王钧
- 作品数：10 被引量：29H指数：2
- 供职机构：中国科学院西北高原生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海省科技计划项目青海省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选被引量：2
- 2017年
- 以改良CTAB法提取水葫芦苗基因组DNA为模板,利用正交设计试验对影响ISSR-PCR反应体系的5个因素(TaqDNA聚合酶,dNTP,引物,模板及Mg^(2+))进行了优化筛选。经极差分析和方差分析,最终建立了水葫芦苗ISSR-PCR的最佳反应体系。结果表明,总体积20μL的反应体系中各因素浓度分别为:TaqDNA聚合酶0.025 U/μL、Mg^(2+)1.5 mmol/L、dNTP 1.0 mmol/L、引物0.5μmol/L、模板DNA 1.5 ng/μL。通过筛选得到10条扩增条带清晰的ISSR引物,并通过梯度PCR确定了各引物的最适退火温度。在此基础上对循环次数进行优化,最终确定最佳循环次数为40次。
- 王建科李毅李毅胡延萍石琳王莉
- 关键词：ISSR-PCR正交设计
- 互助北山国家森公园林下枯落物及土壤水源涵养能力被引量：1
- 2021年
- 【目的】研究青海省互助北山国家森林青扦,白桦,山杨与青扦×白桦×山杨混交林林下枯落物及表层土壤水源涵养功能,以期为本地区水土保持,针阔混交奠定数据与理论基础.【方法】通过建立28 m×28 m树样方,采集枯落物与土壤样品,进行室内浸泡与渗透法测定相关指标.【结果】林下落物层最大持水量表现为:白桦青扦山杨混交林>山杨纯林>白桦纯林>青扦纯林.枯落物浸泡时间与持水量之间合对数函数模型[Q=alnt+b(R^(2)>0.91)],浸泡时间与持水速率之间符合幂函数模型[V=Kt^(n)(R^(2)>0.99)].表层土壤层(0~5 cm)最大水量表现为:白桦青扦山杨混交林>白桦纯林>山杨纯林>青扦纯林.不同林地的表层土壤容重在0.28~0.47 g/cm^(3)之间,总孔隙度在57.26%~76.51%之间.【结论】从枯落物与表层土壤的持水指标、生物量以及渗透率等指标来看,白桦青扦山杨混交林水源涵养功能优于3种纯林.
- 贺睿王钧钱前张会轩胡延萍胡延萍
- 关键词：枯落物表层土壤水源涵养功能
- 北山林场不同林分表层土壤化学性质与细菌群落差异分析
- 2023年
- 为探究青海互助北山林场内典型纯林表层土壤化学性质与细菌群落差异,选取林区内山杨、云杉、青扦和白桦四种林分为研究对象,用铝盒与环刀在28 m×28 m树样方内沿对角线每隔10 m分别取林下土壤样本,采用PacBio平台的16S三代测序技术对土壤细菌16S rRNA的V1~V9区域进行高通量测序和生物信息学分析。结果表明:不同林分间除有机质外其他化学性质均存在显著性差异(P<0.05)。四种林分聚类后共得到2531个OTU;细菌α多样性结果表明云杉的Shannon指数、Chao1指数和ACE指数显著低于白桦、青扦、山杨;β多样性分析表明四种林分表层土壤细菌在结构组成上相对稳定且存在差异;四种林分表层土壤中优势菌门为变形菌门(Proteobacteria),优势菌属为不明酸杆菌(unidentified_Acidobacteria)。通过对本地区典型纯林表层土壤化学性质与细菌群落进行初步研究,可对青海互助森林土壤的组成以及树种改造提供数据参考。
- 贺睿王钧钱前张会轩胡延萍胡延萍
- 关键词：北山林场表层土壤化学性质细菌群落物种组成
- 云生毛茛ISSR-PCR体系优化与引物筛选被引量：8
- 2016年
- 旨在建立稳定可靠的云生毛茛ISSR-PCR反应体系。采用正交试验设计方法,对影响云生毛茛ISSR-PCR扩增结果的Mg2+、d NTP、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA五个因素进行优化筛选,对反应程序进行优化,建立适用于云生毛茛的最佳反应体系和扩增程序,并对反应体系和扩增程序进行验证;在此基础上筛选多态性好的ISSR引物,采用梯度法筛选各个引物的最适退火温度。结果表明,云生毛茛20μL ISSR-PCR的最佳反应体系为:模板DNA 30 ng,Mg2+1.95 mmol/L,Taq DNA聚合酶0.04U/μL,d NTP 0.150 mmol/L,引物0.5μmol/L;最佳反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性20 s,49.6-60.6℃复性1 min,72℃延伸100 s,38个循环;72℃下延伸6 min。在优化的反应体系和反应程序条件下,从100条ISSR引物中筛选获得16条ISSR扩增引物,并确定了引物各自的最适退火温度。经过不同居群云生毛茛的验证,证明优化后体系扩增条带清晰且重复性好,可用于后续云生毛茛遗传多样性的研究。
