肖春兰
- 作品数：11 被引量：16H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属永川医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 表没食子儿茶素没食子酸酯通过活化p38α诱导急性早幼粒细胞白血病NB4细胞凋亡被引量：1
- 2016年
- 该文研究了表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)诱导NB4细胞凋亡的可能分子机制。不同浓度梯度EGCG处理NB4细胞,或预先用p38α抑制剂PD169316处理NB4细胞,再用EGCG处理。用CCK-8(cell counting kit-8)方法检测细胞增殖情况,用FITC-Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡情况,用Western blot检测p38α、P-p38α、Bcl-2和Bax蛋白质表达水平。结果显示,随着EGCG浓度的升高,NB4细胞增殖率逐渐降低,细胞凋亡率明显升高。P-p38α和Bax蛋白质表达水平升高,与EGCG浓度呈正相关;而Bcl-2蛋白质表达水平降低。p38α抑制剂处理后,NB4细胞增殖率升高,凋亡率降低,Bax蛋白质表达水平降低,而Bcl-2蛋白质表达水平无明显变化。以上结果表明,EGCG可能通过活化p38α诱导急性早幼粒细胞白血病NB4细胞凋亡。
- 淦柳根刘北忠单志灵肖春兰徐婷宋浩李浏杨蓉钟梁
- 关键词：EGCGNB4细胞凋亡
- NLS-RARα对人白血病细胞NB4分化抑制及其机制的研究
- 2016年
- 该文旨在探讨带核定位信号的维甲酸受体α(nuclear localization signal retinoic acid receptor alpha,NLS-RARα)对人急性早幼粒白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞株NB4分化的影响及其机制。免疫印迹实验检测全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导的NB4细胞分化标志物C/EBPβ、CD11b和p38α蛋白质水平;利用慢病毒介导的NLS-RARα基因过表达,进一步用免疫印迹实验验证过表达效率并检测NLS-RARα对NB4细胞分化标志物C/EBPβ、CD11b和p38α蛋白质水平的影响;间接免疫荧光实验分析NLS-RARα与p38α的空间共定位;免疫共沉淀实验分析NLS-RARα与p38α的相互作用。结果显示,生理浓度和药理浓度的ATRA促进NB4细胞分化的同时也激活了p38α,且p38α的活性变化与髓系分化标志物C/EBPβ变化一致;髓系分化表面标志物CD11b表达量在药理浓度ATRA(1μmol/L)处理下达到最高;NLS-RARα抑制NB4细胞的分化,且只有在ATRA存在的条件下,NLS-RARα抑制NB4细胞的分化与下调p38α活性相关;NLSRARα与p38α存在空间共定位且NLS-RARα与p38α直接相互作用。该研究结果提示,当存在ATRA诱导时,NLS-RARα与p38α直接相互作用后下调p38α的活性进而抑制NB4细胞的分化。
- 肖春兰刘北忠徐婷单志灵淦柳根宋浩杨蓉李浏钟梁
- 关键词：NB4细胞
- 拉帕替尼抑制HL60细胞增殖和促进细胞凋亡的机制被引量：2
- 2017年
- 目的探讨拉帕替尼对急性髓细胞白血病HL60细胞增殖和凋亡的影响及其相关分子机制。方法用(5、10、15)μmol/L的拉帕替尼处理HL60细胞24 h,光学显微镜下观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活力,集落形成实验检测细胞增殖能力,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记法结合流式细胞术检测细胞凋亡,Wright改良染色(LIU染色)和Hoechst33342荧光染色观察细胞核形态;Western blot法检测Bax、Bcl2、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、裂解型caspase-3(c-caspase-3)、裂解型caspase-9(c-caspase-9)、裂解型多腺苷二磷酸核糖聚合酶(c-PARP)、蛋白磷酸酶2A细胞增殖调节抑制因子(CIP2A)、c-MYC、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白水平。结果与对照组相比,拉帕替尼能以剂量依赖的方式抑制HL60细胞的增殖,促进细胞凋亡,诱导细胞产生核碎裂、染色质凝聚。下调Bcl2蛋白的表达,上调Bax、c-caspase-3、c-caspase-9和c-PARP蛋白水平,下调CIP2A、p-AKT和c-MYC蛋白水平。结论拉帕替尼能够抑制HL60细胞增殖并促进细胞凋亡,这一作用可能与下调CIP2A/AKT/c-MYC信号通路有关。
- 刘路刘北忠赵毅陈敏姚仕菲李连文肖春兰单志灵徐婷淦柳根钟梁
- 关键词：拉帕替尼HL60细胞细胞增殖细胞凋亡
- NLS-RARα通过与p38αMAPK相互作用抑制ATRA对NB4细胞的效应
- 目的： 带核定位信号的维甲酸受体（Nuclear localization signal retinoic acid receptor alpha：NLS-RARα）在急性早幼粒细胞白血病（Acute promyelo...
