丁艳洁
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
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- 荧光共振能量转移技术检测蛋白激酶A在MIN6细胞分泌胰岛素机制中的作用
- 2021年
- 目的蛋白激酶A(PKA)参与小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞分泌胰岛素的机制尚不明确。文中旨在不同浓度的葡萄糖环境下,给予不同浓度的胰升血糖素和异丙肾上腺素(ISO)后MIN6细胞胰岛素和PKA水平变化,探讨PKA在MIN6细胞中分泌胰岛素的作用和机理。方法体外培养MIN6细胞,在葡萄糖0、2.8、16.7 mmol/L时分别给予胰升血糖素0、500、1000 ng/L干预处理,用荧光共振能量转移(FRET)的生物传感器技术测PKA水平,用ELISA测胰岛素水平,并在添加ISO前后,检测并比较PKA和胰岛素的变化水平。结果葡萄糖浓度2.8、16.7 mmol/L时,500 ng/L胰升血糖素(ISO+)、1000 ng/L胰升血糖素(ISO-)PKA的表达水平较500 ng/L胰升血糖素(ISO-)明显升高(P<0.05);1000 ng/L胰升血糖素(ISO+)PKA的表达水平较500 ng/L胰升血糖素(ISO+)、1000 ng/L(ISO-)明显升高(P<0.05)。0 mmol/L葡萄糖时,1000 ng/L胰升血糖素的胰岛素增量较0 ng/L胰升血糖素明显升高(P<0.05)。2.8、16.7 mmol/L葡萄糖时,500 ng/L、1000 ng/L胰升血糖素的胰岛素增量较0 ng/L胰升血糖素明显升高(P<0.05)。未添加ISO时,细胞上清液的胰岛素含量与PKA呈正相关(r=0.810,P<0.05);添加ISO后,细胞上清液cAMP与胰岛素含量亦呈正相关(r=0.791,P<0.05)。结论基于FRET的生物传感器技术可在活细胞上实时动态检测PKA的变化,胰升血糖素以浓度递增的形式通过增加MIN6细胞内PKA的浓度来促进胰岛素分泌,且这种作用具有一定的葡萄糖依赖性。
- 安学院丁艳洁李思源李军常子涛
- 关键词：胰升血糖素MIN6细胞蛋白激酶A胰岛素荧光共振能量转移
- 浅谈《组织学与胚胎学》实验教学课程的改革被引量：1
- 2022年
- 《组织学与胚胎学》是医学教育的专业基础课程,文章分析了该课程的实验教学部分存在的各种问题,从改革教学方法,完善考核机制等方面探讨了对《组织学与胚胎学》这一课程的教学反思,有助于提高学生自主学习能力,提升教学水平与整体教学效果。
- 曹冬冬张志威魏虹王菊裴学莲张悦丁艳洁者湘漪
- 关键词：组织学与胚胎学教学改革教学方法
- 胰高血糖素对不同葡萄糖培养条件下胰岛β细胞分泌胰岛素的影响及机制被引量：1
- 2018年
- 目的探讨不同浓度葡萄糖环境下胰高血糖素(Gn)对胰岛β细胞系MIN6细胞分泌胰岛素(INS)及对环磷酸腺苷(c AMP)信号通路的影响。方法培养胰岛β细胞系MIN6细胞。(1)分为正常对照1组、低糖1组、高糖1组,分别在葡萄糖终浓度为0、2.8、16.7 mmol/L培养基中培养,每组均给予0、500、1 000 ng/L的Gn干预1 h,采用ELISA法检测细胞上清液INS、c AMP含量,评价不同浓度Gn对MIN6细胞分泌INS及c AMP的影响。(2)分为正常对照2组、低糖2组、高糖2组,分别在葡萄糖终浓度为0、2.8、16.7 mmol/L培养基中培养,并均加入500μL c AMP信号通路刺激剂盐酸异丙肾上腺素(ISO)孵育10 min,然后每组均给予0、500、1 000 ng/L的Gn干预1 h,采用ELISA法检测细胞上清液INS、c AMP含量,评价加入ISO后不同浓度Gn对MIN6细胞分泌INS及c AMP的影响。结果 (1)正常对照1组、低糖1组、高糖1组中,1 000 ng/L Gn干预后INS、c AMP含量均高于500、0 ng/L时,500ng/L Gn干预后INS、c AMP含量均高于0 ng/L时(P均<0.05)。(2)正常对照2组、低糖2组、高糖2组中,1 000ng/L Gn干预后INS、c AMP含量均高于500、0 ng/L时,500 ng/L Gn干预后INS、c AMP含量均高于0 ng/L时(P均<0.05)。在未添加ISO情况下,细胞上清液c AMP与INS含量呈正相关(r=0.897 2,r2=0.804 9,P<0.05);在添加ISO后,细胞上清液c AMP与INS含量也呈正相关(r=0.894 7,r2=0.800 5,P<0.05)。结论 Gn可促进不同葡萄糖水平下胰岛β细胞INS的分泌,其浓度较高时对INS促进作用更明显;其机制可能为Gn通过c AMP信号通路促进INS分泌。
