杨全
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：哈尔滨医科大学药学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 哈尔滨市新确诊HIV-1 CRF01__AE亚型nef序列分析
- 2016年
- 目的分析哈尔滨市新确诊人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE亚型nef基因及nef蛋白重要功能区氨基酸的变异性。方法从56例2014-2015年新确诊感染者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中提取基因组DNA,扩增全长nef基因,并测序。构建nef基因系统发育树,分析基因特点;将nef氨基酸序列与中国和国际CRF01_AE共享序列进行比对,分析nef蛋白重要功能区氨基酸的变异性。结果 56株nef基因序列与不同CRF01_AE亚簇聚集,其中26株与CRF01-4亚簇聚集,24株与CRF01-5亚簇聚集,6株与CRF01-1亚簇聚集。亚簇内基因距离分析发现,CRF01-5亚簇最小,CRF01-4亚簇次之,CRF01-1亚簇最大。nef蛋白多个功能区氨基酸序列高度保守,但长度可变区、凋亡结构域、酸性区和C端PAK结合区变异率较高,其中凋亡区M50I突变和PAK结合区K192R突变多见于CD4数较低的样本(P<0.05)。结论哈尔滨市新确诊CRF01_AE亚型nef基因的组成较为复杂,可能来源于多个地区和多种感染途径;凋亡结构域和PAK结合区氨基酸变异与疾病进展相关。
- 曹立君李庆海杨全岳超彭鑫杨坤唐煜辉王福祥
- 关键词：功能区
- 以沙门氏菌菌毛为载体的重组HIV-1 447-52D表位疫苗的构建和毒力检测
- 2016年
- 目的 构建菌毛上表达HIV-1 447-52D表位的减毒Salmonella typhimurium ST14028-3b aroA-44752D,并对其毒力进行检测.方法 利用同源重组技术,将447-52D表位整合至沙门氏菌细聚合菌毛上,Western blot检测其表达情况,通过刚果红结合实验分析外源表位对菌毛吸附能力的影响.感染动物后检测重组菌的毒力及其在小鼠体内的分布.结果 重组菌的嵌合基因片段测序结果和嵌合蛋白的表达分析表明,重组菌菌毛上成功表达外源447-52D表位.重组菌携带外源表位后对刚果红吸附的能力没有改变,不影响菌毛的正常生物学活性.动物感染实验结果显示,重组菌灌胃感染BALB/c小鼠的LD50为1.45×10^9 CFU,与野生型减毒株相似,且重组菌可以有效地分布于感染小鼠的派氏淋巴结和脾脏中.结论 成功构建菌毛携带HIV-1 447-52D表位的减毒Salmonella typhimurium ST14028-3b aroA-44752D.菌毛携带外源表位后不影响减毒菌的毒力和并在体内分布,有望作为为口服HIV-1疫苗的候选并对其他病原体表位疫苗的研究提供了新的思路.
- 金刚于璐岳超李海宁杨全李庆海刘树林
- 关键词：HIV-1
