张明智
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心更多>>
- 发文基金：协和青年科研基金全球变化研究国家重大科学研究计划留学人员科技活动项目择优资助经费更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 利用CRISPR/Cas9技术建立诱导性敲除MEIS1基因的HEK293T细胞株
- 2016年
- CRISPR/Cas9是新一代基因组编辑技术,可简便快捷地在哺乳动物细胞对基因进行敲除、敲入。但常规的CRISPR/Cas9表达系统直接转染效果差、病毒包装效率低,极大地限制了CRISPR/Cas9系统的广泛使用。该研究应用Tet-on系统,建立了Dox诱导Cas9表达的293T细胞株,命名为293T-i Cas9。MEIS1(myeloid ectropic viral integration site 1)是TALE(three amino acid loop extension)同源域家族的转录因子,其在白血病发生发展、胚胎造血系统发育及神经系统发育中有重要作用,但其作用机制仍未完全明确。将靶向MEIS1 Exon3的sg MEIS1表达载体转入293T-iCas9,SURVEYOR实验和Western blot检测结果表明,sg MEIS1有效地指导Cas9进行基因组编辑。最终经测序和Western blot结果证明,成功建立了MEIS1敲除细胞株,这为研究MEIS1的功能提供了重要的工具。
- 张明智王梦鸽王洪涛苏培刘鑫张磊升刘翠翠王钰吴丹周家喜彭莎
- 关键词：基因敲除
