李思
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>
- 发文基金：四川省科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 质膜型唾液酸酶NEU3活性对骨肉瘤MG-63细胞增殖与凋亡的影响
- 2019年
- 目的探讨质膜型唾液酸酶(NEU3)活性对骨肉瘤MG-63细胞在体外增殖及凋亡的调控作用。方法体外培养MG-63细胞,以抗NEU3抗体免疫荧光染色,显示NEU3在MG-63细胞中的定位;以0 nmol/L唾液酸酶活性抑制剂(DANA)处理组或0 μg/ml抗NEU3抗体处理组为空白对照组,以10、20、50 nmol/L DANA或0.5、1.0、2.0 μg/ml抗NEU3抗体处理24 h或48 h后,采用CCK-8比色法、流式细胞术分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率,Western blotting法检测癌基因相关蛋白Ras蛋白和Bcl-2蛋白的表达水平。结果免疫荧光染色结果显示,NEU3表达定位于MG-63细胞质中。作用48 h后,0、10、20、50 nmol/L DANA处理组细胞增殖抑制率分别为0、15.10%±3.23%、41.46%±2.31%、64.68%±4.12%,差异具有统计学意义(F=99.90,P<0.001),不同DANA浓度组间两两比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05);0、0.5、1.0、2.0 μg/ml抗NEU3抗体封闭处理48 h后,MG-63细胞增殖抑制率分别为0、9.34%±1.53%、19.66%±4.18%、42.50%±5.68%,差异具有统计学意义(F=25.67,P<0.001),不同抗体浓度组间两两比较,除0.5 μg/ml与1.0 μg/ml组比较差异无统计学意义外(P>0.05),其余组间差异均具有统计学意义(均P<0.05)。采用不同浓度DANA(0、10、20、50 nmol/L)处理MG-63细胞24 h后,凋亡率分别为4.05%±0.07%、4.15%±0.23%、12.85%±1.48%、8.29%±0.86%,组间差异具有统计学意义(F=23.21,P<0.001),不同DANA浓度组间两两比较,除0 nmol/L与10 nmol/L、20 nmol/L与50 nmol/L处理组间差异无统计学意义外(P>0.05),其余组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05);以不同浓度NEU3抗体(0、0.5、1.0、2.0 μg/ml)处理MG-63细胞24 h后,细胞凋亡率分别为4.05%±0.07%、20.13%±2.97%、20.29%±2.82%、20.58%±0.70%,组间差异有统计学意义(F=15.36,P=0.001),不同抗体浓度组间两两比较,0 μg/ml与各处理组间差异有统计学意义(均P<0.05),而各处理组间差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting结果显示随DANA�
- 杨晓李思彭锦王琳吴衣论冯颖
- 关键词：骨肉瘤MG-63细胞细胞凋亡率膜型BLOTTING
- 唾液酸酶1活性变化对前列腺癌PC3和DU145细胞行为的影响被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨唾液酸酶1(Neu1)活性变化在两种前列腺癌细胞PC3和DU145中对肿瘤生物学行为的影响。方法:通过Western印迹检测Neu1在PC3和DU145肿瘤细胞中的表达,并通过唾液酸酶抑制剂和抗体封闭的方法抑制Neu1酶活性后,运用CCK-8检测细胞增殖和Transwell检测细胞侵袭性改变。结果:实验结果显示Neu1在两种前列腺癌细胞中表达无明显差异,抑制Neu1酶活性后,两种肿瘤细胞的增殖均有所增加,侵袭能力增强。结论:Neu1活性与两种前列腺癌细胞的细胞生物学行为相关,可抑制前列腺癌细胞的增殖和侵袭。
- 王梦秋王晨霄李思赵伟马芳马学
- 关键词：前列腺癌细胞生物学行为
- 唾液酸酶对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响
- 2016年
