王小利
- 作品数：11 被引量：92H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学化学工程更多>>
- PCDFs的Ah受体结合能力的定量结构效应关系被引量：5
- 2004年
- 应用单苯环氯取代方法取G1～G10 10个分子结构描述符,通过正向逐步线性回归方法构建对于Ah受体结合能力的定量结构-性质相关(QSAR)模型.与有关文献相比,此模型能更好地预测多氯代二苯并呋喃(PCDFs)竞争结合Ah受体logEC50值,各自变量间不存在共线性.模型可以较好地反映PCDFs分子Ah受体结合能力与其分子氯取代位点之间的关系.
- 李芳孙晞李柏生王小利徐顺清
- 一种新的基于适体和酶切保护分析的超灵敏蛋白质检测方法被引量：3
- 2005年
- 以凝血酶适体(aptamer)为例,利用适体和核酸外切酶特性,通过定量PCR扩增建立一种高灵敏的蛋白质检测方法.首先合成3段寡核苷酸序列即凝血酶适体探针,上游连接子和下游连接子.将适体探针与凝血酶温育结合后,再加入核酸外切酶I降解未能结合的探针.接着将保护下来的探针与连接子杂交、连接和对连接产物进行定量PCR .分别建立连接产物标准品浓度与Ct 值的标准曲线和凝血酶浓度与连接产物浓度的标准曲线,通过定量PCR对凝血酶进行定量.结果显示,基于适体的外切酶保护凝血酶检测方法灵敏度较高,连接产物标准品浓度的对数值和Ct 值之间的方程为y =- 2 95x + 33 6 5 (R2 =0. 990 ,P <0 .0 1) ;凝血酶浓度和连接产物浓度对数值之间的方程为y =0 94x - 0 . 2 9(R2 =0 . 998,P <0 . 0 1) ,还对可能影响检测的有关参数举行了探讨.
- 王先良王小利苏艳华张迟张莉君李芳李柏生李晓波徐淑雷李媛媛徐顺清
- 过氧化亚硝基对不同肝细胞的损伤作用研究被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨过氧化亚硝基 (ONOO- )对人胚肝细胞株L 0 2细胞和肝母细胞瘤细胞株HepG2细胞的损伤差异。方法 运用四唑盐 (MTT)比色法、单细胞凝胶电泳和流式细胞术 3种方法检测过氧化亚硝基对两株肝细胞的细胞活性、DNA损伤、细胞凋亡的影响。结果 过氧化亚硝基对两株肝细胞均有细胞毒性 ,引起DNA损伤和细胞凋亡 ,损伤程度呈剂量依赖关系 (P <0 0 5 ) ,在各浓度组L 0 2细胞的损伤程度均略高于HepG2细胞 ,但两者统计学差异无显著性 (P >0 0 5 )。两株细胞周期变化趋势相一致。结论 过氧化亚硝基对正常和肝癌细胞均有DNA损伤、凋亡和影响细胞周期的作用 ,但两者差异无统计学意义。
- 王小利余毅恺李华文徐顺清周宜开吕斌
- 关键词：肝细胞株
- 肝肿瘤发生中过氧亚硝酸阴离子标志物作用
- 2005年
- 目的比较过氧亚硝酸阴离子(ONOO-)对正常人胚肝细胞株L-02和肝母细胞瘤细胞株HepG2 DNA损伤和细胞毒性差异,探索ONOO-在肝肿瘤发生中的作用及可能标志物。方法0.01,0.05,0.1 mmol/L ONOO-作用细胞后,检测ONOO-对2株肝细胞的细胞生存率,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)含量变化,DNA损伤,生长抑制DNA损伤基因(GADD)表达的影响差异。结果ONOO-使2种肝细胞的生存率下降、SOD含量降低(P<0.05)和CAT、GSH的显著变化,显著升高MDA的含量;DNA损伤程度和GADD45、GADD153基因表达水平在2株肝细胞均随着剂量的增加显著升高。2种肝细胞相比,各浓度组L-02细胞损伤程度大于HepG2细胞,但只有GADD基因表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论ONOO-对正常肝细胞和肝癌细胞均显示细胞毒性作用,引起DNA损伤,诱导GADD表达。GADD基因表达水平在不同肝细胞中差异有统计学意义,可能是ONOO-细胞损伤效应的标志物。
- 李华文江明张和喜王小利余毅恺徐顺清周宜开吕斌
- 关键词：过氧亚硝酸阴离子肿瘤肝细胞株DNA损伤
- 环境污染导致人体健康损害的生物标志物检测及预警研究
- 徐顺清李媛媛周宜开余红平王小利
- ①课题来源与背景环境污染导致健康危害的机制复杂，影响因素众多，目前对环境污染导致的健康危害尚缺乏有效监测、评价和预警体系。在国家自然科学基金支持下，该项目完成人在环境污染导致健康损害的生物标志物检测方面进行了系统的研究。...
- 关键词：
- 关键词：环境污染生物标志物
- Aptamer在生物传感器中的应用
- Aptamer是一段能与各种目标分子高亲和、高特异结合的核酸序列.Aptamer传感器是一种以aptamer为生物敏感元件的新型生物传感器,与其他生物传感器相比,具有再生性好,可塑性强,适用范围广等优点.当今已发明和创建...