- 肖春兰
- 关键词：急性早幼粒细胞白血病中性粒细胞弹性蛋白酶维甲酸受体NB4细胞分子机制
- 文献传递
- ATRA诱导SP100蛋白表达及其对白血病NB4细胞增殖的影响
- 2017年
- 目的探讨SP100蛋白在全反式维甲酸(ATRA)作用NB4细胞过程中的表达及其对NB4细胞增殖和周期的影响。方法实时定量PCR检测SP100 mRNA的表达;Western blot检测SP100蛋白的表达;免疫荧光检测SP100的定位;CCK-8检测NB4细胞的增殖;流式细胞术检测NB4细胞的周期。结果 ATRA能明显促进NB4细胞中SP100mRNA水平和蛋白水平,并将SP100由弥散的小点状转变为较大的斑块状;感染SP100-shRNA的NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和病毒空载组(P<0.05),并使G2/M期的细胞增多。结论 ATRA促进NB4细胞中SP100蛋白的表达,SP100蛋白可能参与NB4细胞增殖活力的调节。
- 徐婷刘北忠肖春兰单志灵淦柳根杨蓉李浏宋浩钟梁
- 关键词：急性早幼粒细胞白血病NB4细胞
- PKM2在白血病NB4细胞系的分布及对c-Myc蛋白的影响
- 2017年
- 探讨PKM2在白血病NB4细胞中的分布情况及对c-Myc蛋白的影响。免疫荧光技术检测PKM2在NB4细胞中的分布情况。将含靶点序列的GV248载体、包装质粒Helper 1.0和Helper 2.0共转染293T细胞,包装慢病毒。收集病毒上清,浓缩纯化后感染NB4细胞,荧光显微镜观察感染效率,Western blotting检测PKM2和c-Myc蛋白的表达变化。CCK-8实验检测细胞增殖情况。结果显示,PKM2在NB4细胞核及细胞质中均有表达,细胞核中比例较大。成功构建LV-PKM2-RNAi病毒,感染的细胞PKM2和c-Myc表达下调(p<0.05),细胞增殖能力降低(p<0.05)。这些结果表明PKM2主要分布在NB4细胞核,抑制PKM2表达可明显抑制NB4细胞增殖,并抑制c-Myc蛋白表达。
- 单志灵刘北忠淦柳根肖春兰徐婷杨蓉宋浩李浏钟梁
- 关键词：NB4细胞
- 盐霉素抑制急性早幼粒细胞白血病细胞增殖并诱导分化被引量：2
- 2017年
- 该文旨在探讨盐霉素(salinomycin,SAL)对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞增殖和分化的影响及其可能的机制。采用CCK-8(cell counting kit-8)实验检测细胞增殖,瑞氏染色观察细胞形态学变化,流式细胞术检测粒细胞分化标志物CD11b的表达,Western blot检测相关蛋白质水平变化。结果显示,SAL抑制了细胞增殖;SAL作用72 h后,细胞呈现典型分化形态学改变。随着SAL的浓度升高,CD11b阳性的细胞比例以及CD11b、C/EBPβ蛋白质水平逐渐增加。此外,SAL降低了β-catenin以及下游分子C-myc、Cyclin D1的蛋白质水平。该研究还探讨了联合使用Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂IWR-1与SAL对细胞分化的影响。结果显示,与单独使用SAL相比,联合使用SAL和IWR-1促进了SAL诱导的NB4细胞分化。该研究结果提示,SAL可抑制NB4细胞的增殖,并可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路诱导细胞分化。
- 赵毅刘北忠姚仕菲刘路陈敏陈敏肖春兰肖春兰淦柳根徐婷徐婷
- 关键词：急性早幼粒细胞白血病盐霉素细胞增殖WNT/Β-CATENIN信号通路
- 拉帕替尼通过激活p38MAPK信号通路促进NB4细胞凋亡被引量：2
- 2017年
