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陈冠男: 作品数：14 被引量：27H指数：3; 供职机构：武警后勤学院附属医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金天津市科技计划天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>; 相关领域：医药卫生环境科学与工程建筑科学更多>>

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MIG7-shRNA逆转录病毒表达载体的构建及包装细胞株的建立: 2019年; 目的:构建迁移诱导基因(migration inducing gene 7,MIG7)的逆转录病毒表达载体并测序,初步建立其包装细胞株。方法:根据MIG7已知序列设计合成所需脱氧寡核苷酸序列,并与线性RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体连接。PCR扩增热转化后的连接产物,检测和挑取阳性克隆和阳性菌落,提取质粒后测序,与Gen-Bank中特异性MIG7-shRNA基因序列对比。包装并获取MIG7-shRNA重组逆转录病毒,qRT-PCR测定MIG7-shRNA重组逆转录病毒滴度并转染MHCC-97H细胞株。结果:构建的MIG7-shRNA表达载体与设计的完全一致,成功获得MIG7-shRNA逆转录病毒表达载体质粒CTC698-1-1和CTC698-2N-1转染的PT67细胞克隆株,pSIREN-M1病毒和pSIREN-MN病毒颗粒数约为1.0×10~8v.p/ml,能高效转染MHCC-97H细胞株。结论:成功构建了MIG7的逆转录病毒表达载体并建立其包装细胞株。; 余飞盛冠男陈冠男王南南宁莉莉王宇鹏屈波; 关键词：逆转录病毒

射频消融联合放化疗治疗不可切除的局部进展期胰头癌疗效及安全性分析被引量：3: 2016年; 目的:评估术中冷循环射频消融联合放化疗治疗不可切除的局部进展期胰头癌的疗效和安全性,以及对患者生存质量的影响。方法:对28例不可切除的局部进展期胰头癌患者行术中冷循环射频消融联合放化疗治疗,观察患者手术前后肿瘤标志物CA19-9水平、影像学变化及术后并发症和生存率。结果:本组患者无手术死亡,术后联合放化疗患者均耐受良好。所有患者CA19-9水平明显下降,术后30天、90天彩超和CT在原发病灶未发现肿瘤进展。85.71%(24/28)并发少量胰瘘,分别经引流后愈合,平均引流时间为15天。全组28例随访率为100%,随访时间最长18个月,存活12个月以上23例,最长者已达18个月。其中6个月无进展生存20例,12个月无进展生存13例。结论:开腹下冷循环射频消融联合同期放化疗治疗不可切除的局部进展期胰头癌安全有效,术后患者无进展生存期及生存质量明显提高。; 毛中鹏余飞盛冠男陈冠男王东洋屈波; 关键词：胰头癌射频消融疗效安全性

救援现场损伤控制性技术的研究进展被引量：1: 2017年; 损伤控制理念是指通过简短的处置使伤病员恢复近乎正常的生理状态,然后分期处理致命的创伤。严重创伤是一种"时间依赖性疾病",80%严重创伤伤员于伤后数小时内死亡,运用损伤控制理念处理严重创伤伤员可使救治成功率明显提高。然而,救援现场条件简陋,且目前损伤控制性技术尚无相关指南与共识,在这样的情况下,如何运用损伤控制理念对医护人员来说是一个重大挑战。笔者查阅相关文献,对救援现场损伤控制性技术的研究进展进行综述。; 王南南陈冠男余飞盛冠男樊毫军侯世科屈波; 关键词：战创伤危重症

