刘秦
- 作品数：12 被引量：31H指数：4
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- 南亚瓦鳞苔水提液对柱花草种子萌发及其幼苗生长的影响被引量：3
- 2011年
- 为研究苔藓植物对柱花草幼苗生长的影响,选取苔藓植物中的苔类植物南亚瓦鳞苔(Trocholejeuneasandvicensis)为试材,以其配子体水提液分别对热研2号、热研5号和热研7号等3个柱花草品种进行处理,测定其发芽率、生长量、鲜重和干重。结果表明,在水提液浓度为2.5～7.5 g/L时可显著提高热研5号、热研7号柱花草种子萌发率;在浓度2.5～7.5 g/L时可显著提高热研2号种子发芽指数;在浓度为100 g/L时,可显著降低热研5号的鲜重,浓度为5.0 g/L时,可显著提高热研7号的幼苗干重。
- 孙悦姚广龙张莉娜杨好伟刘秦
- 关键词：苔藓植物柱花草水提液幼苗生长
- 利用毒素蛋白基因ccdB构建高效低背景T-载体被引量：3
- 2016年
- 高效低背景T-载体的构建可显著提高克隆PCR产物的效率。笔者介绍1种在实验室常规条件下简单快捷制备高效低背景T载体的方法。将含有限制酶Xcm I酶切位点的ccd B致死基因作为插入DNA片段连接到p MD19-T Simple Vector骨架上得到重组质粒,通过菌落PCR、酶切分析及测序验证正确的重组质粒经限制酶Xcm I酶切即得到T-载体。该T-载体含有的ccd B致死基因可以降低载体自连的背景干扰,提高了T-A克隆效率,具有较高的阳性克隆率,继承了p MD19-T Simple Vector的优点,与普通T-载体相比,还具有高效、低背景的优越性。整个操作过程简易可行,具备一定的应用前景。
- 耿晓姗刘秦党会杰武军政罗丽娟
- 关键词：SIMPLEVECTOR
- 木薯己糖载体基因MeSTP7的克隆与功能验证被引量：4
- 2017年
- 己糖载体属于单糖转运蛋白家族,具有转运单糖类物质的作用,广泛存在于植物体各组织中并参与植物体的生长与发育。为了研究木薯己糖载体转运单糖的能力与对木薯生长发育的影响,本试验利用木薯全基因组数据库,通过RT-PCR方法从木薯KU50中克隆得到了木薯己糖载体基因MeSTP7,酵母异源表达与亚细胞定位实验结果表明MeSTP7具有转运葡萄糖、果糖、甘露糖和半乳糖的能力,定位在细胞膜上;qRT-PCR结果表明MeSTP7在高淀粉木薯品种KU50和低淀粉木薯品种CAS36根发育过程中的表达量均呈现逐渐降低的趋势,MeSTP7在KU50和CAS36的叶片中的表达量均为最高。本研究克隆得到了木薯己糖载体基因MeSTP7,并验证了MeSTP7的功能,为木薯己糖载体的研究提供了理论参考。
- 武军政刘秦党会杰吴远航罗丽娟
- 关键词：木薯亚细胞定位
- 木薯试管微型薯与田间块根的结构发育比较被引量：1
- 2014年
- 以华南8号木薯（Manihot esculenta Crantz cv.South China 8）无菌苗嫩茎为材料,采用植物组织培养方法获得试管微型薯,利用组织解剖学及组织化学方法研究木薯试管微块根（微型薯）的形态结构发育以及田间木薯块根形态结构发育,结果表明：木薯在组培条件下形成的微型薯没有次生结构的分化,微型薯的膨大在结构上表现为初生根皮层细胞体积的增大以及细胞间隙的增加。而田间块根的膨大在结构上表现为次生结构的产生以及大量淀粉的积累;组培微型薯和田间块根淀粉积累相比,存在时间上和空间上的差异,早期生长的微型薯没有淀粉的积累,生长5-10 d后在皮层薄壁细胞可见淀粉粒分布。而田间生长的木薯块根的淀粉是在初生根产生次生结构后就开始积累,淀粉主要积累在次生木质部,少部分分布于皮层薄壁细胞和韧皮部。
- 唐绪飞钏秀娟刘秦罗丽娟李开绵
- 关键词：木薯组培微型薯块根
- 一种快速高效的基于CcdB致死基因和SmaⅠ酶切位点的克隆体系构建被引量：3
- 2017年
- PCR片段快速准确的构建到克隆载体是分子生物学实验的关键技术之一。快速高效低背景克隆体系的建立可以显著提高PCR产物的克隆效率及大大缩短克隆时间。本实验室开发出一种在常规条件下进行快速高效PCR连接的克隆体系。本研究将含有ccd B致死基因的gateway cassette片段,插入p UC18载体,成功构建p UC18-Ccd B致死载体,在此基础上结合ccd B致死基因内部的SmaⅠ酶切位点,开发出将PCR产物、SmaⅠ限制性内切酶、T4连接酶及p UC18-Ccd B致死载体一起加入离心管后共孵育10 min,即可转化大肠杆菌。对插入片段的重组质粒进行了酶切,PCR和测序验证,证实了该克隆体系高效可行,具有极高的阳性克隆率。该体系的建立具有高效低背景的特点,并且极大的减少了克隆步骤,省去了胶回收及双酶切过程,缩短了克隆时间,同时继承了p UC18载体的优点,具有很强的应用性及推广性。
