李巍
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- TGF-β1在黑色素瘤血清中的异常表达及其对肿瘤细胞凋亡的影响被引量：1
- 2016年
- 目的:研究TGF-β1在黑色素瘤细胞中的作用,为可能的黑色素瘤分子靶向治疗提供理论依据。方法:分别收集黑色素瘤病人与正常人血清,去除Ig G、白蛋白等高丰度蛋白,液相分离后质谱检测,筛选血清差异蛋白。筛选出TGF-β1后进行ELISA验证。进一步构建TGF-β1稳定高表达的黑色素瘤细胞(A-375及SK-MEL-1),利用荧光定量PCR和Western blot进行验证。采用PIAnnexin V双染及流式细胞术分析TGF-β1高表达对黑色素瘤细胞凋亡的影响。结果:与正常人血清对照组比较,共鉴定了84个黑色素瘤相关的血清差异蛋白,其中33个蛋白上调,49个蛋白下调(TGF-β1明显下调),ELISA结果验证了TGF-β1在黑色素瘤病人血清中表达水平相对于健康对照下调2.3倍(P<0.05)。荧光定量PCR和Western blot验证显示构建的TGF-β1稳定高表达的黑色素瘤细胞A-375及SK-MEL-1中TGF-β1 m RNA和蛋白均较对照A-375及SK-MEL-1细胞明显升高(P<0.05或P<0.01);与正常对照组细胞比较,TGF-β1高表达时A-375及SK-MEL-1细胞凋亡率均升高(P均<0.01)。结论:TGF-β1在黑色素瘤病人中表达水平显著降低,当其表达水平升高时可诱导黑色素瘤细胞凋亡,提示TGF-β1可能作为黑色素瘤治疗的潜在靶分子。
- 周启明李巍李巍袁建辉赵艳熊东林
- 关键词：黑色素瘤蛋白质组学TGF-Β1细胞凋亡
- miR-21抑制黑色素瘤细胞凋亡的机制研究被引量：3
- 2017年
- 目的验证黑色素瘤患者与正常人血清中miR-21水平差异,明确其在黑色素瘤细胞凋亡中的作用,为探索黑色素瘤潜在的治疗靶标提供理论基础。方法分别采集黑色素瘤患者与正常人血清样本,提取microRNA后利用qRT-PCR分析miR-21在血清中的水平,同时采用ELISA法检测其靶基因PDCD4在血清中的含量。构建miR-21稳定抑制的黑色素瘤细胞株,进一步分析其对PDCD4表达的影响。采用流式细胞术分析miR-21对黑色素瘤细胞凋亡的影响。结果 miR-21在黑色素瘤患者血清中的表达是阴性对照组的(4.62±2.42)倍,其靶基因PDCD4表达是阴性对照组的(0.36±0.21)倍,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。miR-21在黑色素瘤细胞中表达被抑制时,PDCD4在A-375和SK-MEL-1细胞中的表达分别是阴性对照组的(1.69±0.39)和(2.20±1.06)倍,细胞凋亡水平分别是空白质粒对照组的(2.82±0.24)、(2.26±0.23)倍,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。结论 miR-21在黑色素瘤患者血清中异常升高,推测其能够抑制凋亡蛋白相关蛋白PDCD4的表达,进一步抑制黑色素瘤细胞凋亡,提示miR-21可能作为黑色素瘤治疗的潜在靶分子。
- 周启明李巍袁建辉赵艳段江曼熊东林
- 关键词：黑色素瘤微RNAS细胞凋亡
