朱淑芬
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:内蒙古医科大学附属医院更多>>
- 发文基金:内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 绵羊TERT基因修饰骨髓间充质干细胞生物学特性
- 2016年
- 目的将绵羊端粒逆转录酶(TERT)基因表达载体pcDNA3.1-EGFP-TERT转入绵羊骨髓间充质干细胞(BMSCs)中,进一步研究TERT在BMSCs永生化过程中的作用。方法用RT-PCR技术扩增出带EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的TERT基因,连接到pcDNA3.1-EGFP真核表达载体。脂质体转染到BMSCs中,G418筛选出转染成功细胞,进行传代培养、生长曲线的测定以及遗传稳定性分析。结果扩增得到的TERT基因cDNA全长为1 866bp,转染BMSCs以后传至第40代时,核型分析正常率为77.78%。结论成功构建了绵羊pcDNA 3.1-EGFP-TERT真核表达载体,TERT-BMSCs传至40代时仍有较高的核型正常率。
- 孙毅朱淑芬王婧超韩霞王利李少伟
- 关键词:间质干细胞实时聚合酶链反应细胞生物学
- TERT基因修饰的绵羊脂肪间充质干细胞多向诱导分化的研究
- 2016年
- 目的探讨TERT基因修饰的绵羊脂肪间充质干细胞在体外多向分化的能力,验证TERT基因对绵羊脂肪间充质干细胞永生化的作用。方法将TERT-ADSCs进行传代培养,选取P3和P30进行成骨和成神经的诱导分化,通过组织学染色和特异性表达基因的RT-PCR鉴定,对TERT-ADSCs的多向分化能力进行鉴定。结果 TERT-ADSCs可以稳定传至P30,P3和P30成骨诱导后,可见明显的骨结节突起,茜素红染色后呈红褐色,且表达特异性基因CBFA和Osteocalcin。成神经诱导后细胞呈三角或树突状形态,甲苯胺蓝染色后可见尼氏体存在,且表达特异性基因NSE和GFAP。结论绵羊TERT-ADSCs传至多代后仍然具有多向分化的潜能,为ADSCs永生化研究提供了理论基础。
- 孙毅朱淑芬王婧超韩霞王利陈琦贾宇臣李少伟
- 关键词:传代培养诱导分化