- 党会杰刘秦许文茸张传玲王森涂鲁迪牛晓磊
- 木薯SWEET1基因的分子克隆、亚细胞定位与功能分析被引量：4
- 2017年
- SWEET基因家族为新发现的一类糖转运蛋白家族,具有转运蔗糖及单糖的功能,在真核生物中广泛存在,其特点为具有1~2个MtN3_slv结构域及7个跨膜结构域,对植物生长发育、生理代谢及植物-病原菌互作等方面具有重要的调控作用。为了探索热带作物木薯中SWEET基因的功能,本研究采用RT-PCR技术,从木薯Ku50成熟叶片中克隆得到MeSWEET1基因的编码序列,并对其进行了生物信息学预测分析和功能初步研究。本研究结果表明:MeSWEET1蛋白含有植物SWEET家族两个保守的MtN3_Slv功能域,还具有7个跨膜结构域。系统进化树分析显示,MeSWEET1与拟南芥AtSWEET1、水稻OsSWEET1a和OsSWEET1b亲缘关系最近,属于SWEET蛋白家族进化树的Clade I分枝class II小家族。亚细胞定位结果表明,MeSWEET1蛋白定位于细胞膜上。组织特异性表达分析揭示,MeSWEET1在木薯成熟叶片中相对表达量最高,而在新叶和果实中相对表达量最低。本研究的结果将为进一步研究木薯MeSWEET1基因在糖转运及与病原互作等方面的功能奠定了初步的理论基础。
- 刘秦马畅冯世鹏唐枝娟陈银华罗丽娟牛晓磊
- 关键词：木薯亚细胞定位
- 白叶枯病菌侵染下的水稻内参基因稳定性被引量：5
- 2017年
- 水稻白叶枯病是由黄单胞菌水稻致病变种引起的一种细菌性枯萎病害,严重危害水稻产量。水稻受白叶枯侵染后,通过对相关基因表达变化进行检测,是研究水稻-白叶枯病菌分子互作机理的一种重要手段。为了筛选出稳定表达的内参基因,以确保后续基因表达分析结果的可靠性,本研究以接种了白叶枯病菌PXO61、PXO99的水稻叶片为研究材料,在侵染后不同时间点取样,对6个常用的水稻内参基因(TUB,EF1α,UBQ5,ACT,18Sr RNA和GAPDH)的表达进行qRT-PCR检测并用ge Norm、Norm Finder和Best Keeper三种软件对6对常用内参基因的稳定性进行了分析。结果发现:6个内参基因在两种白叶枯病菌侵染后的表达量变化均有差异;综合三种软件算法,受白叶枯PXO61和PXO99侵染后水稻叶片中表达最稳定的基因为EF1α、ACT和TUB,为水稻响应白叶枯病菌基因表达及其进一步的功能研究提供了参考和借鉴。
- 唐枝娟刘秦肖晓蓉牛晓磊
- 关键词：水稻白叶枯QRT-PCR
- 5种苔藓植物水提液对黄瓜种子萌发及幼苗生理特性的影响被引量：4
- 2010年
- 为研究苔藓植物对作物种子萌发及幼苗生理特性的影响,以弯叶白发藓(Leucobryum aduncum)、灰羽藓(Thuidium glaucinum)、脆叶锦叶藓(D icranoloma fragile)、短叶剪叶苔(Herbertus sendtneri)和透明叶苔(Junger-mannia hyalina)不同浓度的水提液培养黄瓜种子,测定了5种苔藓植物水提液对黄瓜种子萌发率、幼苗根和芽的生长量与鲜重、叶绿素、可溶性糖的含量等指标的影响。结果表明:5种苔藓水提液在一定浓度下可不同程度地促进黄瓜幼苗根和芽的生长,短叶剪叶苔能够提高黄瓜幼苗叶绿素的含量,灰羽藓、脆叶锦叶藓、短叶剪叶苔和透明叶苔可提高黄瓜幼苗可溶性糖的含量。
- 孙悦张莉娜杨好伟刘秦
- 关键词：苔藓植物黄瓜种子萌发生理特性
- 木薯糖转运蛋白家族基因全基因组鉴定和功能分析
- 植物糖转运蛋白主要介导糖类物质的运输活动,参与“源库”组织间碳水化合物的装载同卸载,在植物生长发育过程中发挥着重要作用。木薯是重要的块根类作物,块根数目和块根淀粉含量是其产量的关键指标。研究糖转运蛋白基因对解析木薯的糖卸...
- 刘秦
- 关键词：木薯亚细胞定位
- 文献传递
- 5种藓类植物水提液对黄瓜幼苗生长的影响被引量：8
- 2010年
- 为研究藓类植物提取液对作物幼苗生长发育的影响,以5种藓类植物配子体不同浓度的水提液培养黄瓜种子,测定了种子萌发过程中胚芽和胚根的生长量、鲜重及干重等指标。结果表明:薄壁卷柏藓(Racopilum cuspidigerum)、疏网美喙藓(Eurhynchium laxirete)、毛枝雀尾藓(Hypopterygium trichocladon)和海岛花叶藓(Calymperes taitense)配子体的水提液在较低浓度下能提高黄瓜种子萌发的质量。其浓度为0.01g/mL时,对黄瓜幼苗的生长有明显促进作用;浓度大于0.04g/mL时,则具有抑制作用,抑制程度的大小因浓度的提高而加强。
- 张莉娜杨好伟罗丽华文仕兰孙悦刘秦王赛
- 关键词：苔藓植物黄瓜幼苗生长