- 石琳胡延萍王建科王钧许小宁李毅王莉
- 关键词：ISSR-PCR正交实验设计引物筛选
- 青藏高原珍稀藏药水母雪莲药材DNA微量提取方法优化被引量：2
- 2016年
- 本研究采用改良CTAB法、改良SDS法、高盐低p H法提取自然风干的水母雪莲植株的基因组DNA,并对提取方法进行优化筛选出适合于水母雪莲药材DNA的提取方法。研究表明改良CTAB(CTAB浓度为2%,PVP浓度为1%,β-巯基乙醇浓度为2%)法所提取的基因组DNA得率较高,且使用氯仿/异戊醇抽提两次时提取出的DNA质量较好,能够满足ISSR分析要求。在此基础上对实验材料进行预处理,优化获得了完全适用于水母雪莲风干药材DNA提取的一整套提取流程。该方法能够有效去除次生代谢产物对DNA提取的影响,且对原材料消耗较少,可以应用于后续水母雪莲种质资源鉴定和遗传多样性分析。
- 王钧胡延萍王建科石琳杨文韬杨文韬李毅
- 关键词：水母雪莲改良CTAB法前处理
- 紫花苜蓿种子萌发过程中对不同盐胁迫的响应被引量：14
- 2018年
- 本试验以6种盐溶液(NaCl,Na_2SO_4,KCl,K_2SO_4,CaCl_2,NaHCO_3)对紫花苜蓿种子进行胁迫处理,研究不同盐胁迫下紫花苜蓿种子的发芽率、发芽指数、平均发芽时间、盐害率及根长抑制率的差异。结果显示,紫花苜蓿种子的发芽率、发芽指数随盐溶液浓度增加而降低;平均发芽时间、盐害率和根长抑制率随盐浓度的升高而增加。通过分析得出紫花苜蓿种子发芽过程中对不同盐胁迫的响应浓度分别为:NaCl 25 mmol/L,K_2SO_450 mmol/L,CaCl_2100 mmol/L;耐盐极限浓度分别为:NaCl 190.97 mmol/L,Na_2SO_492.84 mmol/L,KCl353.86 mmol/L,K_2SO_4160.68 mmol/L,CaCl2260.55 mmol/L,NaHCO_3114.77 mmol/L。紫花苜蓿种子萌发过程中对不同盐分胁迫的耐受性大小依次为:NaHCO)3>Na_2SO_4>K_2SO_4>NaCl>KCl>CaCl_2。
- 王建科王钧王钧李毅胡延萍李毅
- 关键词：紫花苜蓿盐胁迫种子萌发发芽率发芽指数
- 水母雪莲ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选被引量：1
- 2016年
- 目的优化并建立适合于水母雪莲的ISSR-PCR反应体系并筛选出稳定的ISSR引物。方法采用L16(45)正交设计方法,以Taq DNA聚合酶浓度、d NTP浓度、模板DNA浓度、引物浓度、Mg^(2+)浓度5种因素4个水平对水母雪莲ISSRPCR反应体系进行优化;并对反应体系进行验证。采用优化后的反应体系筛选出条带清晰且稳定的ISSR引物,通过退火温度梯度试验确定最佳退火温度。结果最终确立了水母雪莲20μl ISSR-PCR最佳反应体系,即包含Taq DNA聚合酶0.7U、d NTP 0.125mmol/L、引物0.3μmol/L、模板DNA 40ng、Mg^(2+)1.5mmol/L。在此基础上,从84条ISSR引物中筛选出条带清晰且稳定的8条引物,并通过梯度PCR反应确定最佳退火温度。结论经过11份水母雪莲种质验证,证明所建立的体系稳定可靠,可用于后续水母雪莲遗传多样性分析和种质资源鉴定。
- 王钧王建科石琳胡延萍杨文韬李毅王莉
- 关键词：水母雪莲ISSR-PCR正交设计引物筛选
- 伏毛铁棒锤DNA分离及ISSR-PCR体系优化
- 2022年
- 为了获得伏毛铁棒锤稳定可靠的ISSR-PCR反应体系,本研究对总DNA提取的CTAB法进行改良,并采用正交试验设计方法,对影响伏毛铁棒锤ISSR-PCR扩增结果的Taq DNA聚合酶、Mg^(2+)、dNTP、引物、模板DNA五个因素进行优化。在此基础上筛选多态性好的ISSR引物,并用梯度法确定各个引物的最适退火温度。结果显示:改良CTAB法所提DNA的质量和纯度高;伏毛铁棒锤20μL ISSR-PCR最佳反应体系为:0.6 U Taq DNA聚合酶,1.5mmol/LMg^(2+),0.125mmol/LdNTP,0.5μmol/L引物,30 ng模板DNA;以最佳反应体系为基础,从ISSR引物(UBC801~UBC900)中筛选获得12条多态性好的ISSR扩增引物,并确定了各引物的最适退火温度。该最佳反应体系能在伏毛铁棒锤不同样品中扩增出清晰且重复性好的条带,可用于后续伏毛铁棒锤遗传多样性的研究。
- 张会轩李文靖王钧贺睿李毅李毅
- 关键词：ISSR-PCR正交试验设计引物筛选
- 一种唐古特大黄查尔酮合酶Rt-CHS1基因、蛋白质及克隆方法
- 本发明涉及一种唐古特大黄查尔酮合酶Rt‑CHS1基因、蛋白质及克隆方法，具体涉及生物基因克隆技术领域，采用RT‑PCR与RACE技术相结合的方法，对唐古特大黄Rt‑CHS1基因进行了研究，首次从唐古特大黄根中克隆得到Rt...
- 胡延萍李毅王莉王钧钱前
- 文献传递
