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解脂耶氏酵母脂肪酶Lip2与疏水蛋白SC3融合表达及催化性质被引量：2: 2016年; 为研究疏水蛋白融合表达对脂肪酶的催化性质影响,分别构建分泌表达解脂耶氏酵母脂肪酶Lip2,带His标签Lip2及Lip2与疏水蛋白SC3融合蛋白的重组质粒PKL、PKHL和PKHLS并分别转化到毕赤酵母GS115菌株中,通过筛选,获得表达活性较高的工程菌株(KL、KHL、KHLS)。对3株重组菌株的培养与重组蛋白催化性质研究表明蛋白相对分子质量为36 k Da、36 k Da、46 k Da,发酵液对底物对硝基苯酚辛酸酯(p-NPC)水解酶活分别达到5.35、4.69、2.4 U/m L。最适温度均是45℃,最适p H均是7.5,另外KHLS菌株的酶活力受表面活性剂的影响比KL和KHL小。; 邱玉龙邓冬梅潘淑兰孙宇飞; 关键词：毕赤酵母表面活性剂

壳聚糖微球固定化脂肪酶催化性质研究被引量：7: 2016年; 以壳聚糖微球为载体制备固定化脂肪酶制剂并研究其催化性质.首先,制备壳聚糖微球,用2%醋酸溶液溶解壳聚糖,以液体石蜡为分散剂制成壳聚糖微球;然后,通过戊二醛交联制备固定化脂肪酶制剂,并研究其催化性质.结果表明:壳聚糖微球在2%戊二醛浓度下常温下交联9 h,脂肪酶固载率可达60%.与游离脂肪酶相比,壳聚糖微球固定化脂肪酶的最适底物、最适p H值及最适温度分别转变为4-硝基苯基辛酸酯,p H 8.57及50℃.固定化脂肪酶重复实验6次后仍保留有47.7%的催化活性,置于60℃下4 h酶活保留73%,其金属离子K+和Mg2+最适浓度分别为0.15 mol/L,0.10 mol/L.; 邱玉龙邓冬梅韦扬辉潘淑兰孙宇飞; 关键词：壳聚糖微球固定化脂肪酶

脂肪酶Lip2在蚕丝表面交联固定及其催化性质被引量：2: 2018年; 为开发廉价高效的蚕丝载体固定化酶制剂,研究使用1-乙基-3-(3-二甲基丙基)碳化亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和戊二醛(GA)三者组成不同类型的交联剂在蚕丝表面固定解脂耶氏酵母脂肪酶Lip2,并研究固定化酶的催化特性.分别使用EDC/NHS、GA、EDC/NHS+GA活化蚕丝载体,并与Lip2共价交联制备得固定化脂肪酶Lip2(EDC/NHS)、Lip2(GA)和Lip2(EDC/NHS+GA).结果表明:Lip2(GA)的酶蛋白固定量最少但比酶活最高,而Lip2(EDC/NHS+GA)的酶蛋白固定量最高但比酶活最低.各固定化酶的最适pH皆为8.03,比游离Lip2偏碱.最适温度除了Lip2(EDC/NHS)为50℃,其他固定化酶与游离Lip2同为40℃.K^+对各固定化酶的最适激活浓度为0.10 mol·L^(-1),相比Lip2的0.15 mol·L^(-1)偏小;Ca^(2+)对所有酶都表现为促进作用,而Cl^-对所有酶无明显促进或抑制作用.Lip2(GA)的热稳定性最高,而Lip2(EDC/NHS+GA)重复使用性最好.; 邓冬梅潘淑兰劳振华孙宇飞; 关键词：蚕丝固定化酶脂肪酶交联

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潘淑兰