- 丁艳洁李思源李军常子涛张震吴媛媛
- 关键词：胰高血糖素葡萄糖胰岛素环磷酸腺苷
- 胰升血糖素通过环磷鸟嘌呤核苷信号通路调节MIN6细胞胰岛素分泌的作用机制研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨不同浓度的胰升血糖素(Glg)和葡萄糖(Glu)对胰岛β细胞株MIN6中胰岛素(Ins)分泌功能及细胞内环磷鸟嘌呤核苷(cGMP)信号通路的影响。方法用不同浓度Glu(0、2.8、16.7 mmol/L)及Glg(0、100、500、1000 ng/L)处理MIN6细胞。ELISA测定细胞内cGMP含量,同时测定细胞上清液中Ins的含量。结果单纯Glg处理组中,1000 ng/L组cGMP含量较500 ng/L组、100 ng/L组低(P<0.05)。2.8 mmol/L Glu加不同浓度Glg处理组中,1000 ng/L Glg组cGMP含量较100 ng/L Glg组及0 ng/L Glg组低;500 ng/L Glg组较0 ng/L Glg组低(P<0.05)。16.7 mmol/L Glu加不同浓度Glg处理组中,1000 ng/L Glg组cGMP含量较其他组低;500 ng/L Glg组较100 ng/L Glg组及0 ng/L Glg组低(P<0.05)。单纯Glg处理组中,随Glg浓度升高,Ins分泌量升高(P<0.05)。2.8 mmol/L Glu加不同浓度Glg处理组中,1000 ng/L Glg组Ins较100 ng/L Glg组及0 ng/L Glg组高;500 ng/L Glg组Ins较0 ng/L Glg组高(P<0.05)。16.7 mmol/L Glu加不同浓度Glg处理组中,随Glg浓度升高,Ins分泌量升高(P<0.05)。结论 Glg可能通过浓度梯度的方式下调MIN6细胞内cGMP的产生从而促进MIN6细胞Ins分泌,且这种作用有Glu依赖性。
- 常子涛李思源李军吴媛媛张震丁艳洁
- 关键词：胰升血糖素胰岛素分泌
- 荧光共振能量转移技术在检测环磷酸腺苷信号通路对于MIN6细胞胰岛素分泌机制中的作用被引量：2
- 2018年
- 目的探讨不同浓度的胰升血糖素(Glg)在无糖、低糖、高糖的环境下通过环磷酸腺苷(cAMP)信号通路对胰岛素分泌的直接调控作用及机制,基于荧光共振能量转移(FRET)的生物传感器技术可作为一种用来在活细胞上实时定量检测第二信使cAMP水平的方法。方法体外培养MIN6细胞,在葡萄糖0、2.8、16.7 mmol/L下予Glg 0、100、500、1000ng/L干预处理,ELISA检测不同处理下MIN6胞内cAMP量和胰岛素释放量;电转染法将质粒ICUE3转染进入MIN6细胞,用FRET技术检测细胞内cAMP水平。结果 ELISA与FRET技术检测的cAMP含量结果基本相同,印证了FRET检测cAMP的可行性;无糖、低糖及高糖环境下,cAMP含量及胰岛素的分泌量为1000ng/L组高于500、100、0ng/L组,500ng/L组高于100ng/L和0ng/L组;在低糖及高糖环境下,100ng/L组高于0ng/L组(P<0.05),且葡萄糖浓度越高趋势越明显。Pearson相关性分析结果显示,MIN6细胞内cAMP含量与胰岛素分泌量呈正相关(R2=0.559,P<0.01)。结论基于FRET的生物传感器技术可以作为一种用来在活细胞上实时定量检测第二信使cAMP水平的方法。Glg可能以浓度梯度的形式通过上调胰岛β细胞胞内cAMP浓度来促进Ins分泌,有一定的葡萄糖依赖性。
- 石艳秋李军李思源张震丁艳洁
- 关键词：胰升血糖素胰岛素MIN6细胞环磷酸腺苷荧光共振能量转移酶联免疫吸附法
- 利用微信公众号辅助临床医学本科组织胚胎学教学初探被引量：2
- 2020年
- 总结本教研室利用微信公众号辅助临床医学本科组织胚胎学教学的经验,探讨其在教学实践过程中的优势和不足,以及高校教师如何合理借助微信公众平台提高学生学习组织胚胎学的积极性和课堂参与度,进一步提高教学效果。
- 丁艳洁慕晓玲张志威李思源魏虹王菊裴学莲张悦者湘漪曹冬冬
- 关键词：组织胚胎学本科