损伤控制理念的历史回顾与展望: 王南南陈冠男樊毫军屈波

迁移诱导基因-7-ShRNA重组逆转录病毒联合血管内皮抑素抑制肝癌移植瘤的生长及转移被引量：2: 2016年; 目的探讨逆转录病毒介导的RNA（shRNA）干扰迁移诱导基因-7（Mig-7）联合重组人血管内皮抑素（ES）对人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长、转移的抑制作用。方法设计2条Mig-7-mRNA寡核苷酸序列（Mig-7-shRNA-1、Mig-7-shRNA-2）和1条作为负对照的无关序列（Mig-7-shRNA-N）。构建特异性M迫-7-shRNA逆转录病毒表达载体质粒，转染Mig-7高表达人肝癌细胞MHCC-97H。建立人肝细胞癌（HCC）裸鼠皮下移植瘤模型，根据转染情况和给药不同分为4组：pSIREN-M1组；pSIREN-MN组；ES组；pSIREN-Ml＋ES组。比较各组移植瘤体积、质量、转移情况；免疫组织化学观察各组移植瘤中血管生成拟态（VM）形成及肿瘤微血管密度（MVD）的差异；Westernblot检测各组Mig-7及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。组间比较采用单因素方差分析，计量资料的组间比较采用Fisher精确概率法检验。结果PSIREN-M1组移植瘤体积、质量、转移率、Mig-7表达及VM形成明显低于PSIREN-MN组（尸〈0．05），VEGF表达及MVD明显高于PSIREN-MN组（P〈0．05）；ES组移植瘤体积、质量及转移率、VEGF表达及MVD明显低于PSIREN-MN组（P〈0．05），Mig-7表达及VM形成明显高于PSIREN-MN组（P〈0．05）；DSIREN-Ml＋ES组的移植瘤体积、质量及转移率、Mig-7表达与VM形成、VEGF表达与MVD明显低于PSIREN-M1组及ES组（P〈0．05）。结论Mig-7-shRNA重组逆转录病毒联合ES抑制HCC移植瘤生长及转移的效果明显优于两者单用。体内单用靶向肿瘤血管内皮细胞的“抗肿瘤血管生成治疗”效果有限的原因可能是其促进了VM的形成。; 屈波陈冠男盛冠男余飞吕琪谷彦军郭龙吕毅; 关键词：内皮抑素

兔抗人MIG7多克隆抗体的制备和纯化被引量：1: 2017年; 目的:构建、表达迁移诱导蛋白7(migration-inducing protein 7,MIG7),制备该融合蛋白的兔多克隆抗体,纯化并鉴定该多克隆抗体。方法:设计并合成MIG7蛋白特异性多肽片段,合成的MIG7多肽与马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联,构建半抗原-载体偶联物。以MIG7特异性多肽-KLH为抗原免疫大白兔,制备抗MIG7多克隆抗体。40%硫酸铵沉淀、甘氨酸溶液洗脱纯化抗体,Dot blot检测抗体血清效价。免疫组化与qRT-PCR验证MIG7抗体。结果:免疫组织化学染色与qRT-PCR检测结果一致,证明该抗体可特异性结合MIG蛋白,获得MIG7多克隆抗体。结论:本研究成功制备并纯化了特异性较高的抗MIG7多克隆抗体,为进一步研究MIG7在血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)形成和肝癌侵袭转移中的机制奠定了基础。; 余飞盛冠男陈冠男王宇鹏宁莉莉屈波; 关键词：多克隆抗体血管生成拟态肝癌

不可切除侵袭性纤维瘤病药物治疗进展被引量：2: 2016年; 侵袭性纤维瘤病是一种发病率较低的交界性肿瘤,扩大切除是最有效的治疗方式,但其无包膜浸润性生长特性导致手术不易达到切缘阴性,而且累及重要脏器时常难以切除,甚至危及生命。对于难以切除、不能切除和切除后复发的患者,仍寄希望于药物治疗。药物治疗是腹腔内和多发性侵袭性纤维瘤病的一线治疗方案。目前,应用于侵袭性纤维瘤病的药物主要包括非细胞毒性药物和细胞毒性药物。本文就不可切除侵袭性纤维瘤病药物治疗进展做一综述。; 余飞盛冠男陈冠男张瑾屈波; 关键词：不可切除侵袭性纤维瘤病药物治疗化疗

