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蜻蜓凤梨AfERF109基因的克隆及响应乙烯的表达特性分析被引量：2: 2016年; 以热带观赏花卉蜻蜓凤梨(Aechemia fasciata)为材料,在分析蜻蜓凤梨转录组数据的基础上,结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,简称RACE)技术克隆了APETALA2/乙烯反应元件结合蛋白(APETALA2/Ethylene Response Element Binding Protein,简称AP2/EREBP)家族的1个转录因子编码序列,并将其命名为AfERF109。AfERF109基因cDNA全长939 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)长762 bp,编码的蛋白含253个氨基酸残基。AfERF109分子量为28.275 1 ku,理论等电点为5.24;AfERF109不含信号肽和跨膜域,预测其定位于细胞核;AfERF109含有1个典型的AP2结构域,该结构域的二、三级结构构象保守;系统进化分析该蛋白分属ERF亚族的B-4类。实时荧光定量PCR分析表明,AfERF109转录本的表达量随着植株年龄的增长上调,在开花后的花柄中表达量最高。此外,AfERF109转录本的表达量受外源乙烯处理呈现正调控趋势。研究结果初步证实AfERF109参与乙烯调控路径,可能参与蜻蜓凤梨营养生长到生殖生长的时期转换及花柄的发育,为进一步研究AfERF109基因功能、通过基因工程手段调控蜻蜓凤梨开花提供了理论依据。; 雷明王之王加宾李志英徐立; 关键词：克隆乙烯

蜻蜓凤梨TERMINAL FLOWER 1基因的克隆及组织表达分析被引量：3: 2016年; 为了更好地利用生物技术手段提高观赏凤梨的开花质量,本研究在分析蜻蜓凤梨转录组数据的基础上,根据同源性比对发现了一个类TERMINAL FLOWER 1(TFL1)基因的c DNA片段,结合c DNA末端快速扩增(rapid amplification of c DNA ends,RACE)技术获得了其937 bp的c DNA全长,并将其命名为Af TFL1。序列分析表明,该基因的开放阅读框为522 bp,编码173个氨基酸。蛋白质性质分析表明,其分子量为19.329 9 k D,等电点为8.39,为一类不稳定的碱性蛋白。结构域分析表明,此蛋白含有1个典型的PEBP结构域。系统进化树分析表明,Af TFL1与番红花的TFL1亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明,Af TFL1在蜻蜓凤梨各个部位的表达量不同,在营养器官中的表达量随株龄增长而降低,在生殖器官中表达量非常低甚至检测不到。研究结果可为进一步研究Af TFL1的功能以及深入探讨蜻蜓凤梨开花机理提供了一定的理论依据。; 雷明李志英王之徐立; 关键词：TERMINAL FLOWER 克隆组织特异性表达

蜻蜓凤梨AfPIF4-1基因的克隆与遗传转化被引量：6: 2016年; 为了解析蜻蜓凤梨(Aechmea fasciata)开花机理,本研究根据转录组中的片段信息,利用RACE技术从蜻蜓凤梨中获得一个光敏色素因子(PIFs)的c DNA全长序列,并将其命名为Af PIF4-1。Af PIF4-1基因c DNA全长1 343 bp,开放阅读框为1 296 bp,编码431个氨基酸。利用NCBI分析氨基酸序列结果显示:Af PIF4-1含有b HLH蛋白家族共有的功能结构域,与海枣(Phoenix dactylifera),大豆(Glycine max),玉米(Zea mays),番茄(Solanum lycopersicum)中的PIF同源性分别为52%、49%、42%、39%。进一步构建了35S::Af PIF4-1过表达载体,并获得转基因拟南芥植株,可为进一步探究凤梨科植物开花机理,进而调控市场应用前景奠定了基础。; 石玲玲王之李志英雷明徐立; 关键词：RACE

蜻蜓凤梨AfAG基因的克隆、载体构建及遗传转化被引量：1: 2016年; 本研究以蜻蜓凤梨为材料,利用RACE技术获得一个与拟南芥AGAMOUS(AG)同源的编码基因c DNA,并将其命名为Af AG。Af AG基因的c DNA全长1 422 bp,开放阅读框为723 bp,可翻译成240个氨基酸。利用NCBI对Af AG蛋白进行序列分析,结果显示Af AG蛋白含有MADS-box蛋白家族共有的功能结构域:MADS和K-BOX两个结构域。与水稻(Os AG);玉米(Zm AGL);拟南芥(At AG);菜心(Br AGL);椰子(Cn AGL);白兰花(Ma AGL)的同源性比对结果分别为65%、63%、68%、65%、83%、75%。本研究成功构建了Ca MV35S-Af AG过表达载体,用农杆菌介导的方法将表达载体成功转入到拟南芥中,为进一步研究蜻蜓凤梨开花分子机理提供了理论依据。; 王之石玲玲李志英雷明徐立; 关键词：AGAMOUS 基因

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王之