- 徐顺清王小利
- 关键词：生物传感器APTAMER
- 文献传递
- 壳聚糖脱氧核糖核酸纳米球的制备及其相关特性研究被引量：18
- 2005年
- 目的 制备壳聚糖脱氧核糖核酸 (DNA)纳米球并研究其理化性质和转染肝细胞系HepG2和L 0 2的活性。方法 用绿色荧光蛋白 (GFP)质粒做报告基因 ,GFP和壳聚糖通过复凝聚方法制备壳聚糖DNA纳米球 ,用扫描电镜观察其形态 ,激光粒度分析仪测定壳聚糖DNA纳米球粒度分布、表面电位 ,DNaseⅠ保护实验研究壳聚糖DNA纳米球对包裹基因的保护作用 ,用体外基因转染实验定性评价纳米球的转染活性 ,MTT试验研究壳聚糖DNA纳米球对HepG2和L 0 2的细胞毒作用。结果 壳聚糖形成表面带正电荷的纳米球 ,保护DNA免受DNaseⅠ的降解。壳聚糖DNA纳米球作为非病毒载体转染肝细胞系 ,基因能有效表达。结论 壳聚糖DNA纳米球作为非病毒载体转染肝细胞系有效 ,壳聚糖转染有细胞选择性。
- 孙纳徐顺清孙汉清王小利
- 关键词：转染HEPG2L-02
- 氮芥所致DNA损伤分子标志物探讨被引量：3
- 2005年
- 目的 利用烷化剂的毒理机制 ,评价生长抑制和DNA损伤 (GrowtharrestandDNAdamage,Gadd)基因的表达作为DNA损伤的分子标志物的可行性。方法 通过烷化剂类药物氮芥诱导人肝瘤HepG2细胞 ,运用RT -PCR的方法检测Gadd基因的表达水平 ,同时佐以MTT试验、单细胞凝胶电泳试验来分析氮芥对细胞的毒性作用和DNA损伤程度。结果 氮芥能诱导Gadd基因不同程度的表达 ,但随着浓度和时间的增加有由表达增强逐渐转为抑制的趋势 ;氮芥对人肝瘤HepG2细胞能产生明显的DNA损伤作用 ,有浓度依赖关系 (rs=0 5 91 ,P <0 0 1 ) ;氮芥对细胞有毒性作用 ,不同浓度的氮芥 (0 5～ 4 0 μg/L)使细胞存活率从 97%下降到 5 2 %。结论 Gadd基因的表达可以作为判断DNA损伤的比较敏感的分子标志物。
- 奉水东李华文王小利凌宏艳徐顺清
- 关键词：氮芥DNA损伤分子标志物
- CYP1A1和GSTM1基因多态性与肺癌易感性的Meta分析被引量：7
- 2006年
- 目的探讨CYP1A1和GSTM1基因多态性与个体肺癌易感性的关系。方法全面检索相关文献，应用Meta分析方法对各研究进行数据的合并与分析。结果共8篇文献入选，累计肺癌病例1067人，对照1416人，分别对CYP1A1＊A和GSTM1-、CYP1A1＊B／C和GSTM1＋、CYP1A1＊B／C和GSTM1-联合基因型进行统计分析。异质性检验，值分别为6．43、8．83与9．63，P〉0．05，文献有同质性，各合并OR及95％CI分别为1．36（1．09～2．77）、1．65（1．26～2．15）和2．01（1．57～2．59）。结论CYP1A1和GSTM1突变基因型为罹患肺癌的易感基因型，且两者存在协同作用，在肿瘤防治方案中应加以重视从而采取相应措施达到有效预防肿瘤的目的。
- 苏艳华王小利徐顺清
- 关键词：GSTM1基因多态性META分析
- 大孔螯合树脂可用于处理中药重金属污染被引量：55
- 2005年
- 目的:利用大孔螯合树脂建立一种新的中药重金属污染的处理方法。方法:先对中药粗提物进行乳化和调节pH值至7,将其分别过3种大孔树脂(D401,D402,D001)柱,进而测定处理前后的中药粗提物中的5种重金属(Cu,Pb,Cd,Hg,As)和有效成分类黄酮的含量。结果:经D401和D402处理后,中药粗提物中的重金属含量显著降低,Cu的含量由0.500 mg.L-1降为0.117 mg.L-1和0.236 mg.L-1,Pb的含量由0.521 mg.L-1降为0.174 mg.L-1和0.165 mg.L-1,Cd的含量由0.078 mg.L-1降为0.024 mg.L-1和0.043 mg.L-1,Hg和As的含量分别由0.005 mg.L-1和0.002 mg.L-1降至检测限以下;但经过D001处理后,重金属含量的下降不明显。另外经过3种树脂处理后,类黄酮的量变化很小。我们还发现常温时,当中药提取物的流速为30 m/h和pH为7时,D401的处理效果最好。结论:大孔螯合树脂D401和D402可以用于中药粗提物中超标重金属的处理。
- 王先良王小利徐顺清
- 关键词：重金属污染中药