逆转录病毒介导shRNA抑制Mig-7基因对人肝癌细胞血管生成拟态及体外侵袭转移的抑制作用被引量：2: 2016年; 目的探讨逆转录病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰迁移诱导基因7(Mig-7)对肝细胞癌(HCC)细胞血管生成拟态(VM)形成及体外侵袭转移能力的影响。方法设计2条Mig-7 m RNA寡核苷酸序列(Mig-7 shRNA-1,Mig-7 shRNA-2)和1条作为负对照的无关序列(Mig-7 shRNA-N)。构建Mig-7shRNA逆转录病毒表达载体质粒,并将要接受转染的人肝癌细胞MHCC-97H分为6组:转染Mig-7 shRNA-1组;转染Mig-7 shRNA-2组;转染Mig-7 shRNA-N组;转染空载质粒组(Vector);重组人血管内皮抑素(ES,商品名:恩度)组;MHCC-97H细胞对照组(Control)。半定量PCR、Western blot检测其对Mig-7表达的影响;三维细胞培养观察其对VM形成的影响;细胞间粘附实验、Transwell侵袭实验及迁移实验观察其对细胞粘附、侵袭及迁移能力的影响。结果转染后,Mig-7 shRNA-1组与Mig-7 shRNA-2组中Mig-7 m RNA与蛋白的表达、MHCC-97H细胞形成VM能力、细胞侵袭、迁移能力明显减低(P<0.05),细胞间粘附能力明显增加(P<0.05);Mig-7 shRNA-N组、Vector组、ES组中MHCC-97H细胞Mig-7的表达、VM形成、细胞间粘附、迁移、侵袭能力较MHCC-97H细胞组均无明显变化。结论逆转录病毒介导的shRNA能够有效下调Mig-7的表达并明显抑制HCC细胞VM形成能力及侵袭转移能力,增加细胞间的粘附作用;ES对HCC细胞的Mig-7表达、VM形成、侵袭转移及粘附能力无明显影响。; 屈波盛冠男余飞陈冠男吕琪毛中鹏郭龙吕毅; 关键词：血管生成拟态肝癌

MIG7调节肝细胞癌中血管生成拟态的形成及其对肝癌转移潜能的影响被引量：2: 2017年; 目的探讨肝细胞癌(HCC)中迁移诱导基因7(MIG7)的表达与血管生成拟态(VM)形成的相关性,以及MIG7的表达与不同肝癌细胞株VM形成能力及转移潜能的关系。方法应用免疫组织化学方法分析配对的40例HCC原发灶及其转移灶标本中MIG7蛋白的表达和VM形成情况;应用三维培养技术培养不同转移潜能的人肝癌细胞株(高转移潜能肝癌细胞MHCC-97H、低转移潜能肝癌细胞MHCC-97L和非转移肝癌细胞Huh-7)及人正常肝细胞L-02,分别检测VM形成情况;应用RT-PCR技术检测不同转移潜能肝癌细胞中MIG7mRNA的水平;应用Western blot技术检测不同转移潜能肝癌细胞株中MIG7蛋白表达水平。结果 (1)40例配对的HCC原发灶和相应转移灶中,MIG7蛋白的表达与VM形成呈正相关(rs=0.595,P<0.01)。对照组中正常肝脏组织MIG7蛋白无表达,且未见VM形成。(2)体外三维培养提示,高转移潜能肝癌细胞株MHCC-97H的MIG7mRNA和蛋白表达及VM的形成能力均大于低转移潜能肝癌细胞株MHCC-97L及非转移肝癌细胞株Huh-7。人正常肝细胞L-02未见VM形成。结论 MIG7高表达的肝癌组织中VM形成能力强,MIG7通过调节VM的形成影响HCC的侵袭转移,MIG7是抑制HCC侵袭转移的潜在靶点。; 屈波余飞盛冠男陈冠男吕琪谷彦军郭龙; 关键词：血管生成拟态肿瘤血管生成肝细胞癌

肿瘤血管生成拟态研究的希望与挑战被引量：6: 2017年; 血液供应是肿瘤生长和转移的必要条件,已报道的肿瘤血液供应模式中,VM作为一种崭新的肿瘤微循环模式,参与多种恶性肿瘤的生长、侵袭和转移,是恶性肿瘤患者预后不良的一个独立的标志物。VM可能是一个潜在的肿瘤治疗新靶点,但其形成的分子机制仍不清楚,以下两个问题一直伴随着对VM的研究:VM形成的具体机制、VM是如何影响肿瘤的生长、转移和浸润的。本文就近年来VM的研究进展做一综述,探讨当前研究中存在的问题,展望未来的发展方向。; 陈冠男余飞盛冠男王敬屈波; 关键词：血管生成拟态分子机制微循环

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