- 目的探讨唾液酸酶与子宫内膜癌细胞Ishikawa浸润、增殖和凋亡的关系。方法培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,并分成对照组和处理组,处理组给予唾液酸酶活性抑制剂(DANA)处理,比对两组细胞上清液的唾液酸酶活性后通过免疫荧光检测、流式细胞学或MTT实验检测对照组和处理组细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达水平、细胞增殖核抗原(PCNA)水平、凋亡和增殖情况。结果处理组上清液唾液酸酶活性减弱且细胞MMPs的表达降低,处理组的细胞凋亡率明显降低,各组细胞的增殖能力无差异。结论唾液酸酶可影响Ishikawa细胞的侵袭性和凋亡率,但对细胞的增殖能力无明显影响。
- 熊英张建国苏冬梅莫家明李思马芳
- 关键词：唾液酸酶肿瘤增殖凋亡
- RNA干扰降低唾液酸酶3表达对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡影响的实验研究被引量：1
- 2018年
- 目的探讨下调唾液酸酶3(neuraminidase 3,NEU3)表达对人成骨肉瘤MG-63细胞体外增殖及凋亡的调控作用。方法取MG-63细胞行免疫荧光染色,观察MG-63细胞中NEU3的表达情况。然后根据处理方法不同将细胞分为5组:正常对照组(A组),不作任何处理;30、50、100 nmol/L NEU3 RNA干扰组(分别为B、C、D组),分别以浓度为30、50、100 nmol/L的NEU3小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染细胞;阴性对照组(E组),使用不同种属阴性对照siRNA(小鼠actin siRNA,50 nmol/L)转染细胞。转染后采用实时荧光定量PCR检测NEU3 mRNA水平,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Ras蛋白和Bcl-2蛋白表达情况。结果荧光显微镜观察示NEU3表达集中在MG-63细胞的细胞质中。实时荧光定量PCR检测示,培养24 h后B、C、D组NEU3 mRNA相对表达量明显低于A、E组(P<0.05);随着siRNA浓度升高,B、C、D组NEU3 mRNA相对表达量呈下降趋势(P<0.05)。CCK-8法检测示,培养48 h后随NEU3 si RNA浓度升高,B、C、D组MG-63细胞抑制率显著升高,成活率显著降低,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测示,培养24 h后B、C、D组MG-63活细胞逐渐减少、坏死细胞逐渐增加(P<0.05)。B、C、D组细胞凋亡率与A组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与E组比较,C、D组细胞凋亡率显著降低(P<0.05),B、E组间差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测示,培养24 h后,与A、E组比较,B、C、D组Ras和Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),而D组以上蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论 NEU3表达下降能够抑制骨肉瘤MG-63细胞的成活,促进细胞凋亡,提示NEU3可能是治疗骨肉瘤的潜在药物靶点。
- 杨晓李思向尚吴衣论王琳彭锦冯颖
- 关键词：唾液酸酶MG-63细胞骨肉瘤细胞增殖
- NEU3对人前列腺癌DU145细胞生物学行为的影响被引量：3
- 2019年
- 目的:探讨神经氨酸酶3(NEU3)与人前列腺癌DU145细胞活力、侵袭和凋亡的关系,并探讨其分子机制。方法:体外培养人前列腺癌DU145细胞,并分为空白对照组和处理组,处理组再分别给予神经氨酸酶活性抑制剂DANA处理和RNA干扰靶向沉默NEU3,采用CCK-8法检测细胞的活力;Transwell法检测细胞侵袭能力;q PCR法检测2种处理方式对凋亡抑制蛋白Bcl-2 mRNA水平的影响;Western blot法检测2种处理方式对NEU3、基质金属蛋白酶2(MMP2)和Bcl-2表达的影响;流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:与空白对照组相比,DANA处理后前列腺癌细胞的NEU3表达无明显变化,细胞活力增强,MMP2蛋白表达减少,侵袭力减弱,凋亡无明显变化,Bcl-2的mRNA和蛋白表达减少(P <0.05);NEU3沉默后NEU3蛋白表达减少,细胞活力增强,MMP2蛋白表达和细胞侵袭力无明显变化,凋亡能力增强,Bcl-2的mRNA和蛋白表达均下降(P <0.05)。结论:抑制NEU3可以减弱人前列腺癌DU145细胞活力,增强细胞凋亡能力,但对侵袭能力无明显影响。
- 王晨霄王梦秋李思李思冯颖吴衣论王琳马学
- 关键词：细胞侵袭细胞活力前列腺癌
