2002年
- 为探索治疗型HBV基因疫苗治疗慢性乙型肝炎的可行性 ,自行构建了HBV包膜蛋白前S2 ·S基因及人IL 2和IFN γ融合蛋白基因真核表达质粒 ,并将双质粒融合蛋白作为佐剂组合成治疗型HBV基因疫苗 ,在健康小鼠、HBV转基因 (Tg)小鼠、新西兰兔和恒河猴体内进行了免疫效果试验。结果发现 :①特异性CTL活性提高 ;②对HBsAg特异性T细胞增殖能力提高 ,HBsAg 3 0 μg /ml对pcS2 ·S免疫的小鼠脾细胞的刺激指数 (SI =5 6± 0 9)明显较空白质粒pcDNA3 1组 (SI =2 0± 0 5 )为高 (P <0 0 1) ,免疫组的IL 2 /IFN γ分泌水平为 (2 2 6 3± 41 0 5pg/ml) /(5 1 1± 7 7pg/ml) ,明显较空白组的 (69 0± 2 2 1pg/ml) /(0 9± 0 7pg/ml)为高 (P <0 0 1) ;③HBV基因疫苗免疫健康小鼠局部引流淋巴结中DCs的诱导HBsAg致敏T细胞增殖指数 (4 2 0 )较pcDNA3 1组 (2 5 5 )为高 ;⑤用在体电脉冲法注射治疗型HBV基因疫苗后 ,检测血清抗 HBs水平 ,无论是小鼠、兔还是猴均有明显提高。提示该治疗型HBV基因疫苗能较好地诱导体液和细胞免疫 。
- 陈光明杨富强何晓嫱李治刚吴乐园莫国玉黄英谢宗法
- 关键词：免疫疗法免疫应答动物实验乙型肝炎
- 细胞介素融合蛋白质粒促进乙肝病毒DNA疫苗诱导的抗体产生被引量：4
- 2001年
- 目的:初步评价人白细胞介素融合蛋白质粒(pFP)以不同方式和剂量,联合乙肝DNA疫苗(pS_2.S)1次性接种诱导健康小鼠体液免疫应答的效果,并探讨其作用机制。方法:第1批分为pS_2.S(10μg.只^(-1))与pFP(10μg.只^(1))同时混合,于pFP后或前3日及分左、右侧胫前肌注射4种方式。第2批为不同剂量的pFP与一定剂量(10μg.只^(-1))的pS_2.S混合共注射。第3批为不同剂量pS_2.S与pFP按1:1混合共注射免疫实验。结果:pFP与pS_2.S混合共注射免疫效果最佳,以此方式改变pFP剂量联合pS_2.S免疫2、4周时,血清抗-HBs阳性例数及水平以2者剂量按1:1配伍为最高,按此配伍免疫4周时,高(H)、中(M)、低(L)剂量组血清抗-HBs阳性率均为100％,而L组血清抗-HBs水平(51.1±23.8)mIu·ml^(-1)均较M组(217.4±64.1)mIu·ml^(-1)及L组(212.1±124.6)mIu·ml^(-1)低,差异具有显著性(t=7.168,P<0.01;t=2.838,P<0.05)。联合免疫接种2天后,分离采集各组10只小鼠局部引流淋巴结(LN),淋巴细胞及树突状细胞(DCs)计数结果,pS_2.S+pFP组DCs密度及其占LN细胞的百分比均较pS_2.S+pcDNA3.1组高。结论:pFP与pS_2.S剂量按1:1配伍混合共注射免疫效果最佳,pFP可能通过促进局部组织抗原呈递功能较强的DCs的增殖及活性而达到其佐剂效应。
- 杨富强陈光明何晓嫱李治刚吴乐园黄英
- 关键词：白细胞介素类树突细胞DNA疫苗抗体
