王平
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)PPR蛋白Ppr10和Ppr11参与细胞色素c氧化酶(复合体Ⅳ)亚基的翻译
- 闫建华汪一荣王平张清珍马旭亭苏敏慧黄鹰
- 丙酮醛降解酶基因的克隆与高效表达
- 2016年
- 由于丙酮醛降解酶(methylglyoxal degradation enzyme,MD)是生物体内代谢丙酮醛的一种关键酶,实现MD的高效表达对调控丙酮醛的代谢途径具有重要意义。所以根据Schizosaccharomyces pombe_Gene DB中MD的基因序列(SPAC22E12.03C)设计引物,以粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)c DNA文库为模板通过PCR扩增技术得到目标基因,目的片段全长576 bp。将SPAC22E12.03C连接到p ET-28a(+)上,得到重组质粒p ET-28a(+)-SPAC22E12.03C,并在Escherichia coli BL2l(DE3)中实现表达。同时,对其目的蛋白的表达条件进行了优化,获得最佳表达条件:诱导温度37℃,诱导起始菌体D600 nm为0.5~0.6,诱导剂IPTG浓度为0.8 mmol/L。这为研究粟酒裂殖酵母体内丙酮醛的降解途径打下了坚实基础。
- 王平赵巧巧黄鹰
- 关键词：粟酒裂殖酵母丙酮醛基因克隆基因表达
