马蕾娜
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 降解PD-L1的生物大分子靶向蛋白水解嵌合体BioPROTAC及其制备方法和应用
- 本发明属于生物医药领域，具体涉及降解PD‑L1的生物大分子靶向蛋白水解嵌合体BioPROTAC及其制备方法和应用。该生物大分子靶向蛋白水解嵌合体(BioPROTAC)具有靶向降解PD‑L1蛋白的功能，能够通过蛋白酶体途径...
- 吕志民马蕾娜
- 免疫治疗新靶点在制备乳腺癌治疗药物中的应用
- 本发明属于肿瘤医药技术领域，具体涉及免疫治疗新靶点在制备乳腺癌治疗药物中的应用。本发明对己糖激酶HK2和IκBα在人乳腺癌发生发展中的机制进行分析，提出糖酵解酶HK2发挥激酶功能磷酸化IκBα的T291位点，作为乳腺癌免...
- 吕志民王润泽马蕾娜蔺吉春蒋宏飞
- 泛素连接酶三基序蛋白21对结直肠癌鞘氨醇激酶2的调控作用及其机制
- 2022年
- 目的探讨泛素连接酶三基序蛋白21(TRIM21)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中鞘氨醇激酶2(SphK2)的调控作用及机制。方法将转染Flag-SphK2的PLC/RPF/5细胞分为a、b、c、d、e组,分别采用表皮生长因子刺激、葡萄糖饥饿处理、过氧化氢刺激、缺氧处理、转化生长因子-β刺激,通过质谱鉴定与SphK2互作的蛋白。将HEK-293T细胞分为f、g、h、i、j、k、l、m、n、o组,f~k组分别转染Flag-SphK2、Flag-SphK2+HA-TRIM21质粒、Flag-SphK2、Flag-SphK2+His-Ubquitin、Flag-SphK2+His-Ubquitin+1μg HA-TRIM21质粒、Flag-SphK2+His-Ubquitin+4μg HA-TRIM21质粒,l~o组分别分别转染HA-TRIM21质粒0、0.3、0.6、0.9μg,f~g组进行免疫共沉淀实验鉴定SphK2与TRIM21蛋白的相互作用情况,h~k组进行体内泛素化实验鉴定TRIM21对SphK2泛素化水平的影响,l~o组进行Western-blot实验检测TRIM21过表达对SphK2蛋白水平的影响。将His-TRIM21、GST-SphK2蛋白混合液分为p、q组,分别加入琼脂糖珠、谷胱甘肽琼脂糖珠,进行蛋白体外结合实验鉴定SphK2与TRIM21蛋白的相互作用情况。将EP管分为r、s、t三组,每组分别加入GST-SphK2+E1/E2/Ub、GST-SphK2+His-TRIM21、GST-SphK2+His-TRIM21+E1/E2/Ub蛋白,进行体外泛素化实验鉴定TRIM21对SphK2泛素化水平的影响。将RKO细胞分为u、v、w、x四组,各组分别感染LV-sgTRIM21-1、LV-sgTRIM21-2、LV-sgTRIM21-3、LV-sgControl慢病毒,采用Western-blot实验检测TRIM21敲除对RKO细胞SphK2蛋白水平及半衰期的影响,采用CCK-8实验检测TRIM21敲除对RKO细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响。结果质谱分析、免疫共沉淀和蛋白质体外结合实验显示TRIM21与SphK2存在蛋白互作。体内、体外泛素化实验确定TRIM21介导SphK2发生多聚泛素化。在HEK-293T细胞中,TRIM21的外源过表达导致SphK2蛋白水平上调(F=196.22,P<0.05)。与x组相比,TRIM21敲除的RKO细胞系中SphK2蛋白表达水平降低、SphK2蛋白半衰期缩短、对5-Fu的敏感性增加(
- 肖明超孟昭源赵姣姣方文硕蔺吉春马蕾娜
- 关键词：泛素连接酶泛素化RKO细胞体外研究
- 一种诱导肿瘤细胞凋亡的方法
- 本发明属于药物治疗肿瘤技术领域，涉及一种诱导肿瘤细胞凋亡的方法，先在肿瘤细胞中加入U0126工作液后，再加入与U0126工作液等体积的齐墩果酸工作液，36小时后检测细胞凋亡情况；或将肿瘤细胞加入小干扰RNA工作液后再加入...
- 刘佳马蕾娜陈潇
- 文献传递
- 环状RNA circ_MTHFD2对mircoRNA-124的调控在肺癌培美曲塞耐药中的作用被引量：6
- 2017年
- 目的探讨circ_MTHFD2调控microRNA-124(miR-124)的表达在肺癌培美曲塞耐药发生过程中的作用。方法采用高浓度反复间歇诱导法建立肺癌培美曲塞耐药细胞株A549/PEM。通过瘤内注射建立培美曲塞耐药的裸鼠移植瘤模型;采用Lipofectamine脂质体法将miR-124模拟物、miR-124抑制剂及阴性对照转染至A549和A549/PEM细胞,并分为miR-124上调组、miR-124抑制组及阴性对照组;采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖及凋亡情况,比较各组细胞对培美曲塞的敏感性;采用实时荧光定量PCR(QPCR)和基因芯片检测miR-124和环状RNA的表达;通过测序技术检测耐药细胞及耐药裸鼠的肿瘤组织与对照组间环状RNA的表达,预测环状RNA上的miR-124结合位点。结果亲本细胞A549和耐药细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别为(30.78±1.97)μmol/L和(913.53±14.1)μmol/L,最终获得耐药指数(RI)为29.69±1.49的培美曲塞耐药细胞,命名为A549/PEM。耐药细胞A549/PEM中miR-124的表达显著降低,相比A549细胞,下降约145.952倍;下调miR-124表达的A549细胞对培美曲塞敏感性降低,miR-124抑制组及阴性对照组细胞的IC_(50)分别为(80.45±3.50)μmol/L和(9.94±1.90)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测显示miR-124表达上调可以显著诱导A549、A549/PEM细胞的凋亡;通过高通量测序提示在耐药的细胞及组织中环状RNA表达明显上调,表达量上调的circ_MTHFD2可与miR-124结合。结论 circ_MTHFD2可能通过调控miR-124的表达,参与肺癌培美曲塞耐药的发生发展。
- 徐飞马蕾娜冯龄鑫吴银洁徐晓彦于壮
- 关键词：肺癌培美曲塞耐药