- 该文探讨了拉帕替尼对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞增殖和凋亡的影响及相关分子机制。用p38MAPK抑制剂和不同浓度的拉帕替尼处理NB4细胞24 h,CCK-8(cell counting kit-8)实验检测细胞增殖,FITC-Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,光学显微镜和Hoechst 33258染色观察细胞形态,Western blot检测Bcl-2(B cell leukemia-2)、Bax(Bcl-2 associated X protein)、caspase-3、PARP(poly-ADP-ribose polymerase)、PML-RARα(promyelocytic leukemia-retinoic acid receptor alpha)、p38MAPK(p38 mitongen-activated protein kinase)和p-p38MAPK(phosphorylated p38 mitongen-activated protein kinase)等蛋白质水平。结果显示,随着拉帕替尼药物浓度的增加,细胞增殖率显著降低,细胞凋亡数量明显增加,Hoechst 33258染色可见染色质浓缩、碎裂等凋亡现象。同时,拉帕替尼能降低Bcl-2和PML-RARα蛋白质水平,增加Bax、cleaved caspase-3、cleaved PARP和p-p38MAPK等蛋白质水平。用p38MAPK抑制剂预处理后,细胞增殖率升高,凋亡率降低,p-p38MAPK、Bax、cleaved caspase-3和cleaved PARP等蛋白质水平降低。该文结果提示,拉帕替尼能够抑制NB4细胞增殖并促进细胞凋亡,并且p38MAPK信号通路可能参与这些过程。
- 刘路刘北忠赵毅陈敏姚仕菲李连文肖春兰单志灵徐婷淦柳根钟梁
- 关键词：拉帕替尼NB4细胞细胞增殖细胞凋亡P38MAPK
- 维替泊芬通过抑制YAP诱导白血病NB4细胞凋亡被引量：1
- 2018年
- 探讨维替泊芬对人类白血病NB4细胞活性、凋亡的影响及其作用机制。我们用CCK-8实验检测NB4细胞的增殖活性;集落形成实验检测NB4细胞的集落形成能力;细胞周期和凋亡用流式细胞术来检测;凋亡形态学用Hoechst33342染色来观察;以及Western blotting检测细胞中蛋白的表达水平。结果显示,NB4细胞经维替泊芬处理后,集落数量减少,集落大小减小;CCK-8结果提示细胞增殖活性受到显著抑制,且呈现出剂量和时间依赖性（p〈0.05）;Hoechst 33342染色后观察到细胞凋亡形态;流式检测到G0/G1期细胞明显增多,细胞凋亡率明显增加（p〈0.05）;Western blotting检测到YAP、GSK3β、p-AKT、cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平明显下调,Bax、p-GSK3β表达明显增加,裂解的PARP蛋白明显增加（p〈0.05）。因此本研究提示,维替泊芬能抑制人类白血病NB4细胞的增殖,诱导细胞凋亡。其机制是通过抑制YAP蛋白的表达诱导细胞凋亡,AKT/GSK3β信号参与了这一过程。
- 陈敏刘北忠姚仕菲刘路赵毅李连文淦柳根单志灵肖春兰徐婷钟梁
- 关键词：维替泊芬NB4细胞凋亡增殖
- EGCG通过PTEN增强ATRA对早幼粒白血病细胞株的分化作用被引量：2
- 2018年
- 探讨PTEN在表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）增强维甲酸（ATRA）诱导的急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞分化中的作用。我们分别将ATRA、EGCG及两种药物联合应用于NB4与HL-60细胞72 h,从形态学上观察细胞核的变化;Western blotting检测PTEN及髓系分化标志CD11b的表达;免疫荧光检测PTEN的入核情况;CCK-8检测细胞增殖率。结果显示,ATRA与EGCG联合作用于NB4与HL-60细胞后,PTEN与CD11b的表达较单独应用ATRA时增加。PTEN特异性抑制剂SF1670作用于NB4后,细胞分化明显减少;PI3K抑制剂LY294002作用后,PTEN及CD11b表达增加。这些均表明EGCG能够增强ATRA诱导APL细胞株的分化作用,且这种促进作用与PTEN的增加是相关的。
- 姚仕菲刘北忠陈敏赵毅李连文刘路徐婷单志灵肖春兰淦柳根钟梁
- 关键词：PTENEGCG分化
